劉明超， 金 融， 徐雪梅， 陳 剛， 馬向東

（青島蔚藍(lán)生物集團(tuán)有限公司飼料生物應(yīng)用研發(fā)中心，山東青島 266000）

芽孢桿菌可防治疾病，促進(jìn)畜禽生長，且具有無毒無殘留、耐高溫制粒等優(yōu)點(diǎn) （潘康成等，2009）。用芽孢桿菌等微生態(tài)添加劑部分或者完全替代抗生素作為飼料添加劑，正越來越得到研究者們的廣泛關(guān)注。本試驗(yàn)對(duì)比研究了芽孢桿菌和抗生素對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、免疫指標(biāo)以及腸道發(fā)育的影響，為芽孢桿菌在肉雞生產(chǎn)中替代飼用抗生素提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 芽孢桿菌HB1，主要成分為枯草芽孢桿菌（100億cfu/g，包衣劑型），由青島蔚藍(lán)生物研發(fā)中心研發(fā)組提供；抗生素為阿維拉霉素，市售。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選用900羽1日齡羅斯308肉公雞，隨機(jī)分為3組，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1、2組分別在基礎(chǔ)日糧中添加100 g/t阿維拉霉素和300 g/t芽孢桿菌HB1，每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30羽雞，試驗(yàn)期36 d。參照NRC肉用仔雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和山東肉雞商品日糧營養(yǎng)水平制備肉雞試驗(yàn)日糧，日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)雞采用地面平養(yǎng)，自由采食和飲水。采用整舍育雛，暖風(fēng)爐水暖控溫，最初進(jìn)雛時(shí)舍溫為34℃，以后每周降低2℃。試驗(yàn)期為36 d。

試驗(yàn)期間免疫程序?yàn)椋?日齡新城疫-傳支二聯(lián)苗滴鼻，同時(shí)新城疫-流感二聯(lián)油苗皮下注射；14日齡法氏囊飲水；21日齡新城疫飲水。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

1.4.1 生產(chǎn)性能測(cè)定 分別在肉雞0、7、21、35日齡時(shí)，對(duì)整欄的雞全部進(jìn)行空腹稱重并統(tǒng)計(jì)采食量，以計(jì)算均只日增重（ADG）、均只日采食量（ADFI）、料肉比（FCR）、出欄體重和成活率等指標(biāo)。

1.4.2 免疫水平檢測(cè) 36日齡時(shí)每組隨機(jī)取12只雞采血，分離血清，檢測(cè)血清球蛋白含量及新城疫抗體水平。

1.4.3 免疫器官指數(shù)檢測(cè) 36日齡時(shí)每組隨機(jī)取12只雞宰殺，分別取法氏囊、脾臟、胸腺稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)。計(jì)算公式如下：

器官指數(shù)＝器官重量（g）/肉雞體重（kg）。

1.4.4 腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)及發(fā)育狀況測(cè)定 36日齡時(shí)每組隨機(jī)取5只雞的十二指腸、空腸、回腸，10%福爾馬林固定，石蠟切片，十二指腸、空腸、回腸取特定部位，每個(gè)病料分別取5個(gè)連續(xù)切片，HE染色，鏡檢觀察各段腸管發(fā)育及健康狀況，測(cè)量并記錄每個(gè)切片上的所有絨毛高度和隱窩深度。

1.5 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件中ANOVA方法進(jìn)行分析，用Duncan’s法分析數(shù)據(jù)差異顯著性。結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 芽孢桿菌與抗生素對(duì)肉雞各階段生產(chǎn)性能的影響 由表2可見，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)2組肉雞試驗(yàn)前期、中期和后期ADFI、ADG和FCR差異均不顯著。在肉雞0～7日齡階段，試驗(yàn)2組ADG較對(duì)照組提高了0.72%；肉雞8～21日齡階段，試驗(yàn)2組肉雞ADG較對(duì)照組提高了2.82%，且其FCR最低，分別比對(duì)照組和試驗(yàn)1組低2.00%和1.34%；肉雞22～35 d日齡階段，試驗(yàn)2組ADG較對(duì)照組提高3.87%，F(xiàn)CR較對(duì)照組降低2.66%，且試驗(yàn)1組FCR最低，顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

表2 芽孢桿菌與抗生素對(duì)肉雞各階段生產(chǎn)性能的影響

從整個(gè)試驗(yàn)期數(shù)據(jù)來看，各組肉雞生產(chǎn)性能差異并不顯著。其中，試驗(yàn)2組ADG比對(duì)照組高3.24%，較試驗(yàn)1組提高了0.74%；FCR兩試驗(yàn)組均較對(duì)照組降低了2.4%。

2.2 芽孢桿菌與抗生素對(duì)36日齡肉雞免疫水平的影響 由圖1可知，三個(gè)處理組肉雞血液抗體水平差異均不顯著，但試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組肉雞血液抗體水平均高于對(duì)照組。對(duì)肉雞血液IgG含量的分析可以看出，試驗(yàn)2組肉雞血液IgG含量較對(duì)照組、試驗(yàn)1組均顯著提高（P＜0.05），其含量分別為對(duì)照組和試驗(yàn)1組的2.26倍和1.75倍。

圖1 芽孢桿菌與抗生素對(duì)36日齡肉雞新城疫抗體和IgG含量的影響

2.3 芽孢桿菌與抗生素對(duì)肉雞免疫器官指數(shù)的影響 由表3可以看出，各組肉雞免疫器官指數(shù)均無差異，但試驗(yàn)2組胸腺指數(shù)最高，分別較對(duì)照組和試驗(yàn)1組提高了12.18%和34.51%。

表3 芽孢桿菌與抗生素對(duì)36日齡肉雞免疫器官指數(shù)的影響g/kg

2.4 芽孢桿菌與抗生素對(duì)肉雞腸道發(fā)育的影響從表4結(jié)果可以看出，試驗(yàn)組各腸段絨毛長度與隱窩深度比值（V/C）均高于對(duì)照組；試驗(yàn)2組十二指腸的V/C值較對(duì)照組和試驗(yàn)1組分別提高80.53%和33.72%（P＜0.05）；其空腸和回腸V/C值分別較對(duì)照組提高 74.29%（P＜0.05）和177.60%（P ＜ 0.01）。

表4 芽孢桿菌與抗生素對(duì)36日齡肉雞小腸絨毛長度與隱窩深度比值的影響

3 討論

3.1 芽孢桿菌與抗生素對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響大量研究表明，日糧中添加芽孢桿菌能改善畜禽生產(chǎn)性能。閆鳳蘭等（1996）研究表明，添加枯草芽孢桿菌可使3周齡仔雞體重略高于對(duì)照組，并且顯著降低肉雞料肉比。劉磊和朱立賢（2011）在肉雞日糧中添加不同水平的芽孢桿菌，結(jié)果表明芽孢桿菌能夠降低料肉比和肉雞死淘率。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在日糧中添加芽孢桿菌有提高肉雞日增重、降低料肉比的趨勢(shì)，但差異均不顯著，與以上研究報(bào)道結(jié)論相同。另外本試驗(yàn)研究還發(fā)現(xiàn)，抗生素在肉雞生長前期和中期（0～7、8～21 d）的促生長作用并不明顯，有時(shí)甚至起到生長抑制作用，在21日齡以后肉雞呈現(xiàn)出生長促進(jìn)作用。其原因可能與肉雞早期添加抗生素會(huì)抑制腸道正常菌群的建立有關(guān)，從而影響消化器官的正常發(fā)育，導(dǎo)致雞群生產(chǎn)性能下降。而芽孢桿菌能產(chǎn)生多種酶類，如細(xì)胞裂解酶、透明質(zhì)酸酶、果酸果膠裂解酶、蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和半纖維素酶，這些酶能促進(jìn)腸道有機(jī)物的消化吸收，有利于提高飼料的利用率。因此，推測(cè)在肉雞生長前期添加芽孢桿菌效果更好。

3.2 芽孢桿菌與抗生素對(duì)肉雞免疫器官的影響

免疫器官的發(fā)育狀態(tài)及機(jī)能強(qiáng)弱直接決定著禽類的免疫水平。法氏囊是禽類特有的體液免疫器官，脾臟則是禽類最大的外周免疫器官，是體內(nèi)產(chǎn)生抗體的主要器官，參與全身的細(xì)胞免疫和體液免疫；胸腺為機(jī)體的重要淋巴器官，其功能與免疫緊密相關(guān)，是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場(chǎng)所（顧金等，2010）。本研究結(jié)果表明，芽孢桿菌HB1對(duì)肉雞胸腺的發(fā)育具有促進(jìn)作用，而抗生素對(duì)肉雞脾臟和胸腺發(fā)育起抑制作用，此結(jié)果與肖振鐸（2002）的研究一致。此外，本研究還表明，芽孢桿菌HB1添加組肉雞血液IgG含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。由于IgG含量的高低是衡量機(jī)體液免疫水平高低的一個(gè)重要指標(biāo)，因此可以推測(cè)芽孢桿菌可以提高肉雞機(jī)體體液免疫水平。

3.3 芽孢桿菌與抗生素對(duì)肉雞腸道發(fā)育的影響韓正康（1991）指出，腸絨毛的形態(tài)直接與機(jī)體的生長發(fā)育有關(guān)，V/C值可綜合反映小腸的功能狀況，比值增大表明消化吸收功能增強(qiáng)。郭元晟等（2011）發(fā)現(xiàn)乳桿菌可顯著提高腸道的絨毛長度和寬度，降低隱窩深度，提高絨毛長度與隱窩深度比值。本研究也發(fā)現(xiàn)，芽孢桿菌組的雞十二指腸、空腸和回腸的V/C均高于對(duì)照組。Caspary（1992）認(rèn)為，小腸絨毛長度的增加會(huì)增加小腸接觸營養(yǎng)物質(zhì)的面積，從而促進(jìn)小腸對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。芽孢桿菌是生物活性制劑，芽孢桿菌在代謝過程中產(chǎn)生一些多肽物質(zhì)，如伊短菌素、桿菌肽、多黏菌素等，這類生物活性物質(zhì)可刺激畜禽腸道發(fā)育。因此，推測(cè)芽孢桿菌可增強(qiáng)十二指腸、空腸和回腸的消化吸收功能，從而提高畜禽生產(chǎn)性能。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，飼糧中添加芽孢桿菌可以提高肉雞生產(chǎn)性能，有利于免疫器官的發(fā)育，增加血液IgG含量，促進(jìn)肉雞早期腸道發(fā)育，可以完全替代抗生素在肉雞飼料中的使用。

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