張 莒 ，何 楊 ，徐遠(yuǎn)航 ，馮亞坤 ，彭 西 *，袁施彬

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，四川 溫江 611130；2.西華師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，四川 南充 637000）

紅嘴相思鳥(niǎo)別名紅嘴玉、相思鳥(niǎo)、紅嘴綠觀音,是馳名中外的觀賞鳥(niǎo)類(lèi)，是一種以昆蟲(chóng)為主食的雜食性鳥(niǎo)類(lèi)[1]。紅嘴相思鳥(niǎo)飼養(yǎng)困難，不易存活，且近年來(lái)隨著野外捕捉量過(guò)大而致數(shù)量驟減，《瀕危野生動(dòng)植物種國(guó)際公約》（CITES）于2007年將其列為國(guó)家II級(jí)保護(hù)動(dòng)物。

本試驗(yàn)對(duì)幼齡紅嘴相思鳥(niǎo)的小腸各段進(jìn)行了顯微觀察，旨在填補(bǔ)紅嘴相思鳥(niǎo)小腸形態(tài)學(xué)研究的空白，為紅嘴相思鳥(niǎo)的種群保護(hù)提供基礎(chǔ)研究資料。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 1、5、9日齡育雛期紅嘴相思鳥(niǎo)幼鳥(niǎo)以及成年紅嘴相思鳥(niǎo)各3只，均來(lái)源于西華師范大學(xué)紅嘴相思鳥(niǎo)人工馴繁實(shí)驗(yàn)室。

1.1.2 試劑 HE染色的主要試劑：苦味酸、蘇木素、伊紅、甲醛、95%酒精、無(wú)水乙醇、二甲苯、石蠟、冰醋酸、明礬、氧化汞、中性樹(shù)膠。

1.1.3 主要儀器設(shè)備 切片機(jī)、一次性刀片、顯微照相系統(tǒng)、光學(xué)顯微鏡、恒溫干燥箱、電子天平、電熱恒溫水溫箱。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 HE染色 分別取1、5、9日齡紅嘴相思鳥(niǎo)幼鳥(niǎo)以及成年紅嘴相思鳥(niǎo)的十二指腸、空腸和回腸于4%多聚甲醛溶液中固定24h以上，脫水包埋；采用連續(xù)切片（切片厚度5μm）進(jìn)行改良HE法[2]染色，中性樹(shù)膠封片，然后于光學(xué)顯微鏡下觀察十二指腸、空腸和回腸的常規(guī)組織學(xué)結(jié)構(gòu)。

1.2.2 測(cè)定指標(biāo) 采用Olympus光學(xué)顯微鏡觀察，Nickon 3CCD顯微數(shù)碼照相系統(tǒng)采集圖像，并用Image Pro Plus 5.0圖像分析軟件測(cè)量小腸各段的絨毛高度、隱窩深度和肌層厚度。每只鳥(niǎo)每個(gè)組織取5張切片，每張切片隨機(jī)取5個(gè)視野在4×10倍視野下測(cè)量。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)均用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以平均數(shù)（）±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）表示[3]；用單因素方差分析法比較不同日齡間的差異顯著性。

2 結(jié)果與數(shù)據(jù)分析

2.1 常規(guī)形態(tài) 紅嘴相思鳥(niǎo)的小腸分為十二指腸、空腸、回腸，小腸管壁由黏膜、黏膜下層、肌層和漿膜層4層構(gòu)成，小腸黏膜上有環(huán)行的皺襞、腸絨毛和小腸腺。絨毛長(zhǎng)，但無(wú)中央乳糜管，小腸腺短，黏膜下層薄。腸絨毛是腸上皮和固有層共同向腸腔突出形成的細(xì)小突起，相思鳥(niǎo)的腸絨毛多呈指狀、葉狀或柱狀，在十二指腸和空腸分布最密，向后則逐漸減少變稀疏。與其他鳥(niǎo)禽相似，相思鳥(niǎo)的黏膜下層無(wú)十二指腸腺。

2.2 腸道各層的變化規(guī)律 同日齡不同腸段的消化道組織學(xué)比較中，腸絨毛高度、隱窩深度、肌層厚度及絨毛隱窩比值都呈現(xiàn)出十二指腸＞空腸＞回腸的趨勢(shì)；同腸段不同日齡的消化道組織學(xué)比較中，十二指腸、空腸、回腸的腸絨毛高度、隱窩深度以及肌層厚度隨著日齡的增加而增長(zhǎng)，絨毛高度與隱窩深度的比值則呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。詳細(xì)數(shù)據(jù)及差異性比較見(jiàn)表1。

3 討論

紅嘴相思鳥(niǎo)腸段較短，約為體長(zhǎng)的0.94倍，藍(lán)翅希鹛和灰胸藪鹛的腸道分別為體長(zhǎng)的0.85倍和0.94倍[4]。紅嘴相思鳥(niǎo)與藍(lán)翅希鹛和灰胸藪鹛同為雜食性鳥(niǎo)類(lèi)，可見(jiàn)該類(lèi)鳥(niǎo)腸道短，盲腸不發(fā)達(dá)，無(wú)明顯的消化優(yōu)勢(shì)[5]。紅嘴相思鳥(niǎo)的腸絨毛無(wú)中央乳糜管，與環(huán)頸雉、東方白鸛和禽類(lèi)相同[6-8]，各腸段未見(jiàn)腸絨毛分支現(xiàn)象，與西北冠鶴、環(huán)頸雉[6，9]不同，但與非洲鴕鳥(niǎo)[10]相同。

3.1 腸絨毛高度對(duì)紅嘴相思鳥(niǎo)消化功能的影響 紅嘴相思鳥(niǎo)與其他禽類(lèi)一樣，小腸是消化和吸收營(yíng)養(yǎng)的主要器官。小腸具有吸收和分泌兩種功能，吸收是絨毛的主要功能，而腸腺則具有分泌能力。研究結(jié)果顯示：同日齡下，紅嘴相思鳥(niǎo)的腸絨毛高度以十二指腸最高，其次為空腸，回腸最短；同腸段下，腸絨毛高度隨著日齡的增長(zhǎng)而增加，且5日齡與1日齡相比絨毛高度成倍數(shù)增長(zhǎng)。腸絨毛的數(shù)量、長(zhǎng)度和形態(tài)結(jié)構(gòu)在很大程度上決定了消化道的消化和吸收功能強(qiáng)弱[11-12]，當(dāng)小腸絨毛的高度下降或形狀發(fā)生變化時(shí)[13-14]，就會(huì)減少絨毛單位面積內(nèi)吸收細(xì)胞的數(shù)量，降低消化吸收的功能。Pluske et al.[15]也證實(shí)絨毛更高的豬能消耗更多的飼料。

表1 紅嘴相思鳥(niǎo)小腸各層的變化規(guī)律（±SD） μm

注:同列比較，上標(biāo)不同大寫(xiě)字母表示相同日齡不同腸段間差異極顯著（P<0.01），標(biāo)不同小寫(xiě)字母表示相同日齡不同腸段間差異顯著（P<0.05）；同行比較，上標(biāo)不同大寫(xiě)字母表示相同腸段不同日齡間差異極顯著（P<0.01），不同小寫(xiě)字母表示相同腸段不同日齡間差異顯著（P<0.05）。

項(xiàng)目 腸道1日齡5日齡腸絨毛高度 十二指腸217.8±5.980AaDd 9日齡 雌 雄490.2±11.67AaCc空腸169.7±11.69BbDd 537.3±16.21AaBb 606.3±27.50AaAa 588.6±15.30AaAa 318.1±21.38BbCc回腸82.74±12.00CcDd 396.9±26.84BbBb 483.±24.66BbAa 458.7±22.92BbAa 141.7±7.101CcCc隱窩深度 十二指腸37.29±6.551AaCd 216.0±8.435CcBb 337.3±12.76CcAa 325.7±9.514CcAa 95.13±8.528AaBc空腸36.44±10.83AaCc 126.1±8.375AaBb 253.8±30.61AaAa 237.9±12.57AaAa 86.12±8.751AaBb回腸24.62±7.101AaDd 104.±3.179ABbBb 183.±15.52BbAa 164.9±15.80BbAa 52.00±1.729BbCc肌層厚度 十二指腸37.73±10.01AaBc 81.77±15.95BcBb 152.34.223BbAa 137.2±12.101BcAa 55.79±8.793AaAb空腸35.07±8.420AaBc 66.24±5.349AaAa 74.22±8.558AaAa 69.60±8.342AaAa 52.70±2.615AaAb回腸33.21±7.408AaCc 61.36±7.835AaAa 69.26±7.476AaAa 65.20±5.292AaAa 49.81±1.099AaBb絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值十二指腸5.970±1.098AaAa 58.9±5.645Aa ABab 65.55±5.639AaAa 61.98±4.961AaAa 5.17±0.459Aa ABab空腸4.88±1.186AabAa 4.26±0.154AaBb 2.40±0.203AaCc 2.478±0.136AaCc 3.73±0.631Bb ABab回腸3.45±0.482AbAa 3.80±0.339ABb ABab 2.64±0.115AaBb 2.807±0.397AaBb 2.73±0.228Bc ABb 2.716±0.574Bc ABb 2.21±0.120AbBb 2.390±0.285AaBb

3.2 隱窩深度和肌層厚度對(duì)紅嘴相思鳥(niǎo)消化功能的影響 隱窩深度是腸上皮細(xì)胞成熟率的反應(yīng)性指標(biāo)，隱窩變深表明腸上皮細(xì)胞成熟率降低，變淺則表明成熟率上升[16]。同日齡下，紅嘴相思鳥(niǎo)十二指腸的隱窩深度大于空腸和回腸，且隨著日齡的增加隱窩深度呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)，這與Poole等[17]的研究結(jié)果一致。小腸各段的肌層厚度都隨著日齡的增加而逐漸增長(zhǎng)。相同日齡比較，十二指腸是肌層厚度最大的腸段，回腸最薄。腸道肌層厚度越大，其蠕動(dòng)能力越強(qiáng)，食糜與腸絨毛充分接觸的面越大，越有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。

3.3 絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值（V/C）對(duì)小腸吸收功能的影響 V/C比值下降，則消化吸收功能降低，動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育受阻[18]。本研究顯示：絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值在相同日齡下，十二指腸大于空腸和回腸；各個(gè)腸段的比值隨著日齡的增加逐漸降低；幼齡階段比值較大，成年階段比值較小。紅嘴相思鳥(niǎo)小腸各段的消化吸收能力由強(qiáng)到弱依次為：十二指腸、空腸和回腸；剛出殼的幼鳥(niǎo)的消化能力更強(qiáng)，之后隨著其生長(zhǎng)速度減緩，V/C比值相應(yīng)降低。目前，已有大量的研究發(fā)現(xiàn)，幼齡動(dòng)物小腸絨毛的形態(tài)和發(fā)育在初乳、斷奶應(yīng)激、日糧類(lèi)型改變等因素的影響下均會(huì)發(fā)生改變。比如，斷奶應(yīng)激或斷奶日糧中抗原活性物質(zhì)導(dǎo)致的過(guò)敏反應(yīng)可使絨毛變短、隱窩加深。筆者認(rèn)為，隨著日齡增加，紅嘴相思鳥(niǎo)各腸段的V/C值下降以及1～5日齡腸絨毛高度的成倍增長(zhǎng)，與營(yíng)養(yǎng)來(lái)源和能量代謝的改變等因素有關(guān)；并且可推測(cè)，育雛期紅嘴相思鳥(niǎo)小腸結(jié)構(gòu)和功能的完善以及機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育主要集中在5日齡內(nèi)。Baranyiova et al.[19]有關(guān)肉仔雞的研究也證實(shí)了這一猜想。這為進(jìn)一步探索育雛期紅嘴相思鳥(niǎo)小腸發(fā)育規(guī)律的機(jī)理奠定了基礎(chǔ)，同時(shí)為其人工繁養(yǎng)過(guò)程中制定合理的飼養(yǎng)方法提供了理論依據(jù)。

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