王 欣，梁 魯，姚碧輝

(1.中南大學湘雅醫(yī)院 普外科，湖南 長沙 410008；2.包頭市中心醫(yī)院 普外科，內(nèi)蒙古 包頭 014040)

論 著

急性胰腺炎患者血清IL-33及sST2水平變化及臨床意義

王 欣1，梁 魯2，姚碧輝2

(1.中南大學湘雅醫(yī)院 普外科，湖南 長沙 410008；2.包頭市中心醫(yī)院 普外科，內(nèi)蒙古 包頭 014040)

目的 探討IL-33與其分泌性受體sST2在重型和輕型急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)患者血清中的水平變化及臨床意義。方法 選取AP患者36例(AP組)，其中輕型(mild acute pancreatitis, MAP)16例，重型(severe acute pancreatitis, SAP)20例。分別于入院后第1、3、7和14天抽取空腹外周靜脈血，正常對照組18例于清晨一次性抽取，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA法)測定血清IL-33和sST2的濃度，并分析IL-33/sST2水平與輕重胰腺炎及與Ranson′s評分的相關性。結果 (1)入院后第1天血清IL-33水平SAP組與正常對照組比較，明顯升高(P<0.05)；而血清sST2水平SAP組和MAP組與正常對照組比較，均顯著降低(P<0.01)。(2)SAP患者第1、3、7、14天血清IL-33顯著高于MAP組(P<0.01)。(3)AP組血清IL-33和sST2水平在入院第3天呈正相關(r=0.337,P<0.05)。其中SAP組血清IL-33和sST2水平在第1、3天呈正相關(r=0.490,P<0.05和r=0.574,P<0.01)。(4)AP患者入院后第1天的血清IL-33水平與Ranson′s評分呈正相關(r=0.436，P<0.01)。結論 IL-33可能在SAP早期參與促炎作用，并反映SAP的嚴重程度及轉(zhuǎn)歸。sST2是AP早期反應和急性炎癥的參與者，在AP過程中起到一種保護作用。它們在AP中存在一定的相互制約。

白細胞介素-33；sST2；急性胰腺炎

IL-33是一種具有多向性效應的促炎癥細胞因子,其受體為1989發(fā)現(xiàn)的homolog of sulfotransferase(ST2)，它們結合后能誘導多種細胞因子,激活炎癥瀑布效應[1]。可溶性受體形式sST2(soluble ST2)，能夠吸收并中和IL-33,抑制IL-33/ST2信號傳導通路,作為IL-33的偽受體對IL-33 的生物活性起負性調(diào)節(jié)作用[2]。人類ST2基因在胰腺中表達，胰腺的肌纖維母細胞、胰腺腺泡和導管上皮細胞中也存在IL-33的表達。本研究旨在探討IL-33與其分泌性受體sST2在重型和輕型急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)患者血清中的水平變化及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 病例資料

選取2013年2月至2013年10月包頭市中心醫(yī)院住院的36例AP患者。所有AP 患者均選自起病后24h 內(nèi)，符合2004年《中國急性胰腺炎診治指南》的診斷標準，排除其他急腹癥，以及嚴重的免疫系統(tǒng)疾病、肝腎功能不全、惡性腫瘤等。所有AP 患者入院后予以禁食水和靜脈輸液治療，并完善必要的生化檢查，根據(jù)Ranson′s評分指標、APACHEⅡ評分、Balthazar CT分級進行輕重分型，其中輕型(mild acute pancreatitis, MAP)16例，重型(severe acute pancreatitis, SAP)20例。以沒有胰腺疾病歷史的正常健康體檢人員18例為正常對照組。AP組和正常對照組在性別、年齡方面差異無顯著性意義(P>0.05)。各組相關資料見表1。

表1 各組相關資料

1.2 方 法

所有入選AP患者分別于入院后第1、3、7 和14天清晨抽取空腹外周靜脈血2 mL，對照組于入院當天清晨一次性抽取空腹外周靜脈血2 mL，注入不含有抗凝劑的玻璃試管中混勻, 室溫血液自然凝固10～20 min，離心15min左右(4000 r/min)。仔細收集上清，保存在-20 ℃冰箱中，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA法),試劑盒由德國IBL國際有限公司提供，Thermo酶標儀 Multiskom MK3由美國賽默飛世爾公司提供。分別測定16例MAP和20例SAP患者血清IL-33和sST2的濃度，并與正常對照組比較，同時分析IL-33及其分泌性受體sST2水平與輕重急性胰腺炎及Ranson′s評分的相關性。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結 果

2.1 各組血清IL-33與sST2水平比較

血清IL-33水平：入院后第1天，SAP組與正常對照組比較明顯升高，差異有顯著性意義(P<0.05)；第1、3、7、14天，SAP組顯著高于MAP組(P<0.01)。見表2。

血清sST2水平：入院后第1天，SAP組和MAP組均顯著低于正常對照組(P<0.01)；第1、3、7、14天，SAP組與MAP組間差異均無顯著性意義(P>0.05)。見表3。

SAP患者血清sST2水平第1天明顯降低，之后無明顯變化(表3)；第1、3、7、14天患者血清IL-33水平變化無明顯差別(P>0.05)(表2)。

2.2 相關性分析結果

AP組血清IL-33和sST2水平在入院第3天呈正相關(r=0.337,P<0.05)。其中SAP組血清IL-33和sST2水平在第1、3天呈正相關(r=0.490,P<0.05與r=0.574,P<0.01)。其余天數(shù)無顯著相關性(P>0.05)。正常對照組血清IL-33和sST2表達水平呈正相關(r=0.530,P<0.05)。

所有AP患者入院后第1天的血清IL-33水平與Ranson′s評分呈正相關(r=0.436，P<0.01)；所有AP患者入院后第1天的血清sST2水平與Ranson′s評分無相關性(P>0.05)。

表2 入院第1、3、7、14天各組血清IL-33的水平

表3 入院第1、3、7、14天各組血清sST2的水平

3 討 論

3.1 IL-33在急性胰腺炎中的作用和意義

IL-33是比較強的Th2細胞誘導劑，促成了Th0細胞向Th2方向極化,伴隨著免疫耐受,促成了胰腺出血壞死加重和并發(fā)SIRS(systemic inflammatory response syndrome)及MODS(multiple organ dysfunction syndrome)等全身反應。對IL-33mRNA表達抑制的IL-12可促進Th0細胞分化為Th1并降低SAP小鼠的死亡率,表明了糾正Th1/Th2過度極化在SAP治療上的有效性。

Enoksson等[3]最近證實肥大細胞促炎激活時IL-33發(fā)揮核心作用。在AP早期應激的階段，腺泡細胞產(chǎn)生的IL-33以及其他細胞因子(如TNF-α,IL-1β)可以反過來再刺激腺泡細胞釋放更多IL-33。IL-33激活的肥大細胞也同樣可以衍生出IL-33[4]。但IL-33在增強肥大細胞功能的同時，并不誘導和增強這些肥大細胞脫顆粒，當用外源性重組IL-33注射小鼠(無導管結扎)誘導胰腺炎時，2天之內(nèi)沒有觀察到肥大細胞的脫顆?，F(xiàn)象[5]。這說明在急性胰腺炎發(fā)展的早期階段主要是IL-33和腺泡細胞之間的相互作用，而肥大細胞脫顆粒在發(fā)炎的胰腺中的作用是獨立的。是由于腺泡細胞產(chǎn)生的其他細胞因子，不僅可以激活肥大細胞，還可促進肥大細胞脫顆粒[5]。本研究SAP患者第1、3、7、14天血清IL-33水平顯著高于MAP患者，并與Ranson′s評分呈正相關，說明IL-33參與了升級胰腺炎癥的過程。2010年同濟大學張恒超等[6]研究顯示了類似的結果,提示IL-33在小鼠和人類急性胰腺炎早期即被激活。或許可以作為內(nèi)源性危險信號并警示需及時采取行動與AP病情嚴重性評判的臨床實驗室指標。

3.2 sST2在急性胰腺炎中的作用和意義

Ouziel等[7]證實了ST2缺陷小鼠表現(xiàn)出比野生型更嚴重的病理過程。在AP過程中表達ST2是一種保護反應，而正是這種保護作用促進了胰腺組織纖維化，可能為疾病發(fā)展成慢性的原因[8]。

可溶性IL-33受體形式sST2，能吸收中和IL-33,可抑制Toll-樣受體(如TLR4)的表達，而IL-1和IL-18受體的信號與TLR4信號通路的下游部分共用，也會因為sST抑制TLR4而被間接抑制，這樣就減輕了炎癥反應[9]。

根據(jù)本研究的結果，筆者認為是IL-33中和了sST2，在AP的IL-33/ST2信號通路中，IL-33可能占主要的支配地位，導致了sST2這種保護因素被抵消而下降，與機體誘導產(chǎn)生sST2至一個相對平穩(wěn)的低水平后達到平衡，而與sST2抵消后所剩余的IL-33濃度越高，胰腺炎癥越重。而在小兒登革熱[10]、皮肌炎和多肌炎[11]、全身型幼年特發(fā)性關節(jié)炎[12]等疾病中，恰恰是sST2占支配地位，水平越高疾病越重，而IL-33被中和而相對顯示出沒有差異。

在急性胰腺炎剛發(fā)生時，主要是IL-33和腺泡細胞之間的相互作用，本研究中實驗組血清IL-33和sST2表達水平雖然發(fā)生了變化，但依舊能夠相互制約，所以兩種因子相關性依舊存在，2～3 d后，肥大細胞脫顆粒作用參與到在發(fā)炎的胰腺中來，兩種因子間的平衡被打破，顯示出無相關性，眾多細胞因子互相作用，若保護性因素占據(jù)優(yōu)勢，疾病朝著痊愈的方向發(fā)展，或是發(fā)展成慢性胰腺炎，若促炎性因素占優(yōu)勢，則疾病進一步惡化，導致預后不良。目前還不能排除某些醫(yī)療行為的干預也會影響IL-33和sST2的表達。

IL-33及其相關細胞因子對AP及其他疾病的潛在作用會隨著對發(fā)病機制地不斷認識而逐漸被人們所重視。根據(jù)疾病發(fā)展的不同時期采取不同的干預方法，及時逆轉(zhuǎn)炎癥瀑布效應，如使用sST2,可成為重要的治療手段[13]。

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Variations of serum IL-33 and sST2 levels in patients with acute pancreatitis and its clinical significance

WANG Xin1，LIANG Lu2，YAO Bi-hui2

(1.DepartmentofGeneralSurgery，XiangYaHospitalofCentralSouthUniversity，Changsha410008，China； 2.DepartmentofGeneralSurgery，theCentralHospitalofBaotou，Baotou014040，China)

Objective To study changes and clinical significance of serum interleukin-33 (IL-33) and its soluble receptor sST2 levels in patients with mild or severe acute pancreatitis(AP). Methods Totally, 36 AP patients were selected and divided into mild acute pancreatitis group(MAP, n=16)and severe acute pancreatitis group(SAP, n=20). Fasting venous blood samples were drawn on the day of admission and were repeated at 3，7 and 14days later. Venous blood samples from 18 healthy volunteers were drawn one time as controls. Serum IL-33 and sST2 levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assays and were correlated with the severity of acute pancreatitis. Results (1) Serum IL-33 level in the SAP group was significantly higher than that in the control group on the 1st day(P<0.05). Serum sST2 levels in the MAP and SAP groups were both significantly lower than that of the control group on the 1st day(P<0.01). (2) Compared to those in the MAP group, serum IL-33 levels in the SAP group were significantly increased on the 1st, 3rd, 7th and 14th day after admission(P<0.01). (3) Serum IL-33 level in the AP patients showed a positive correlation with Serum sST2 level on the 3rd day(r=0.337,P<0.05)and on the 1st and the 3rd day in the SAP group(SAP 1d：r=0.490,P<0.05；SAP 3d：r=0.574,P<0.01). (4) Serum IL-33 level in the AP patients showed a good positive correlation with Ranson′s 11 criteria on the 1st day(r=0.436，P<0.01). Conclusion IL-33 may have proinflammatory effects in the early phase of SAP and its serum level reflects the severity and prognosis of SAP. sST2 is a participant of early-phase reaction and in AP and plays a protection role. These two cytokines interact and regulate each other during AP.

interleukin-33; soluble ST2; acute pancreatitis

10.11724/jdmu.2015.06.05

包頭市科技計劃項目(2013S2006-04-08)

王 欣(1988-)，男，遼寧大連人，博士研究生。E-mail：winsun2011@163.com

梁 魯，主任醫(yī)師。E-mail：1291201364@qq.com

R657.5+1

A

1671-7295(2015)06-0537-04

王欣，梁魯，姚碧輝. 急性胰腺炎患者血清IL-33及sST2水平變化及臨床意義[J].大連醫(yī)科大學學報，2015,37(6)：537-540.

2014-11-28；

2015-10-31)