高金秋 王官達(dá) 程金芝 趙娜

（白城師范學(xué)院 吉林白城 137000）

籽粒莧愈傷組織誘導(dǎo)條件的初步篩選

高金秋 王官達(dá) 程金芝 趙娜

（白城師范學(xué)院 吉林白城 137000）

利用子葉，胚軸作為外植體，誘導(dǎo)愈傷組織并對(duì)影響愈傷組織誘導(dǎo)和分化的激素種類進(jìn)行篩選。結(jié)果表明：單一激素的最佳選擇為子葉：NAA 1mg/L或KT 5mg/L，胚軸：NAA 0.1mg/L或KT 5mg/L的。愈傷組織誘導(dǎo)的最佳選擇為子葉：NAA 0.1mg/L+KT 3mg/L，胚軸：NAA 0.1mg/L+KT 5mg/L。

籽粒莧；愈傷組織；激素

籽粒莧是一年生草本作物，具有良好的環(huán)境耐受性，增產(chǎn)潛力大，為當(dāng)今食品工業(yè)重要原料之一[1]。植物組織培養(yǎng)是在無菌條件下，并給予適當(dāng)培養(yǎng)條件，使其成長為完整植株的過程。因此，本文利用籽粒莧的子葉和胚軸作為外植體材料，對(duì)誘導(dǎo)條件進(jìn)行篩選，為實(shí)現(xiàn)籽粒莧的育種提供了技術(shù)平臺(tái)。

1 試驗(yàn)材料與方法

選取籽粒莧種子，在70%乙醇溶液中浸泡30s，并充分搖晃燒杯使種子充分接觸酒精，后用無菌水沖洗一次；乙醇消毒后，選用現(xiàn)配置的1%次氯酸鈉溶液消毒25min，用無菌水沖洗4～6次。每瓶25粒種子，共十瓶。接種后錐形瓶置于溫度為26℃±2℃的光照培養(yǎng)箱下，培養(yǎng)4～6d。這段時(shí)間生長的子葉及胚軸的分化能力是最強(qiáng)的，接種后觀察外植體生長狀態(tài)。

培養(yǎng)4～6d后，取出幼苗，分別切取子葉和1cm長的胚軸，放入不同濃度的培養(yǎng)基中。每個(gè)濃度三瓶，每瓶15個(gè)。將接種后的培養(yǎng)基置于26℃±2℃的光照培養(yǎng)箱中，觀察記錄各濃度愈傷組織生長情況。胚軸生長狀態(tài)見，子葉生長狀態(tài)見[2]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同激素對(duì)外植體愈傷誘導(dǎo)的影響

子葉、胚軸接到不同濃度KT的固體培養(yǎng)基上，2d后愈傷組織開始形成，對(duì)誘導(dǎo)率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。可知子葉在MS+KT 1mg/L條件下誘導(dǎo)率最低；胚軸在MS+KT 5mg/L條件下愈傷組織誘導(dǎo)效果最好。

子葉、胚軸接到不同濃度NAA的固體培養(yǎng)基上，子葉從第二天，胚軸從第一天開始愈傷組織形成，統(tǒng)計(jì)誘導(dǎo)率。其中，子葉在MS+NAA 1mg/L條件愈傷組織誘導(dǎo)效果最好；胚軸在MS+NAA 0.1mg/L條件下誘導(dǎo)效率最高。

2.2 不同激素配比對(duì)子葉、胚軸愈傷組織誘導(dǎo)的影響

子葉接種到不同KT和NAA濃度配比的固體培養(yǎng)基上，15d后統(tǒng)計(jì)的愈傷組織誘導(dǎo)數(shù)和誘導(dǎo)率。可知，愈傷組織誘導(dǎo)率均在75%以上，MS+NAA 0.1mg/L+KT 5mg/L愈傷組織誘導(dǎo)效果最好。

胚軸接種到不同KT和NAA濃度配比的固體培養(yǎng)基上，15d后統(tǒng)計(jì)的愈傷組織誘導(dǎo)數(shù)目和誘導(dǎo)率見表1?？芍?，MS+NAA 0.1mg/L+KT 5mg/L以及MS+NAA 0.05mg/L+KT 5mg/L愈傷組織誘導(dǎo)效果均為最佳。

表1 不同激素配比的籽粒莧胚軸愈傷組織誘導(dǎo)情況

3 討論

單一激素的最佳選擇為子葉：NAA 1mg/L或KT 5mg/L，胚軸：NAA 0.1mg/L或KT 5mg/L。愈傷組織誘導(dǎo)的最佳選擇為子葉：NAA 0.1mg/L+KT 3mg/L，胚軸：NAA 0.1mg/L+KT 5mg/L。在操作過程中，注意無菌環(huán)境的建立[3]。觀察愈傷組織發(fā)現(xiàn)其形態(tài)各異，有水浸狀、排列松散、排列緊實(shí)等。其中部分致密松脆的愈傷組織存在分化率差異較大，尚有待進(jìn)一步調(diào)整，為構(gòu)建籽粒莧再生體系的構(gòu)建提供優(yōu)化條件。

[1]孟昭寧.籽粒莧人類未來的糧食[J].西部糧油科技，2003，28（6）：30～31.

[2]曹孜義，劉國民.實(shí)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)教程（第三版）[M].甘肅科學(xué)技術(shù)出版社，2002，6.

[3]鞏振輝，申書興.植物組織培養(yǎng)（第一版）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2007：7～42.

S541+.9

A

1005-7897（2015）10-0017-01

吉林省教育廳科學(xué)技術(shù)研究“十二五”規(guī)劃課題。

2015-10-10

高金秋（1976-），女，山東單縣人，講師，碩士，主要從事植物生物技術(shù)研究。