孫鮮剛

（安徽省來安縣雷官鎮(zhèn)獸醫(yī)站，安徽來安　239224）

口蹄疫滅活疫苗與合成肽疫苗免疫效果對比試驗

孫鮮剛

（安徽省來安縣雷官鎮(zhèn)獸醫(yī)站，安徽來安239224）

使用豬O型口蹄疫高效滅活疫苗與豬O型口蹄疫合成肽疫苗免疫28～35日齡商品豬，采用正向間接血凝試驗和VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測免疫前和首次免疫后14 d、28 d、35 d、42 d、56 d及二次免疫后7 d、14 d、28 d抗體水平。同時，對接種疫苗的實驗豬進(jìn)行免疫應(yīng)激觀察。結(jié)果顯示：注射兩種疫苗試驗豬未出現(xiàn)不良免疫副反應(yīng)；采用正向間接血凝試驗檢測，兩種疫苗免疫抗體合格率差異不顯著；運用VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA進(jìn)行檢測，注射合成肽疫苗試驗豬二免7 d后抗體水平快速上升，抗體檢測合格率達(dá)到73%～94.12%。O型口蹄疫滅活免疫抗體不適宜用此檢測方法。

口蹄疫疫苗免疫效果

口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的偶蹄動物的一種急性、熱性和高度接觸性的傳染病。世界上許多國家和地區(qū)都有該病的流行與發(fā)生，嚴(yán)重威脅著畜牧業(yè)的發(fā)展，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。國際獸疫局（OIE）于2008年1月21日將該病列入多種動物共患病，我國將該病列為一類動物傳染病之首。目前，對該病我國主要采取以免疫注射為主的綜合性防控措施來預(yù)防和控制豬口蹄疫。來安縣豬口蹄疫防控過程主要是豬O型口蹄疫滅活疫苗和合成肽O型口蹄疫疫苗，為探明兩種疫苗免疫反應(yīng)情況和免疫抗體變化規(guī)律，本試驗以商品豬為免疫對象，開展了口蹄疫滅活疫苗與合成肽疫苗免疫效果試驗，為臨床免疫提供參考。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗疫苗

上海某生物制品公司生產(chǎn)的豬O型口蹄疫滅活疫苗，上海某生物制品有限公司生產(chǎn)的合成肽O型口蹄疫苗，以上疫苗均為政府統(tǒng)一采購。

從2個豬場中選擇28～35日齡仔豬40頭，分成A組、B組、C組、D組，每組10頭。按照疫苗說明書免疫劑量，A組、B組注射合成肽疫苗，C組、D組注射O型口蹄疫滅活疫苗。1個月后，C組、D組兩組加強(qiáng)免疫一次，分組及免疫情況詳見表1。

表1　試驗動物分組與處理

1.1.3試劑

O型口蹄疫正向血凝試劑、陰陽性血清（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)）；口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA試劑盒（上海優(yōu)耐生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)）。

1.2方法

1.2.1注苗的疫苗反應(yīng)觀察

各組在首次免疫后一周內(nèi)，觀察采食情況，每天定時對豬群體溫進(jìn)行測量，以觀察疫苗反應(yīng)情況。

1.2.2血清樣品

對首次免疫前、首次免疫后14d、28d及二次免疫后7d、14d、28d、60d，每組采集全血樣品，分離血清。

擊鼓、擊镲、敲鑼者服飾相同，均頭扎黃頭巾、系箍。身穿黃色對襟上衣、藍(lán)或黑色燈籠褲，腰系紫或黑色四喜帶，也可系一條紅綢子，腳穿白球鞋或黑圓口布鞋。

1.2.3免疫時間及劑量

28日齡首免，58日齡后加強(qiáng)免疫一次。免疫劑量按生產(chǎn)廠家推薦劑量進(jìn)行，其他疫苗按常規(guī)免疫程序進(jìn)行。

1.2.4檢測方法

按試劑盒說明書進(jìn)行（過程略）。

2　結(jié)果

2.1疫苗反應(yīng)情況

2.1.1體溫變化

各組免疫后一周內(nèi)，豬群體溫均呈現(xiàn)不同程度的波動，但波動范圍均在豬體正常體溫范圍之內(nèi)。使用合成肽疫苗的試驗組，免疫后一周內(nèi)豬群體溫在38.54℃～39.86℃之間波動，使用O型口蹄滅活苗的對照組體溫變化范圍為38.48℃～39.76℃。體溫檢測結(jié)果詳見表2。

表2　免疫后一周內(nèi)豬體溫變化情況　單位：℃

2.1.2采食量

各組免疫后3 d內(nèi)采食量有所下降，第4 d恢復(fù)正常，屬于正常免疫副反應(yīng)。

2.1.3過敏反應(yīng)

用于試驗的40頭仔豬，僅1頭注射O型口蹄疫滅活苗的仔豬出現(xiàn)過敏反應(yīng)，使用腎上腺激素后恢復(fù)正常。

2.2抗體檢測結(jié)果

2.2.1FMD正向血凝抗體檢測結(jié)果

各組在免疫前后分別做了FMD正向血凝抗體檢測，結(jié)果詳見表3。

表3　各組免疫后正向血凝抗體檢測結(jié)果

從表3可以看出，無論是多肽苗還是滅活疫苗，免疫28 d后，免疫抗體均符合農(nóng)業(yè)部要求，加強(qiáng)免疫較一次免疫有明顯的抗體上升趨勢，且維持時間較長。

2.2.2病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測結(jié)果

各組在免疫前后分別做了VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測，結(jié)果詳見表4。

表4各組FMD病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率

組別免疫前第14d第28d第35d第42d第56d A0060%60%70%50% B04.35%35%73.33%86.67%94.12% C000000 D000000

從表4可以看出，使用合成肽疫苗后的各組在免疫后第14 d時可以產(chǎn)生FMD病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體，并且到免疫后第56 d時仍可檢測到抗體，加強(qiáng)免疫后的抗體陽性率明顯提高。使用O型口蹄疫滅活疫苗的各組無VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體的檢出陽性。

3　討論

（1）從免疫反應(yīng)情況看，使用口蹄疫合成肽疫苗和O型口蹄疫疫苗后，均無嚴(yán)重的疫苗反應(yīng)，臨床使用副作用小，安全性性較高。

（2）從監(jiān)測結(jié)果來看，使用口蹄疫 O型合成肽疫苗與O型口蹄疫滅活疫苗，均可以產(chǎn)生較高的正向血凝抗體，加強(qiáng)免疫組比較免疫一次的效果好。

（3）由于豬O型口蹄疫合成肽疫苗采用VPl中的一段多肽作為抗原，不含NS蛋白，使用口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白ELISA抗體檢測，免疫后第14d時即可檢測到FMD病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體，而O型口蹄疫滅活疫苗則不宜用此法檢測。

孫鮮剛（1967-），男，助理獸醫(yī)師。