林棟，陳新，史資，劉梁

（武漢輕工大學(xué)生物與制藥工程學(xué)院，湖北武漢430023）

紫萁孢子粉中脂肪酸成分的含量分析

林棟，陳新*，史資，劉梁

（武漢輕工大學(xué)生物與制藥工程學(xué)院，湖北武漢430023）

采用回流提取法，以95%乙醇溶液為提取劑，從紫萁孢子粉中提得到8個脂肪酸成分；通過GC-MS技術(shù)及面積歸一化法測定了所得各脂肪酸成分的含量。結(jié)果顯示，紫萁孢子粉中各脂肪酸含量分別為棕櫚酸50.20%，亞油酸16.96%，油酸13.48%，硬脂酸7.69%，亞麻酸5.56%，花生酸3.42%，山崳酸2.08%，豆蔻酸0.60%。

紫萁孢子粉；脂肪酸；GC-MS

紫萁（又稱薇菜）（Osmunda japonica Thunb.）屬于厥類植物門，紫萁科（Osmun-daceae），紫萁屬（Osmunda）的一種多年生植物［1］，主要分布在我國南方，在秦嶺以南山地海拔300 m～2 400 m均有分布［2］。其孢子儲藏于孢子葉羽片沿中肋兩側(cè)背面密生的孢子囊，紫萁孢子一般4月～5月成熟，成熟孢子囊呈綠色，基部微黃。紫萁葉株全草皆可入藥并可作為飼料；地下莖可作貫眾并開發(fā)成中成藥制劑；其孢子體嫩葉可加工成野菜，營養(yǎng)豐富，味道鮮美；其幼葉上所覆蓋的絨毛具有抗菌凝血和促進(jìn)細(xì)胞修復(fù)等功效［3］。紫萁孢子量大，成本低，然而對其孢子食用藥用的價值研究報道甚少，其中的化學(xué)成分中脂肪酸的測定鮮見報道。本文采用GC-MS聯(lián)用的方法對四月中旬采集的薇菜孢子粉中的脂肪酸含量進(jìn)行了分析，為薇菜孢子的進(jìn)一步開發(fā)和利用的提供理論參考。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

GC-MS聯(lián)用儀（Agilent 7890 GC System/Agilent 5975 MS System）；KQ-400DB型數(shù)控聲波清洗器；離心機(jī)。

石油醚（60℃～90℃），氫氧化鉀，氯化鈉，硫酸（均為分析純，國藥）；甲醇，正己烷（均為色譜純，F(xiàn)isher Scientific公司生產(chǎn)）；薇菜孢子粉為4月中下旬采集于湖北恩施。

1.2GC-MS聯(lián)用條件

色譜條件：HP-FFAP毛細(xì)管柱（G35），30 m× 0.25 mm×0.25 μm（膜厚）；程序升溫：初溫140℃→5℃/min→190℃（停留1 min）→3℃/min→220℃（停留10 min）；分流比：10∶1；進(jìn)樣量：1 μL；進(jìn)樣口溫度：230℃；載氣：高純氦氣（純度99．999%），流速：0.8mL/min。

質(zhì)譜條件：電離方式：EI；電離能量：70 eV；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；采集方式：全掃描Scan，質(zhì)量掃描范圍40 amu～390 amu，標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫NIST08版。

1.3樣品處理

將薇菜孢子粉200 g用95%乙醇回流提取2次每次3 h，回收乙醇，加入適量的水，用石油醚（60℃～90℃）萃取數(shù)次至石油醚層接近無色，濃縮后用適量的硅膠（200目～300目）拌樣，干燥成粉末后經(jīng)硅膠柱色譜柱石分離，用石油醚洗脫。收集石油醚組分，濃縮，即的黃綠色油狀樣品。

取黃綠色油狀樣品0.2 g于20 mL具塞試管中，加入4 mL正己烷，搖勻。再加入4 mL 0.5 mol/L的氫氧化鉀-甲醇溶液，震蕩，50℃回流20 min，加飽和氯化鈉水溶液至刻度，靜置分層，將上液轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中，于離心機(jī)上以2000r/min的轉(zhuǎn)速離心沉淀10min，取上清液為GC-MS進(jìn)樣樣品。

2結(jié)果與討論

在對石油醚洗脫組分經(jīng)甲酯化后進(jìn)行GC-MS分析，其總離子流色譜圖（圖1）共有11個峰，經(jīng)GC-MS聯(lián)用儀標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫NIST08的計數(shù)機(jī)檢索，鑒定出其中8種是脂肪酸，通過面積歸一法測定了各組分的相對百分含量，實驗結(jié)果如圖表1所示，薇菜孢子粉石油醚洗脫部分棕櫚酸（hexadecanoic acid）含量較高50.20%，其次是亞油酸16.96%和油酸13.48%，其中硬脂酸7.69%，亞麻酸5.56%，花生酸3.42%，山崳酸2.08%，而豆蔻酸0.60%。

圖1　薇菜孢子粉中脂肪酸總離子圖Fig.1Total ion chromatogram for delspray from Osmunda Japonica spore power

表1　薇菜孢子粉中脂肪酸成分分析結(jié)果Table 1Analysis of delspray from Osmunda Japonica spore power

多不飽和脂肪酸（PUFAs）是人類的必須脂肪酸，對人體有重要的生理功能，能調(diào)節(jié)人體的脂質(zhì)代謝，治療和預(yù)防心腦血管疾病，抗癌，對抗肥胖，促進(jìn)生長發(fā)育和提高幼體的成活率等［4］。薇菜孢子粉脂肪酸中不飽和脂肪酸占36%，其中多不飽和脂肪酸占22.56%（亞油酸16.96%，亞麻酸5.56%），亞油酸在我們?nèi)粘Ｊ秤玫囊后w植物有中普遍存在，一般植物油中含量為40%左右，也有高達(dá)70%～80%如紅花籽油，而亞麻酸在亞麻籽油高達(dá)57%［5］，因此薇菜孢子粉多不飽和脂肪酸開發(fā)沒有優(yōu)勢。薇菜孢子粉脂肪酸中棕櫚酸高達(dá)50%，并且棕櫚酸在醫(yī)藥，化妝品，顏料等領(lǐng)域都有應(yīng)用，可以考慮作為棕櫚酸的來源。

3結(jié)論

本研究利用GC-MS聯(lián)用技術(shù)分析了薇菜孢子粉中脂肪酸的成分和含量，其中各脂肪酸含量分別為棕櫚酸50.20%，亞油酸16.96%，油酸13.48%，硬脂酸7.69%，亞麻酸5.56%，花生酸3.42%，山崳酸2.08%，豆蔻酸0.60%，為薇菜孢子粉的進(jìn)一步開發(fā)和利用奠定理論基礎(chǔ)。

［1］中國科學(xué)院植物研究所.中國高等植物圖鑒［M］.北京：科學(xué)出版社，1980：124-125

［2］羅世家.薇菜生態(tài)環(huán)境的分析［J］.湖北民院學(xué)報，2001，19（4）：8-10

［3］王謀強，張朝君.我國南方薇菜的研究現(xiàn)狀及其發(fā)展對策［J］.貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（4）：135-136

［4］鮑建民.多不飽和脂肪酸的生理功能及安全性［J］.中國食品與營養(yǎng)，2006（1）：45-46

［5］黃寶璽，王大為，王金鳳.多不飽和脂肪酸的研究進(jìn)展［J］.農(nóng)業(yè)工程技術(shù)，2009（8）：26-30

Analysis for Delspray from Osmunda Japonica Spore Powder

LIN Dong，CHEN Xin*，SHI Zi，LIU Liang
（School of Biology and Pharmaceutical Engineering，WuHan Polytechnic University，Wuhan 430023，Hubei，China）

With 95%ethanol solution as the extraction agent，eight fatty acid composition were extracted form osmunda japonica spore powder by reflux extraction method.The content of each fatty acid composition was determined by GC-MS with area normalization method.The results showed，the fatty acid contents in osmunda japonica spore powder were hexadecanoic acid 50.20%，elinoleic acid 6.96%，oleic acid 13.48%，stearic acid 7.69%，linolenic acid 5.56%，arachidic acid 3.42%，docosanoic acid 2.08%，myristic acid 0.60%.

Osmunda japonica spore；delspray；GC-MS

10.3969/j.issn.1005-6521.2015.10.027

2015-01-27

國家自然科學(xué)基金面上項目（批準(zhǔn)號：31370369）

林棟（1996—），男（漢），碩士研究生，研究方向：天然產(chǎn)物研究與開發(fā)。

陳新（1978—），男（漢），副教授，博士，研究方向：食品活性物質(zhì)研究與開發(fā)。