趙海雨，闞旭升

（遼寧省刑事科學(xué)技術(shù)研究所，沈陽 110032）

佐匹克隆快速檢驗

趙海雨，闞旭升

（遼寧省刑事科學(xué)技術(shù)研究所，沈陽 110032）

利用電噴霧液質(zhì)聯(lián)用法快速檢驗血中佐匹克隆。少量血液樣品采用乙腈沉淀蛋白后直接取上清液進樣，使用Allure PFP Propyl（5μm，100mm×2.1mm）柱，流動相：乙腈:10mmol/L 乙酸銨-0.1%甲酸緩沖液=70:30進行分離，經(jīng)電噴霧離子源正離子化后通過三重四級桿質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）對佐匹克?。╩/z 389.3/345.4 和m/z 389.3/245.2）進行定性分析。被害人血中檢出佐匹克隆成分。液質(zhì)聯(lián)用法檢驗血中佐匹克隆快速、準確、簡單，可用于案件中檢測血中佐匹克隆成分。

法醫(yī)毒物分析；LC/MS/MS；快速檢驗；佐匹克隆

DOΙ: 10.16467/j.1008-3650.2015.02.021

佐匹克隆（zopiclone）是新一代環(huán)吡咯酮類鎮(zhèn)靜催眠藥，純品佐匹克隆是白色至淡黃色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭，味苦，易溶于二甲亞砜或氯仿，較易溶于醋酸，較難溶于甲醇、丙酮或乙腈，極難溶于乙醚或異丙醇，幾乎不溶于水，熔點178℃。佐匹克隆具有與巴比妥、苯二氮卓等一二代安眠藥完全不同的化學(xué)結(jié)構(gòu)而發(fā)揮不同的藥理學(xué)作用，尤其對正相睡眠第三、五期的作用，它吸收迅速、很快分布于大腦，血濃度到達峰值快，下降也快，故安全而高效［1］。由于該藥物見效快，基本無耐藥性和依賴性等優(yōu)點近年來使用越加廣泛。本文對一起犯罪嫌疑人采用佐匹克隆進行麻醉搶劫案件進行檢驗，報道如下：

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

Agilent 1200系列液相色譜儀（包括四元泵、在線真空脫氣機、柱箱等）；AB Sciex 4000Qtrap三重四級桿質(zhì)譜儀；Eppendorf 5810R高速離心機。0.22μm有機系針頭過濾器（Shimadzu）；乙腈，色譜純（Fisher）；醋酸銨，色譜純（Dikma）；甲酸，色譜純（Dikma）佐匹克隆標準品（中國藥品生物制品檢定所）。

1.2 儀器條件

色譜條件：色譜柱：Allure PFP Propyl（5μm，100mm×2.1mm）；流動相：乙腈:10mmol/L乙酸銨-0.1%甲酸緩沖液=70:30。柱箱溫度為30℃，進樣量為5μL。

質(zhì)譜參數(shù)：電噴霧電離，正離子模式（ESI+）。操作參數(shù)分別為：碰撞氣（Collision Gas）High；氣簾氣（Curtain Gas）20；離子噴射電壓（ Ion spray Voltage）5500V；溫度（Temperature）450℃；霧化氣（GAS1）50；輔助加熱氣（GAS2）55。多反應(yīng)監(jiān)測模式（MRM）測定389.3/345.4和389.3/245.2兩對離子。

1.3 樣 本

取被害人血樣200μL，用2mL乙腈稀釋并沉淀蛋白，充分震蕩、離心后，取上清液過0.22μm有機系針頭過濾器后裝瓶待測。

2 結(jié)果與討論

2.1 結(jié) 果

檢材的多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）結(jié)果如圖1，100ng/ mL標準品佐匹克隆多反應(yīng)檢測結(jié)果如圖2。如圖所見，檢材中不僅同時出現(xiàn)389.3/345.4和389.3/245.2兩對離子對且保留時間與標準品佐匹克隆保留時間一致，可以確認含有佐匹克隆成分。

2.2 討 論

近半年來本實驗室陸續(xù)遇到幾起麻醉搶劫案件中檢出佐匹克隆成分，由于該藥物的使用越發(fā)廣泛，可以預(yù)見今后該類案件仍將繼續(xù)發(fā)生。由于佐匹克隆在親核溶劑中容易分解，因此在案件檢驗中應(yīng)盡量避免使用甲醇、乙醇等親核溶劑而采用乙腈、丙酮等溶劑［2］。實驗考察了XDB C18、Ultra C18、Allure PFP Propyl等色譜柱采用不同配比甲醇:醋酸銨-甲酸緩沖液和乙腈:醋酸銨-甲酸緩沖液溶液流動相，發(fā)現(xiàn)使用Allure PFP Propyl色譜柱，流動相為乙腈:10mmol/ L乙酸銨-0.1%甲酸緩沖液=70:30時峰形較好，分析時間較快。利用三重四級桿質(zhì)譜的高靈敏度和選擇性，對于麻醉搶劫案件所送的血和尿等生物檢材可以直接使用乙腈簡單進行前處理后檢測，方法快捷準確，十分適宜實驗室日常檢驗工作。

圖1 血液樣品多反應(yīng)監(jiān)測圖Fig.1 MRM chromatogram of victim’s blood sample

圖2 100ng/mL佐匹克隆標準品MRM圖Fig.2 MRM chromatograms of 100ng/mL standard zopiclone

［1］ 孟朝陽.新一代安眠藥“憶夢返”的性質(zhì)及檢測［J］.光譜實驗室，2003， 20（3）: 471-474.

［2］ 利越，馬治平，楊召雨，等.幾種溶劑對佐匹克隆檢驗的影響［J］.廣東公安科技，2009， 94（1）: 19-20.

引用本文格式：趙海雨，闞旭升.佐匹克隆快速檢驗［J］.刑事技術(shù)，2015，40（2）：164-165.

Rapid Detection of Zopiclone

ZHAO Hai-yu， KAN Xu-sheng
（Liaoning Ιnstitute of Forensic Science， Shenyang 110032， China）

Zopiclone， one kind of new generation of sedative-hypnotic of the cyclopyrrolone compounds， has different chemical structures and different pharmacological function from that of the fi rst and second generations of the hypnagogue like barbitals and benzodiazepines.Recently， in a robbery case， the suspects utilized the zopiclone to anesthetize the victims.Ιn our laboratory， the blood sample of the victim was treated with acetonitrile to precipitate the proteins and the supernatant was separated through an Allure PFP Propyl column （5μm， 100mm×2.1mm） with the mobile phase containing acetonitrile （diluted to 70% by the buffer of 10mmol/L ammonium acetate mixed with 0.1% formic acid）.The AB Sciex 4000Qtrap mass spectrometer equipped with an electro-spraying ionization source was used to detect two ion combinations of m/z 389.3/345.4 and m/z 389.3/245.2 by multiple reaction monitoring （MRM） for qualitative analysis of zopiclone.Finally， zopiclone was detected in the blood of the victims.

forensic toxicological analysis； LC/MS/MS； quick detection； zopiclone

DF794.1

B

1008-3650（2015）02-0164-02

趙海雨（1980—），男，工程師，學(xué)士，研究方向為毒物檢驗。 E-mail：molemoya@gmail.com

2014-02-20