楊蓓，劉功成，楊慧敏，劉絨歡，王菲，李江濤，屈勇剛?，張新銀，成池杰，王闖

(1.石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子832003；2.新疆石河子畜牧獸醫(yī)站，新疆石河子832000；3.新疆泰昆集團(tuán)，新疆昌吉831100)

新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場(chǎng)豬常見(jiàn)傳染病抗體檢測(cè)及分析

楊蓓1，劉功成1，楊慧敏1，劉絨歡1，王菲1，李江濤1，屈勇剛1?，張新銀2，成池杰3，王闖3

(1.石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子832003；2.新疆石河子畜牧獸醫(yī)站，新疆石河子832000；3.新疆泰昆集團(tuán)，新疆昌吉831100)

為了解新疆石河子地區(qū)某豬規(guī)模化豬場(chǎng)O型口蹄疫病毒（FMDV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）的抗體水平以及豬偽狂犬野毒（PRV）感染情況，本研究應(yīng)用ELISA檢測(cè)技術(shù)對(duì)該場(chǎng)84份血清進(jìn)行了FMDV、CSFV、PRRSV、PCV-2、PRV gE蛋白抗體檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)MDV抗體陽(yáng)性率為70.24%；CSFV抗體陽(yáng)性率為82.14%；PRRSV抗體陽(yáng)性率為97.62%；PCV-2抗體陽(yáng)性率為54.76%；PRV gE蛋白抗體陽(yáng)性率為75.00%。該結(jié)果為了解該豬場(chǎng)5種常見(jiàn)傳染病的整體免疫水平，進(jìn)一步制定合理的免疫程序和防制措施提供參考。

豬O型口蹄疫；豬瘟；豬繁殖與呼吸綜合征；豬圓環(huán)病毒2型；豬偽狂犬病

隨著畜牧養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，新疆養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)模在逐年擴(kuò)大，生豬養(yǎng)殖數(shù)量不斷增多。與此同時(shí)，豬只流動(dòng)頻繁，養(yǎng)殖場(chǎng)自身不能及時(shí)做好有效檢疫，不少養(yǎng)殖戶(hù)還沒(méi)有意識(shí)到免疫監(jiān)測(cè)對(duì)全場(chǎng)豬群的免疫防控的重要作用，為傳染病的流行提供了便利條件，疫病的發(fā)生也變得更加復(fù)雜，給生豬養(yǎng)殖場(chǎng)帶來(lái)了不小的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重影響了養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。為掌握新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場(chǎng)豬常見(jiàn)傳染病的免疫水平，本研究對(duì)全場(chǎng)2000頭豬中采集到的84份樣品血清進(jìn)行了FMDV、CSFV、PRRSV、PCV-2和PR-gE蛋白抗體的檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 血清樣品檢測(cè)FMDV、CSFV、PRRSV和PCV-2是為了評(píng)估該豬場(chǎng)的免疫是否達(dá)標(biāo)，檢測(cè)PRV-gE是為了判斷野毒感染情況。所采血清均為臨床表現(xiàn)健康的豬只，由新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i養(yǎng)殖場(chǎng)提供，共84份，采血后自然凝固，分離血清，置4℃冰箱保存。

1.2 診斷試劑盒本試驗(yàn)診斷試劑盒分別為豬O型口蹄疫病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：141213）、豬瘟病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：150101）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：141010）、豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：150101）、豬偽狂犬病毒gE蛋白阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：140605），均購(gòu)自武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司。

1.3 檢測(cè)方法與結(jié)果判定

1.3.1 檢測(cè)方法按照上述ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行FMDV、CSFV、PRRSV、PCV-2抗體和PRV-gE抗體水平的檢測(cè)。

1.3.2 結(jié)果判定

1.3.2.1 抗體陽(yáng)性率測(cè)定對(duì)于FMDV，樣品OD630nm值≥0.4時(shí)判為陽(yáng)性，樣品OD630nm值＜0.4時(shí)判為陰性；對(duì)于CSFV，樣品OD630nm值＞0.35，判為陽(yáng)性；樣品OD630nm值＜0.35，判為陰性；對(duì)于PRRSV，計(jì)算KQ值，KQ=樣品OD630nm值÷陽(yáng)性對(duì)照OD630nm平均值× 100，KQ≥20判為陽(yáng)性；KQ＜20判為陰性；對(duì)于PCV-2，樣品OD630nm值＞0.42，判為陽(yáng)性；樣品OD630nm值介于0.38到0.42之間，判為可疑；樣品OD630nm值＜0.38，判為陰性。對(duì)上述四項(xiàng)抗體檢測(cè)結(jié)果判定為陽(yáng)性的樣品，顯示動(dòng)物機(jī)體對(duì)所檢測(cè)項(xiàng)目產(chǎn)生了免疫應(yīng)答，免疫合格；反之，結(jié)果判定為陰性的樣品顯示該機(jī)體產(chǎn)生的免疫應(yīng)答效果不達(dá)標(biāo)，或者沒(méi)有產(chǎn)生免疫應(yīng)答，即免疫不合格。對(duì)于PRV-gE，計(jì)算S/N比值，S＝樣品孔OD630nm值，N＝陰性對(duì)照孔平均OD630nm值，若S/N比值≤0.35，樣品判為陽(yáng)性；S/N比值＞0.4，判為陰性；S/N介于0.35和0.4之間，判為可疑；在該檢測(cè)項(xiàng)目中判為陰性的樣品提示可能存在PRV野毒感染。

1.3.2.2 變異系數(shù)計(jì)算

2 結(jié)果與分析

2.1 豬O型口蹄疫病毒抗體檢測(cè)結(jié)果84份血清樣品中豬O型口蹄疫病毒抗體陽(yáng)性率為70.24%（59/ 84），陰性率為29.76%（25/84），其OD630nm平均值為0.60，變異系數(shù)為0.61，結(jié)果見(jiàn)表1。豬O型口蹄疫病毒抗體水平曲線圖見(jiàn)圖1。

2.2 豬瘟病毒抗體檢測(cè)結(jié)果84份血清樣品中豬瘟病毒抗體陽(yáng)性率為82.14%（69/84），陰性率為17.86%（15/84），OD630nm平均值為0.76，變異系數(shù)為0.49，結(jié)果見(jiàn)表1。豬瘟病毒抗體水平曲線圖見(jiàn)圖2。

2.3 豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測(cè)結(jié)果84份血清樣品中豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體陽(yáng)性率為97.62%（82/84），陰性率為2.38%（2/84），KQ平均值為123.36，變異系數(shù)為0.93，結(jié)果見(jiàn)表1。豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體水平曲線圖見(jiàn)圖3。

2.4 豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測(cè)結(jié)果84份血清樣品中豬圓環(huán)病毒2型抗體陽(yáng)性率為54.76%（46/84），陰性率為35.71%（30/84），可疑率為9.52%（8/84），測(cè)得OD630nm值平均數(shù)為0.53，變異系數(shù)為0.58，結(jié)果見(jiàn)表1。豬圓環(huán)病毒2型抗體水平曲線圖見(jiàn)圖4。

2.5 豬偽狂犬病毒g E蛋白抗體檢測(cè)結(jié)果84份血清中豬偽狂犬病毒gE蛋白抗體陽(yáng)性率為75.00%（63/ 84），陰性率為14.29%（12/84），可疑率為10.71%（9/84），檢測(cè)平均S/N值為0.25，變異系數(shù)為0.25，結(jié)果見(jiàn)表1。豬偽狂犬病毒g E蛋白抗體水平曲線圖見(jiàn)圖5。

表1 新疆石河子地區(qū)某規(guī)模化豬場(chǎng)豬常見(jiàn)傳染病抗體檢測(cè)結(jié)果Tab le1 The detection results o f antibodies to common in fectious diseases

圖1 新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場(chǎng)豬O型口蹄疫病毒抗體水平Fig.1 The detection result of FMDV antibody level

圖2 新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場(chǎng)豬瘟病毒抗體水平Fig.2 The detection resu lt o f CSFV antibody level

圖3 新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場(chǎng)豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體水平Fig.3 The detection result of PRRSV antibody leve l

圖4 新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場(chǎng)豬圓環(huán)病毒2型抗體水平Fig.4 The detection result o f PCV-2 antibody leve l

3 討論

當(dāng)前我國(guó)針對(duì)FMDV、CSFV和PRRV采取疫苗免疫為主的綜合防控措施，疫苗的免疫效果成為有效預(yù)防疫病的技術(shù)關(guān)鍵，國(guó)家規(guī)定其保護(hù)率不應(yīng)低于70%。此次檢測(cè)結(jié)果顯示FMDV抗體陽(yáng)性率為70.24%，勉強(qiáng)達(dá)標(biāo)。根據(jù)眾多從業(yè)者所提供的FMDV跟蹤及抗體檢測(cè)試驗(yàn)[1-3]，建議該豬場(chǎng)對(duì)口蹄疫補(bǔ)免一次。CSFV檢測(cè)抗體陽(yáng)性率為82.14%，免疫水平達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，但根據(jù)周珍輝等[4]對(duì)抗體監(jiān)測(cè)程序防治的建議、修金生等[5]對(duì)CSFV抗體不合格豬只的建議，認(rèn)為該豬場(chǎng)需要對(duì)CSFV抗體檢測(cè)不合格的母豬進(jìn)行豬瘟免疫，再次采血檢測(cè)抗體，如仍為陰性進(jìn)行淘汰，對(duì)仔豬進(jìn)行補(bǔ)免。PRRSV在生豬養(yǎng)殖中常常是制約其規(guī)模大小的主要因素之一，為降低該病毒對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的危害和損失，該場(chǎng)選擇疫苗免疫健康豬進(jìn)行防控。本次檢測(cè)中PRRSV疫苗抗體陽(yáng)性率為97.62%，認(rèn)為該場(chǎng)PRRSV免疫防控效果較好。PCV-2是近年發(fā)現(xiàn)可導(dǎo)致豬免疫抑制的病毒，是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征的主要病原。世界各地獸醫(yī)及從業(yè)者認(rèn)為使用疫苗是抑制該病的最理想辦法。在本次檢測(cè)中，PCV-2陽(yáng)性率較低，為54.76%，造成此種后果的原因可能是多樣的[6]，具體原因有待進(jìn)一步深入調(diào)查。豬感染偽狂犬病毒后會(huì)引起發(fā)熱、母豬流產(chǎn)、仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀、高死亡率等臨床表現(xiàn)[7]。近年來(lái)周緒斌等[8]、解偉濤等[9]報(bào)道PRV呈爆發(fā)式流行，本次檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率高達(dá)75.00%，證明了PRV感染在該場(chǎng)處于一個(gè)較高的水平。針對(duì)這一現(xiàn)狀，筆者提議該豬場(chǎng)需要通過(guò)凈化淘汰感染豬只，以避免該病更大程度流行及經(jīng)濟(jì)損失。

圖5 新疆石河子地區(qū)某規(guī)模化豬場(chǎng)豬偽狂犬病毒gE蛋白抗體水平Fig.5 The detection resu lt o f PRV-gE antibody level

[1]朱安民，王國(guó)防，姚戰(zhàn)生，等.豬口蹄疫疫苗免疫后跟蹤抗體檢測(cè)試驗(yàn)及建議[J].畜禽業(yè)，2014（11）：5-7.

[2]王劍鋒，楊宗照.豬口蹄疫免疫程序研究[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2010（01）：7-8.

[3]金大春，王躍川.豬口蹄疫免疫程序和抗體水平研究[J].畜禽業(yè)，2003（08）：30-31.

[4]周珍輝，向雙云，楊久仙，等.規(guī)模豬場(chǎng)豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒病的抗體檢測(cè)和防治[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2013（10）：92-93.

[5]修金生，吳順意，周倫江，等.淘汰豬瘟抗體不合格種豬對(duì)母豬繁殖性能和仔豬生長(zhǎng)性能的影響研究[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2010（20）：1-6.

[6]孟紀(jì)萍，王建梅，武曉虎，等.豬圓環(huán)病毒2型和豬瘟病毒抗體檢測(cè)與分析[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2012（12）：39-40.

[7]殷震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].2版.北京：科學(xué)技術(shù)出版社，1997：998-1000.

[8]周緒斌，秦云，丹尼，等.2007年規(guī)?；i場(chǎng)偽狂犬病野毒血清流行病學(xué)系統(tǒng)監(jiān)測(cè)與分析[J].豬業(yè)科學(xué)，2008（10）：84-90.

[9]解偉濤，喬松林，王寅彪，等.2013年河南省豬偽狂犬野毒感染血清學(xué)調(diào)查[J].中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)，2014（06）：66-70.

Antibody Detection and Analysis of Common Infectious Diseases in a Sw ine Farm from Shihezi District,Xinjiang Province

Yang Bei1,Liu Gongcheng1,Yang Huimin1,Liu Ronghuan1,Wang Fei1,Li Jiangtao1, Qu Yonggang1*,Zhang Xinyin2,Cheng Chi j ie3,Wang Chuang3

(1.Col lege of Animal Science&Technology,Shihezi University,Xinj iang Shihezi 832003；2.Animal Husbandry and Veterinary Station of Shihezi,Xinj iang Shihezi 832003；3.Taikun Group of Xinjiang,Xinj iang Changj i 831100)

To investigate levels of antibodies to several common infectious diseases in a swine farm f rom Shihezi Dist rict,Xinjiang Province，the levels of antibodies to several swine diseases,including Foot and Mouth Disease（FMD）,Classic Swine Fever（CSF）,Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome（PRRS）,Porcine Circovirus Type 2（PCV-2）and Porcine Pseudorabies Virus gE（PRV-gE）,were detected in 84 serum samples f rom the swine farm via ELISA method.The resul ts revealed that positive ratio of antibodies to FMDV、CSFV、PRRSV、PCV-2 and PRV-gE was 70.24%、82.14%、97.62%、54.76%and 75.00%,respectively,providing reference for understanding the general immunity level of these f ive common diseases and fur ther establishment of proper immunity procedures.

Foot and mouth disease;Classic swine fever;Porcine reproductive and respiratory syndrome;Porcine circovirus type 2;Porcine pseudorabies

新疆石河子市農(nóng)業(yè)科技攻關(guān)項(xiàng)目（2013NY04）

S851.3

B

1672-9692(2015)04-0041-05

2015-01-09

楊蓓（1990-），女，在讀碩士研究生，主要從事動(dòng)物傳染病診斷與防治研究。

屈勇剛（1971-），男，副教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事動(dòng)物傳染病快速診斷及防治技術(shù)研究。