牛超，張會(huì)敏

(1.濟(jì)南市第八人民醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250014；2.山東省中醫(yī)藥研究院，山東 濟(jì)南 250014)

·中藥工業(yè)·

乳香醋制工藝的正交優(yōu)化及驗(yàn)證試驗(yàn)研究△

牛超1，張會(huì)敏2*

(1.濟(jì)南市第八人民醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250014；2.山東省中醫(yī)藥研究院，山東 濟(jì)南 250014)

目的：優(yōu)選乳香最佳醋制工藝，制定乳香醋制規(guī)范。方法：以內(nèi)在質(zhì)量和傳統(tǒng)外觀質(zhì)量為指標(biāo)，采用L9(34)正交試驗(yàn)，對炒制時(shí)間、炒制溫度、投料量、用醋量4個(gè)因素進(jìn)行考察。結(jié)果：醋制乳香最佳工藝為取乳香300 g，于140 ℃不停翻炒9 min，至表面微熔時(shí)，噴淋5%米醋15 mL，再翻炒1 min，至醋液被吸盡，呈油亮光澤時(shí)，迅速出鍋，放涼。結(jié)論：優(yōu)選得到的乳香醋制工藝合理可行，可用于制定乳香醋制工藝規(guī)范，指導(dǎo)醋乳香的規(guī)范化生產(chǎn)。

乳香；醋制工藝；正交試驗(yàn)；乙酸辛酯

乳香為常用樹脂類中藥，具有活血化瘀、消腫止痛、祛腐生肌的功能[1]，臨床用藥多為醋炙品。研究表明乳香中的主要有效成分為揮發(fā)油類，乙酸辛酯占乳香揮發(fā)油的主要成分[2-4]。目前，雖然對乳香炮制工藝研究的報(bào)道較多，但多數(shù)文獻(xiàn)單獨(dú)以揮發(fā)油、樹脂、樹膠的變化或鎮(zhèn)痛試驗(yàn)等作為優(yōu)選指標(biāo)，存在很多缺陷?！吨腥A人民共和國藥典》2010版[1]、《全國中藥炮制規(guī)范》及全國大多數(shù)地方規(guī)范中都將醋制法作為乳香炮制方法之一，但各地對醋制乳香質(zhì)量要求不一，炒制程度各異，沒有全國統(tǒng)一使用的詳細(xì)工藝參數(shù)。醋制乳香的質(zhì)量主要受投料量、炒制溫度、炒制時(shí)間、用醋量等因素的影響。本研究以傳統(tǒng)外觀質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量為指標(biāo)，用正交設(shè)計(jì)法考察以上諸因素對醋制乳香質(zhì)量的影響，確定醋制乳香的最佳工藝參數(shù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

HP-6890氣相色譜儀(美國安捷倫科技有限公司)；FID檢測器；毛細(xì)管色譜柱H PINNOWAX(30 m×0.53 mm，1.0 μm)；AG245電子天平(METTLER TOLEDO)；CYY-600自控溫燃油炒藥機(jī)(臺州市春江制藥有限公司)；中藥炮制控溫爐(哈爾濱市測電器廠)；紅外溫度儀ST80(美國雷泰)。

1.2 試藥

乙酸辛酯、茴香醛(中國食品藥品檢定研究院，批號分別為111671-200401，110838-200504)；無水乙醇(色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號：20070103)；米醋(北京龍門和田寬食品有限公司，其總酸量不低于39.5 g·L-1)；乳香(埃塞俄比亞)。

2 方法與結(jié)果

2.1 乳香醋制工藝正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

用炮制控溫爐反復(fù)多次預(yù)試，同時(shí)測試、記錄炒制時(shí)間、炒制溫度、投料量、加醋量等參數(shù)水平。在此基礎(chǔ)上，選擇了影響乳香醋制工藝和質(zhì)量的4個(gè)考察因素，以傳統(tǒng)外觀質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及揮發(fā)油含量、乙酸辛酯含量作為評價(jià)指標(biāo)，以綜合評分的方法，進(jìn)行4因素、3水平的L9(34)正交試驗(yàn)，對結(jié)果進(jìn)行方差分析，優(yōu)選出科學(xué)、合理的乳香醋制工藝，見表1。

表1 乳香醋制工藝因素水平表

2.2 醋制乳香質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)評定

為全面客觀反映乳香醋制工藝中各個(gè)因素對醋乳香質(zhì)量的影響，本試驗(yàn)以傳統(tǒng)外觀質(zhì)量和乳香的主要有效部位及指標(biāo)性成分(揮發(fā)油、乙酸辛酯)的含量作為評價(jià)指標(biāo)，采用綜合質(zhì)量評分法對各樣品進(jìn)行評價(jià)。

外觀質(zhì)量評定依據(jù)：主要憑借評審專家或同行的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，根據(jù)醋炒樣品的外觀顏色、氣味、質(zhì)地、炮制過程中煙霧對人的刺激性等指標(biāo)進(jìn)行評分，以百分計(jì)。

內(nèi)在質(zhì)量評定依據(jù)：醋制乳香一是為了去油，二是為了減毒增效。乳香揮發(fā)油是乳香的主要成分之一，具有較好的鎮(zhèn)痛作用，但毒性比較大[6]，醋制不僅能減少和掩蓋揮發(fā)油的刺激性和不良?xì)馕叮龑ξ改c道的惡心嘔吐等副作用，還能引藥入肝經(jīng)。乙酸辛酯是乳香揮發(fā)油的主要成分，占乳香揮發(fā)油40%左右。故本文選用揮發(fā)油、乙酸辛酯作為內(nèi)在質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)。

內(nèi)在質(zhì)量評分：本試驗(yàn)平行進(jìn)行3次，每次得到1組數(shù)據(jù)，每組中最低者定為20分，最高者定為100分。其他以下式計(jì)分：得分=20+80×(含量-最低含量)/(最高含量-最低含量)。以相同方法計(jì)算揮發(fā)油、乙酸辛酯含量得分。

綜合質(zhì)量評分：傳統(tǒng)外觀質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量評價(jià)對醋乳香有同等重要的意義，因此傳統(tǒng)外觀評分的加權(quán)系數(shù)為0.5，揮發(fā)油含量及乙酸辛酯含量的加權(quán)系數(shù)均為0.25。綜合評分以下式計(jì)算：綜合質(zhì)量評分=傳統(tǒng)外觀評分×0.5+揮發(fā)油×0.25+乙酸辛酯×0.25。

2.3 揮發(fā)油含量測定

取樣品20 g，精密稱定，照《中華人民共和國藥典》2010版一部(附錄ⅩD甲法)中乳香“含量測定”項(xiàng)下方法對醋乳香樣品進(jìn)行測定。

2.4 乙酸辛酯含量測定

具體方法參照文獻(xiàn)[5]。

2.5 乳香醋制工藝優(yōu)選的正交試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)正交設(shè)計(jì)法要求，按照因素水平表的設(shè)計(jì)制備了9種醋制乳香樣品。本試驗(yàn)平行進(jìn)行3次。嚴(yán)格按照此標(biāo)準(zhǔn)對正交試驗(yàn)得到的炮制品進(jìn)行評分，見表2～3。

表2 各醋制樣品外觀質(zhì)量得分及揮發(fā)油、乙酸辛酯含量測定結(jié)果(n=3)

表3 乳香醋制工藝方差分析表

注：r=0.959(校正r=0.941)

正交試驗(yàn)結(jié)果表明，在本試驗(yàn)條件下，4個(gè)因素都有顯著的影響，再將4個(gè)具有顯著影響的因素進(jìn)行兩兩比較檢驗(yàn)，選擇Duncan法計(jì)算，得到醋制乳香的最佳工藝參數(shù)組合為A2B2C3D2，即300 g乳香，于140 ℃時(shí)不停翻炒9 min，至表面微熔時(shí)，噴淋5%米醋15 mL，再翻炒1 min，至醋液被吸盡，呈油亮光澤時(shí)，迅速出鍋，放涼即得。在上述因素中，炒制時(shí)間和炒制溫度對醋炒乳香的影響最大，其次是加醋量與投料量。

3 驗(yàn)證試驗(yàn)

對正交試驗(yàn)優(yōu)選出的最佳工藝參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果見表4。

表4 乳香醋制驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

4 討論

4.1 指標(biāo)的選擇

因乳香中的主要成分揮發(fā)油、樹脂、樹膠均有較好的活血化瘀、鎮(zhèn)痛作用，故對乳香的炮制貴在適中，盡量減少破壞與損失，單獨(dú)以揮發(fā)油、樹脂、樹膠的變化或鎮(zhèn)痛試驗(yàn)作為優(yōu)選指標(biāo)不妥，筆者根據(jù)傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)及《中華人民共和國藥典》2010版一部乳香項(xiàng)下規(guī)定，采用乳香炮制品外觀質(zhì)量與內(nèi)在質(zhì)量相結(jié)合的“綜合質(zhì)量評分”為指標(biāo)，對諸因素水平下加工的醋炒乳香進(jìn)行打分，測定其揮發(fā)油及乙酸辛酯的含量，并對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，確定出醋制乳香的最佳工藝參數(shù)。3批驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明，確定的工藝條件操作簡便，合理可行，能制備出質(zhì)量可控的醋制乳香，可用于指導(dǎo)醋制乳香的規(guī)范化生產(chǎn)。

4.2傳統(tǒng)外觀質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)是長期實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，是目前單一化學(xué)成分和化學(xué)部位不能替代和闡釋的評價(jià)指標(biāo)，傳統(tǒng)外觀質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量具有同等重要意義，故綜合質(zhì)量評分將傳統(tǒng)外觀質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量評價(jià)賦以相同加權(quán)系數(shù)。此外，現(xiàn)代藥理研究顯示，不同化學(xué)成分的藥理作用不同，側(cè)重點(diǎn)不同，難分輕重，故賦以相同加權(quán)系數(shù)。本研究根據(jù)全國中藥炮制規(guī)范、各地炮制規(guī)范等相關(guān)評定標(biāo)準(zhǔn)以及老藥工炮制經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行現(xiàn)場評分，然后進(jìn)行化學(xué)成分的測定。將外觀得分及化學(xué)成分含量測定結(jié)果按照“綜合質(zhì)量評分”公式計(jì)算，再進(jìn)行方差分析，優(yōu)選的結(jié)果與外觀質(zhì)量評分最高者一致，說明本文中“綜合質(zhì)量評分”方法具有一定的科學(xué)性、合理性。

4.3設(shè)備與工藝參數(shù)的關(guān)系問題

目前全國使用的炒藥設(shè)備種類較多，有沿用傳統(tǒng)型的，有改進(jìn)傳統(tǒng)型的，也有現(xiàn)代新研制的。各種設(shè)備大小不同，加熱用熱源也不同，因而各種設(shè)備的炒制時(shí)間、投料量均有較大差別。另外，研究發(fā)現(xiàn)在炒制溫度恒定時(shí)，投料量與炒制時(shí)間應(yīng)呈正相關(guān)關(guān)系，即外觀質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)相同時(shí)，投料越多，炒制時(shí)間應(yīng)越長。本研究優(yōu)選出的工藝參數(shù)可為其他設(shè)備參數(shù)設(shè)置提供參考。

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：207.

[2] 劉青，于宗淵.氣相色譜法測定乳香揮發(fā)油中乙酸辛酯的含量[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2007，18(6)：1416.

[3] 盧兗偉，王琦，李勝群，等.氣質(zhì)聯(lián)用法分析炮制對乳香揮發(fā)油的影響[J].中成藥，1996，18(11)：20-22.

[4] 宋光林，郭峰，曾廣銘，等.乳香中乙酸辛酯含量的測定[J].貴州科學(xué)，2008，26(1)：57-60.

[5] 張會(huì)敏，王萌，郭長強(qiáng).全國5個(gè)不同地區(qū)乳香醋炙前后乙酸辛酯的含量變化[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，27(1)：10-12.

[6] 殷玉生，劉產(chǎn)明.乳香炮制方法的探討[J].中藥通報(bào)，1986，11(10)：22-24.

OptimizationandValidationofStir-bakingwithVinegarTechnologyforOlibanumbyOrthogonalTest

NIUChao1，ZHANGHuimin2*

(1.TheEighthPeople'sHospitalofJinan，Jinan250014，China；2.ShandongAcademyofChineseMedicine，Jinan250014，China)

Objective：To optimize the stir-baking with vinegar technology for Olibanum by orthogonal test，and establish a manufacturing practice.Methods：The intrinsic quality and traditional appearance were chosen as indexes.The four factors of the stir-baking time，stir-baking temperature，adding weight and vinegar volume were investigated by L9(34)orthogonal test.Results：The optimal technology was as follows：Take Olibanum 300 g at 140 ℃ constantly stir fry for 9 minutes，when the surface is micro welding，spraying 15 mL 5% vinegar，then stir fry for 1 minutes，until vinegar is soaked and Olibanum appears to have glossy sheen，then put it out of the pot quickly，cool down.Conclusion：The optimal stir-baking with vinegar technology for Olibanum is reasonable and feasible.It can be used for manufacturing practice and guide the standardized production for Olibanum stir-baking with vinegar.

Olibanum；stir-baking with vinegar technology；orthogonal test；octyl acetate

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.3.014

2014-07-09)

《山東省中藥飲片炮制規(guī)范》——醋乳香

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張會(huì)敏，碩士，研究方向：中藥化學(xué)、中藥炮制；E-mail：huiminzhang@163.com