舒 展 呂春華 葉爾肯 安納斯 黃楊波

(新疆阿勒泰地區(qū)動(dòng)物疾病控制與診斷中心 新疆 阿勒泰市836500)

膠體金免疫層析技術(shù)（GICA） 是1971年FaulkWP與TaylorGM發(fā)明的，迄今已被大量應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢測與動(dòng)物疫病診斷等領(lǐng)域。該技術(shù)是一種快速固相膜免疫分析技術(shù)，將硝酸纖維膜作為載體。它主要由膠體金標(biāo)記技術(shù)、免疫檢測技術(shù)以及蛋白層析技術(shù)三種技術(shù)組成。該技術(shù)操作簡便，無需專門的儀器設(shè)備，檢測結(jié)果清晰直觀，非常適合現(xiàn)場快速檢測。本文主要對(duì)GIGA技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用情況作一簡要概述。

1 GICA 在動(dòng)物病毒診斷中的應(yīng)用

OhJS等建立了一種膠體金免疫層析法，主要用于檢測犬瘟熱病毒抗體。通過試驗(yàn)證實(shí)，和血凝抑制試驗(yàn)（HI）相比，GICA的敏感性更高，為97.1%，其特異性為76.6%[1]。JoonTamY等制作出用于檢測偽狂犬病病毒抗原的膠體金試紙條，只需取25μL樣品進(jìn)行檢測，5分鐘后便可獲得檢測結(jié)果[2]。CuiSJ等建立了檢測H5亞型禽流感病毒抗體膠體金試紙條，并將其與HI進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)其特異性為97.6%，敏感性為88.8%。由于此方法操作簡單，反應(yīng)迅速，不用專門的儀器設(shè)備，CuiSJ等認(rèn)為該方法會(huì)被廣泛運(yùn)用到H5N1亞型禽流感病毒抗體的檢測中[2]。彭伏虎等研制出一種試劑盒，由稀釋液、試紙條、樣品管、塑料吸管、一次性手套、說明書等組成。該試劑盒是在H9亞型禽流感病毒膠體金免疫層析檢測法基礎(chǔ)上組裝而成的。在室溫條件下試劑盒一般可保存半年，在4℃條件下可保存一年。該試劑盒比HA試驗(yàn)具有更好的靈敏度、特異性，操作簡便、迅速，可在10分鐘內(nèi)得出檢測結(jié)果[3]。

2 GICA 在動(dòng)物細(xì)菌病診斷中的應(yīng)用

GICA對(duì)動(dòng)物細(xì)菌病具有較高的診斷價(jià)值，其相關(guān)膠體金診斷試紙條早已研制成功，有的已廣泛應(yīng)用于基層獸醫(yī)臨床診斷中，可診斷牛結(jié)核、牛布氏桿菌病、雞白痢、禽霍亂等疫病。檀華等利用膠體金標(biāo)記葡萄球菌蛋白A組裝出一種免疫層析試紙條。該試紙條主要用于檢測類鼻疽假單胞桿菌，檢測速度快[4]。通過試驗(yàn)證實(shí)，該試紙條和間接血凝試驗(yàn)的結(jié)果相同，敏感性與特異性均較高。曹春梅建立了一種檢測沙門氏菌O9抗原的方法，其檢測原理是建立在O9抗原的2株單克隆抗體的夾心基礎(chǔ)上的，同時(shí)，還借助了膠體金免疫層析試紙條的巧妙設(shè)計(jì)。這是一種初篩試驗(yàn)，可廣泛用于人工污染樣品試驗(yàn)以及現(xiàn)場檢測試驗(yàn)[4]。朱明東等建立了一種新的膠體金免疫層析法，用于診斷布魯菌病。他認(rèn)為GICA能迅速診斷牛布魯菌病，特異性與敏感性均很好[4]。

3 GICA 在動(dòng)物寄生蟲病診斷中的應(yīng)用

很多寄生蟲病均屬于人畜共患性疾病，因此，加強(qiáng)對(duì)動(dòng)物寄生蟲病的診斷具有十分重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。何偉等建立出檢測家畜血清中抗血吸蟲抗體的膠體金試紙條[5]。王艷華等建立了檢測弓形蟲抗體的免疫膠體金試紙條。與IHA診斷法相比，該試紙條的敏感性更強(qiáng)，另外，該檢測法還能比IHA診斷試劑早2d檢測出抗體[5]。桌國榮等建立了膠體金免疫層析試紙條，用于診斷犬弓形蟲，與IHA試劑盒相比，該試紙條的診斷符合率為99%。苑淑賢等建立了用于檢測豬旋毛蟲病的膠體金免疫層析試紙條。張守發(fā)等分別采用GICA與ELISA兩種方法檢測147份血清樣本，結(jié)果顯示GICA比ELISA的特異性更好，敏感性也更高，其總符合率約為87.8%[6]。同時(shí)，CICA操作簡單、檢測迅速，可用于大批量檢測，是診斷牛新孢子蟲病的理想選擇。

4 GICA 在水產(chǎn)動(dòng)物疫病檢測中的應(yīng)用

我國才剛剛將該技術(shù)應(yīng)用于水產(chǎn)動(dòng)物疫病檢測領(lǐng)域中。WangXJ等在2006年建立了一種膠體金免疫層析法試紙條，用于檢測蝦白斑綜合征病毒抗原，其敏感性遠(yuǎn)好于斑點(diǎn)免疫印跡測定試驗(yàn)[5]。由于操作簡單，無需專門的儀器，勢必會(huì)成為診斷蝦白斑綜合征病毒的一種有效方法

[1]OhJS，HaGW，ChoYS，etal.One-stepimmunochromatographyassay kit for detecting antibodies to canine parvoviru[J].ClinVaccineImmunol，2006，13（4）：520-524.

[2]林彤，獨(dú)軍政，叢國正，等.膠體金標(biāo)記免疫層析技術(shù)的最新應(yīng)用進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38(16)：8429-9431.

[3]彭伏虎，王政，張進(jìn)良，等.膠體金試紙條檢測H9亞型禽流感病毒的研究[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2008，39(8)：1081—1086.

[4]莊金秋，梅建國，沈志強(qiáng).膠體金免疫層析技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[J].中國動(dòng)物檢疫，2012，29（9）：70-75.

[5]祖立闖，王金良，李嬌，等.膠體金免疫層析技術(shù)在動(dòng)物疫病診斷上的應(yīng)用[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2010，31（8）：101-104.

[6]張守發(fā)，丁德，鞠玉琳，等.膠體金免疫層析法與ELISA法對(duì)牛的新孢子蟲血清抗體檢測結(jié)果的比較[J].中國獸醫(yī)雜志，2008，44（8）：54-55.