羅遠(yuǎn)鴻，李敏*，俸世洪，黃瀟，劉聰

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 611130；2.成都第一藥業(yè)有限公司，四川 成都 610036)

·中藥農(nóng)業(yè)·

川產(chǎn)益母草質(zhì)量分析研究△

羅遠(yuǎn)鴻1，李敏1*，俸世洪2，黃瀟1，劉聰1

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 611130；2.成都第一藥業(yè)有限公司，四川 成都 610036)

目的：通過(guò)對(duì)比研究四川不同地區(qū)栽培及野生益母草的有效成分含量和藥材產(chǎn)量，為建立益母草規(guī)范化種植基地提供參考。方法：參照《中華人民共和國(guó)藥典》2010版用HPLC法測(cè)定益母草有效成分含量。結(jié)果：四川11個(gè)產(chǎn)地的18批益母草鹽酸水蘇堿和鹽酸益母草堿含量范圍分別為0.69%～2.31%和0.070%～0.454%。而涼山州所產(chǎn)益母草的鹽酸水蘇堿和鹽酸益母草堿含量最高，分別為1.71%和0.263%，不僅含量是《中華人民共和國(guó)藥典》2010版規(guī)定的3～5倍，產(chǎn)量也最高，為7258.55 kg·hm-2。結(jié)論：四川涼山州益母草產(chǎn)量及有效成分含量均較高，可作為益母草的適宜栽培區(qū)。

四川；益母草；有效成分；產(chǎn)量；適宜栽培區(qū)

益母草始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，為唇形科植物益母草LeonurusjaponicusHoutt.的新鮮或干燥地上部分，具有活血調(diào)經(jīng)、利尿消腫、清熱解毒的功效，臨床處方用于月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)經(jīng)閉、惡露不盡、水腫尿少、瘡瘍腫毒[1]，同時(shí)也廣泛應(yīng)用于益母草膏、益母草注射液、益母草顆粒等中藥成方制劑中，是中醫(yī)治療婦科疾病的要藥。

現(xiàn)代研究表明，鹽酸水蘇堿和鹽酸益母草堿為益母草治療疾病的主要有效成分[2-3]。古本草中記載益母草“生海濱池澤，處處有之”，現(xiàn)在，益母草資源也很豐富，全國(guó)大部分地區(qū)均有分布。近年來(lái)，藥學(xué)工作者針對(duì)各地益母草的生物堿含量進(jìn)行了較多研究[4-7]，但關(guān)于四川不同產(chǎn)地益母草的分析卻未見(jiàn)報(bào)道。本研究參照《中華人民共和國(guó)藥典》2010版對(duì)產(chǎn)于四川11個(gè)產(chǎn)地的18批益母草進(jìn)行含量測(cè)定和產(chǎn)量分析，為確定四川益母草適宜栽培區(qū)，建立益母草規(guī)范化種植基地及中藥成方制劑的原料基地奠定基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 樣品

實(shí)驗(yàn)所用益母草樣品收集自四川境內(nèi)，共18批，其中9批為野生藥材，另外9批為栽種藥材。栽種藥材均設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)小區(qū)為67 m2[8]，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定與藥用植物教研室李敏教授鑒定，均為《中華人民共和國(guó)藥典》2010版收載益母草L.japonicus的干燥藥材，樣品信息見(jiàn)表1。

1.2 試藥與試劑

鹽酸水蘇堿對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)110712-201111，純度99.4%)、鹽酸益母草堿對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)111823-201202，純度94.7%)，乙腈(色譜純，F(xiàn)isher Scientific)；乙醇為分析純，磷酸、冰醋酸為色譜純，辛烷磺酸鈉，均購(gòu)自成都市科龍化工試劑廠。

1.3 儀器

高效液相色譜儀(安捷倫1200)，蒸發(fā)光檢測(cè)器(ELSD 2000ES)，電子天平(常熟雙杰測(cè)試儀器廠，JJ200型)。

2 方法與結(jié)果

2.1 有效成分含量測(cè)定

2.1.1 供試品溶液的制備 將收集的益母草除去雜質(zhì)，切段，干燥，打粉。取粉末(過(guò)三號(hào)篩)約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25 mL，稱定重量，加熱回流2 h，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.1.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱定鹽酸水蘇堿對(duì)照品2.57 mg，加70%乙醇制成0.51 mg·mL-1的溶液，即得鹽酸水蘇堿對(duì)照品溶液。

精密稱定鹽酸益母草堿對(duì)照品380 μg，加70%乙醇制成35.99 μg·mL-1的溶液，即得鹽酸益母草堿對(duì)照品溶液。

2.1.3 含量測(cè)定

2.1.3.1 鹽酸水蘇堿的含量測(cè)定 以丙基酰胺鍵合硅膠(Agela Venusil HILIC VH952505-0，4.6×250 mm，5 μm)為填充劑；以乙腈-0.2%冰醋酸溶液(80∶20)為流動(dòng)相；用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)。理論板數(shù)按鹽酸水蘇堿峰計(jì)算不低于6000。

分別精密吸取鹽酸水蘇堿對(duì)照品溶液5 μL、10 μL，進(jìn)樣，以對(duì)照品峰面積的對(duì)數(shù)(Y)為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量的對(duì)數(shù)(X)為橫坐標(biāo)，采用外標(biāo)兩點(diǎn)法，得回歸方程Y=1.1829X+6.4614，R2=1。

精密吸取供試品溶液10 μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，其結(jié)果見(jiàn)表1。

2.1.3.2 鹽酸益母草堿的含量測(cè)定 以十八烷基硅烷鍵合硅膠(安捷倫4.6×150 mm，5 μm)為填充劑；以乙腈-0.4%辛烷磺酸鈉的0.1%磷酸溶液(24∶76)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為277 nm。理論板數(shù)按鹽酸益母草堿峰計(jì)算應(yīng)低于6000。

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 四川不同產(chǎn)地益母草含量測(cè)定表(n=3)

按照《中華人民共和國(guó)藥典》2010版益母草含量測(cè)定項(xiàng)下要求，含鹽酸水蘇堿不得少于0.50%，鹽酸益母草堿不得少于0.050%。18批樣品中，鹽酸水蘇堿含量為0.69%～2.31%，鹽酸益母草堿含量為0.070%～0.454%，均符合規(guī)定。其中，以四川省涼山州會(huì)理縣所產(chǎn)益母草的鹽酸水蘇堿和鹽酸益母草堿含量最高，是《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的4～7倍。

將同一產(chǎn)地有多批樣品的藥材的含量測(cè)定結(jié)果取平均值，對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，具體情況見(jiàn)圖1。

由圖1可知，6個(gè)產(chǎn)地中，以四川省涼山州所產(chǎn)益母草的鹽酸水蘇堿和鹽酸益母草堿含量最高，分別為1.71%和0.263%，是《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的3～5倍。

2.2 栽培益母草產(chǎn)量分析

對(duì)于栽培的益母草，在實(shí)驗(yàn)小區(qū)按6.7 m2取樣，3次重復(fù)[8]，除去雜質(zhì)，切段，干燥后稱重，折算產(chǎn)量，結(jié)果見(jiàn)表2。

在四川省涼山州會(huì)理縣栽培的YMC-10樣品產(chǎn)量最高，每公頃可達(dá)8032.0 kg，而產(chǎn)自自貢的益母草產(chǎn)量最低，僅3696.7 kg。將同一產(chǎn)地的樣品測(cè)定結(jié)果取平均值，對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，具體情況見(jiàn)圖2。

表2 栽培益母草(干品)產(chǎn)量測(cè)定結(jié)果表(n=3)

從圖2可知，產(chǎn)自四川涼山州的益母草產(chǎn)量為7258.55 kg·hm-2，遠(yuǎn)高于其他產(chǎn)地。

圖1 不同產(chǎn)地川產(chǎn)益母草含量測(cè)定結(jié)果圖

圖2 不同產(chǎn)地益母草產(chǎn)量結(jié)果圖

3 結(jié)論與討論

3.1近年來(lái)，關(guān)于益母草鹽酸水蘇堿含量的分析較多，據(jù)報(bào)道，產(chǎn)自我國(guó)各省的益母草，其含量從0.01%～2.14%之間有報(bào)道，以我國(guó)北方的益母草含量較高，最高為2.14%[4-5，7]。然而，該18批川產(chǎn)益母草樣品鹽酸水蘇堿和鹽酸益母草堿的含量均超過(guò)藥典規(guī)定，平均含量分別為1.34%和0.199%，最高者可達(dá)2.31%和0.454%，是藥典規(guī)定的4.6和9.1倍。樣品送四川省食品藥品檢驗(yàn)所檢測(cè)，各項(xiàng)指標(biāo)均符合藥典規(guī)定，表明四川的益母草質(zhì)量較優(yōu)。

3.218批樣品中，野生益母草鹽酸水蘇堿和鹽酸益母草堿的含量分別為0.95%和0.115%，而栽培益母草則為1.73%和0.283%，遠(yuǎn)高于野生益母草，為將栽培益母草用作中藥成方制劑的原料提供了理論基礎(chǔ)。

3.3益母草是臨床常用大宗中藥材，廣泛用于治療婦科疾病，其中藥成方制劑益母草注射液用于婦女助產(chǎn)，益母草藥材的安全性和有效性不容忽視。而市場(chǎng)上的益母草多為野生品，藥材質(zhì)量不穩(wěn)定，因此，應(yīng)規(guī)范化種植益母草，從源頭抓起，為市場(chǎng)提供質(zhì)量穩(wěn)定、均一、可控的的藥材。本文首次對(duì)四川不同地區(qū)所產(chǎn)益母草進(jìn)行分析，結(jié)果顯示四川省涼山州野生益母草的有效成分含量較高，鹽酸水蘇堿含量最高可達(dá)1.44%，甚至高于部分地區(qū)的栽培藥材，說(shuō)明四川省涼山州比較適宜益母草的生長(zhǎng)，這可能與涼山日照充足，晝夜溫差大，有利于有效物質(zhì)積累有關(guān)。同時(shí)，該地栽培益母草的有效成分含量和藥材產(chǎn)量也最高，且相對(duì)穩(wěn)定。綜上所述，四川省涼山州是益母草的適宜栽培區(qū)，可考慮在此建立益母草規(guī)范化種植基地和益母草中藥成方制劑原料基地。

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QualityAnalysisofSichuanmotherwort

LUOYuanhong1，LIMin1*，F(xiàn)ENGShihong2，HUANGXiao1，LIUCong1

(1.ChengduUniversityofTCM，Chengdu611130，China；2.ChengDuNO.1PharmaceuticalCo.，Ltd.，Chengdu610036，China)

Objective：To provide references for establishing standardized planting base by comparing and studying the effective components and medical yield of cultivated and wild motherwort from different areas of Sichuan.Methods：Determining the content of effective component in motherwort by HPLC referring to the Chinese Pharmacopoeia(2010 edition).Results：The ranges of the content of stachydrine hydrochloride and leonurine hydrochloride of the 18 groups of motherwort from 11 areas of Sichuan were 0.69%-2.31%and 0.070%-0.454%.The highest content of hydrochloric stachydrine(1.71%)and leonurine hydrochloride(0.263%)in motherwort were produced in Liangshan prefecture，which were 3- 5 times more than the standards of Chinese Pharmacopoeia(2010 edition).The yield of motherwort in Liangshan prefecture is the highest，which was 7258.55 kg·hm-2.Conclusion：The yield and the content of effective components of motherwort in Liangshan prefecture in Sichuan are higher，where it can be used as a suitable cultivation area for motherwort.

Sichuan；motherwort；active ingredients；yield；suitable cultivation area

2014-11-13)

四川省科技計(jì)劃項(xiàng)目-益母草資源保護(hù)及規(guī)范化種植基地建設(shè)關(guān)鍵技術(shù)研究(2014SZ0084)；2015年度中醫(yī)藥行業(yè)科研專項(xiàng)-益母草優(yōu)良品種選育方法及種植質(zhì)量控制技術(shù)研究(2015468002-1)

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李敏，教授，研究方向：中藥品種、質(zhì)量及資源研究；E-mail：028limin@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.5.012