何啟蓋/華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院、國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系疫病防控崗位科學(xué)家

當(dāng)前主要豬病流行情況及圓環(huán)病毒病防控

何啟蓋/華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院、國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系疫病防控崗位科學(xué)家

豬圓環(huán)病毒病專題

近年來，豬圓環(huán)病毒病在世界各地暴發(fā)，成為危害全球養(yǎng)豬業(yè)的一大難題。特別是其對(duì)母豬造成繁殖障礙以及垂直傳播，導(dǎo)致母豬死胎和弱仔，嚴(yán)重?fù)p害了養(yǎng)豬人的利益；而圓環(huán)病毒造成的免疫抑制更是導(dǎo)致其他傳染病的免疫失敗，給豬場(chǎng)帶來巨大的潛在威脅。本期，我們整理了幾位國內(nèi)外專家在防控圓環(huán)病毒病的經(jīng)驗(yàn)分享，以及對(duì)該病最新的研究進(jìn)展介紹，以期能給讀者更加清楚的認(rèn)識(shí)圓環(huán)病毒病提供參考。（注：以下文章中出現(xiàn)的“圓環(huán)病毒、圓環(huán)病毒疫苗、圓環(huán)病毒病”等相關(guān)詞匯，如果沒有特殊說明，皆是指“2型圓環(huán)病毒”和其引起的發(fā)病。）

一、疾病發(fā)生的相關(guān)因素

1.外因。外來（經(jīng)飼料、空氣、媒介入侵）的病原微生物和寄生蟲；場(chǎng)內(nèi)存在的病原；毒物（毒素）。

2.內(nèi)因。動(dòng)物免疫狀態(tài)和營養(yǎng)狀態(tài)下降引起疾病。

3.誘因。飼養(yǎng)條件的標(biāo)準(zhǔn)化（密度、溫度、濕度、通風(fēng)；飼料品質(zhì)）沒有做好引發(fā)疾病。

診斷疾病時(shí)要用逆向思維，從誘因開始追溯。如果一個(gè)豬場(chǎng)疾病長期持續(xù)發(fā)生，那就要檢查飼料和飼養(yǎng)環(huán)節(jié)有什么漏洞誘發(fā)了各種疾病。如果一個(gè)豬場(chǎng)忽然急性發(fā)病，那就可能是有特定病原入侵。

二、國內(nèi)外豬病流行特點(diǎn)

1.國內(nèi)豬病的流行特點(diǎn)。

根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室2011年1月至2012年12月接診的共5 203家規(guī)模豬場(chǎng)送檢的27 022份臨床病料、病豬和33 215份血樣，對(duì)2 307家豬場(chǎng)進(jìn)行臨床疫病分類。其中呼吸道疾病占26.3%，腹瀉類疾病占21.7%，多系統(tǒng)衰竭疾病占22.3%，繁殖障礙占143.6%。根據(jù)送檢的不同階段豬病的分類如下：在種豬階段，162個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)送檢的病料中繁殖障礙疾病占50.8%；在產(chǎn)房仔豬階段，301個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)送檢的病料中腹瀉病占47.8%；在保育豬階段，637個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)送檢的病料中多系統(tǒng)綜合征占28.9%，呼吸系統(tǒng)疾病占20.6%，敗血癥占16.2%，腹瀉病占15.0%；在育肥豬階段：207個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)送檢的病料中呼吸系統(tǒng)疾病占46.2%，莫名發(fā)熱、敗血癥占18.1%，腹瀉病占14.9%。

對(duì)以上常發(fā)病做病原微生物分離，結(jié)果顯示圓環(huán)病毒病、藍(lán)耳病、豬瘟和流行性腹瀉等病毒感染依然嚴(yán)重，鏈球菌病、副嗜血桿菌病為主要細(xì)菌性疫病，傳染性胸膜肺炎和斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥感染為散發(fā)；豬丹毒在個(gè)別豬場(chǎng)呈現(xiàn)散發(fā)。

根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室2014年1～7月份對(duì)病原檢測(cè)陽性率的統(tǒng)計(jì)，每個(gè)月以藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病和流行性腹瀉的陽性率居高。檢測(cè)數(shù)據(jù)表明，藍(lán)耳病和圓環(huán)病毒病是全面普遍存在，流行性腹瀉也從以前的冬季流行逐漸演變成全年流行的趨勢(shì)。

2.國際豬病的流行特點(diǎn)。

2013年9月，第六屆亞洲豬病會(huì)議在越南召開。根據(jù)對(duì)大會(huì)文章的統(tǒng)計(jì)，在傳染病方面，藍(lán)耳病和圓環(huán)病毒病仍然是亞洲各國關(guān)注的重點(diǎn)。在國際方面，2014年6月，第23屆國際豬病會(huì)議在墨西哥召開，根據(jù)對(duì)大會(huì)論文集中文章的分類，病原學(xué)和流行病學(xué)的研究仍然是豬病的主要研究對(duì)象，其中藍(lán)耳病和圓環(huán)病毒病也是其中的重點(diǎn)。

三、豬圓環(huán)病毒病特征

1.圓環(huán)病毒病原學(xué)特征。

圓環(huán)病毒是由植物矮縮病毒和脊椎動(dòng)物杯狀病毒重組產(chǎn)生；分為PCV1型和PCV2型等；基因組1.7kb，是目前發(fā)現(xiàn)最小的脊椎動(dòng)物DNA病毒；PCV1目前為止尚未證明有致病性（有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示PCV1型也有致病性，所以未來應(yīng)加強(qiáng)對(duì)PCV1型的研究），PCV2存在于多個(gè)組織，有致病性；1965年，血清中發(fā)現(xiàn)PCV2病毒；1991年第一個(gè)圓環(huán)病毒病例報(bào)道；1998年分離出病毒。

我國流行的圓環(huán)病毒病毒株為PCV2b，PCV2b已經(jīng)成為我國優(yōu)勢(shì)的PCV2基因型，PCV2b毒力高于PCV2a，但是我國也有同一個(gè)豬場(chǎng)有PCV2a和PCV2b同時(shí)存在。PCV2a毒株在丹麥有發(fā)現(xiàn)，所以特別提醒從丹麥引種的豬場(chǎng)要特別注意對(duì)PCV2a的檢測(cè)。

2.圓環(huán)病毒病流行病學(xué)特征。

（1）傳染源與傳播途徑：病豬可通過病豬的糞尿、鼻腔排毒；帶毒公豬可通過精液排毒（公豬感染后5 d可從精液中檢測(cè)到病毒），值得注意的是，公豬呈間歇性排毒，其中PCV2a的排毒期是51 d，PCV2b的排毒期是81 d；垂直傳播；乳汁帶毒；在發(fā)熱期的血清中可以檢測(cè)到病毒；蚊子也是傳播病毒的重要途徑，所以豬場(chǎng)在夏天滅蚊不僅可以防止乙型腦炎，同時(shí)也可防控圓環(huán)病毒病。

（2）易感動(dòng)物：不同年齡的豬均可感染圓環(huán)病毒，胎兒、哺乳舍的小豬等感染后較為嚴(yán)重；人工感染的條件是大量接種病毒（接種量為≥107.0TCID50）1～7日齡無母乳的小豬。

（3）其他致病因子的參與：圓環(huán)病毒與細(xì)小病毒有協(xié)同作用；與肺炎支原體與豬繁殖與呼吸綜合征病毒有促進(jìn)作用；多次注射疫苗、藥物等應(yīng)急因素也可引起豬圓環(huán)病毒病。

3.致病機(jī)理。

豬圓環(huán)病毒病損害豬的免疫系統(tǒng)，降低機(jī)體免疫力，是新的免疫抑制?。ㄋ{(lán)耳病、霉菌毒素中毒、豬偽狂犬病、豬支原體肺炎）之一。

單獨(dú)感染圓環(huán)病毒病的致病機(jī)理：感染單核巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞，但不復(fù)制；引起T細(xì)胞免疫抑制；引起淋巴細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞數(shù)量的減少；在早期感染和高水平抗體感染時(shí)，引起Ⅲ型過敏反應(yīng)，導(dǎo)致皮炎和腎病，所以不建議在圓環(huán)病毒病感染早期使用干擾素。

研究發(fā)現(xiàn)炎癥是圓環(huán)病毒病的主要致病機(jī)制，可引起腎臟損害，造成細(xì)胞凋亡。

4.圓環(huán)病毒病的臨床癥狀類型。

豬感染PCV2b后通常有三種結(jié)局：感染豬體內(nèi)的病毒被抗體綜合，形成陰性豬（這需要較高的抗體水平）；生產(chǎn)指標(biāo)下降；急性死亡。對(duì)于第一種結(jié)局需要有好的疫苗，但是還要有好的用法。

（1）PCV2b引起斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征：臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、消瘦、衰竭；病理變化是脾臟壞死、腹股溝或腸系膜淋巴結(jié)腫大是正常的2 ～3倍，肺間質(zhì)水腫（肺炎），心肌冠狀溝呈膠凍樣，相同日齡的豬生長速度不同，豬群整齊度差，脊椎明顯突出，生長停滯。

（2）PCV2b引起皮炎與腎病綜合征：皮炎本質(zhì)上是過敏反應(yīng)，說明曾經(jīng)感染過PCV2b；表現(xiàn)為患處呈紫色，與周圍正常皮膚的界限清楚；豬無癢感；與缺鋅、疥螨的區(qū)別是皮膚不逞油膩狀（干燥）；要注意與母豬鋅缺乏癥、滲出性皮炎、真菌性皮炎以及豬丹毒的鑒別診斷。

（3）PCV2b引起繁殖障礙：導(dǎo)致妊娠期早期流產(chǎn)。

（4）PCV2b引起先天性震顫：病毒見于神經(jīng)元的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，細(xì)胞核呈強(qiáng)陽性，少量的小膠質(zhì)細(xì)胞呈陽性。要注意與豬瘟的鑒別診斷。

（5）PCV2b引起腸炎：診斷依據(jù)為免疫組化法；腹瀉糞便中用PCR檢測(cè)病毒；仔豬用抗體合格血清治療；母豬免疫豬圓環(huán)病毒疫苗。

（6）PCV2b引起急性肺臟水腫：表現(xiàn)為肺臟實(shí)變、胸腔積液、病豬忽然死亡。

5.圓環(huán)病毒2型與其他病原的混合感染。藍(lán)耳病病毒感染促進(jìn)圓環(huán)病毒在體內(nèi)的增殖和分布；圓環(huán)病毒感染會(huì)降低藍(lán)耳病滅活病毒疫苗的功效；圓環(huán)病毒感染會(huì)降低減毒豬瘟疫苗的功效；圓環(huán)病毒感染會(huì)影響偽狂犬病活疫苗的再次免疫應(yīng)答。

四、圓環(huán)病毒疫苗研究及應(yīng)用

1.疫苗研究。滅活疫苗：各國使用不同的病毒株，通過轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)制備免疫原。特別是懸浮培養(yǎng)圓環(huán)病毒生產(chǎn)線提升了終端產(chǎn)品的均一性，結(jié)合后期純化工藝，不但產(chǎn)品產(chǎn)量明顯提高，產(chǎn)品的質(zhì)量也活得了提高；生產(chǎn)疫苗所用的勞動(dòng)力和車間、水、電、原材料、能源等成本遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)工藝，綜合成本大大降低。

2.疫苗制備毒株的選擇。歐洲的流行毒株基因型已經(jīng)從PCV2a演變?yōu)镻CV2b；我國流行PCV2b基因型；在PCV2、藍(lán)耳病病毒和細(xì)小病毒混合感染的情況下，用PCV2b毒株制備的疫苗比用PCV2a制備疫苗，在用PCV2b或PCV2a/2b重組病毒攻擊方面，提供更為有效的保護(hù)力。

3.病毒的滅活方式。PCV2抵抗力強(qiáng)，傳統(tǒng)方法（甲醛）很難滅活，該試劑只能破壞病毒表面蛋白；作為免疫原，保持其空間構(gòu)像是關(guān)鍵之一，如大腸桿菌表達(dá)的ORF2蛋白，免疫后能產(chǎn)生抗體，但無綜合活性；BEI滅活劑的選擇，可破壞核酸，摧毀病毒復(fù)制能力，但是不破壞病毒的免疫源性蛋白。

4.疫苗實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)指標(biāo)。體溫反應(yīng)；病毒血癥（定性或定量）（臨床發(fā)病需要病毒量是107.0TCID50）；抗體水平（ELIS抗體1：320）；免疫后攻毒豬（肺臟和淋巴結(jié)）病毒變化和病毒分布。

5.疫苗臨床評(píng)價(jià)。提高保育豬或全過程的成活率；提高豬群整齊度；提高飼料報(bào)酬；降低其他疾病混合發(fā)生（治療費(fèi)用降低），生產(chǎn)成績（經(jīng)濟(jì)效益）提升。

6.豬圓環(huán)病毒疫苗評(píng)價(jià)依據(jù)。

疫苗毒株、抗原含量、抗原構(gòu)象、佐劑選擇、免疫時(shí)間、綜合效益。

7.豬圓環(huán)病毒疫苗不同免疫程序的優(yōu)缺點(diǎn)。母豬免疫：節(jié)省費(fèi)用，但是一定要先確定是否有繁殖障礙，此外，還要測(cè)定仔豬能否獲得均一的抗體水平；仔豬免疫：費(fèi)用相對(duì)高，工作量大，但仔豬群體免疫整齊；母豬與仔豬都免疫：效果最佳，但成本高，工作量大。

8.正確使用滅活疫苗。根據(jù)生產(chǎn)成績：保育階段成活率低于90%時(shí)；皮炎出現(xiàn)，預(yù)示保育階段感染；一定要樹立疫苗只起預(yù)防作用，不作為治療目的；在3～4周齡使用，可取得預(yù)期效果；干擾素對(duì)本疫苗沒有影響；要注意疫苗的保管，在注射前平衡到室溫，針頭消毒。

五、圓環(huán)病毒病防制措施

免疫預(yù)防是目前公認(rèn)的最適合預(yù)防措施；在防控該病同時(shí)還要控制繼發(fā)感染，主要是副豬嗜血桿菌病與鏈球菌的感染；建議同時(shí)免疫豬圓環(huán)病毒病和副豬嗜血桿菌病，解決保育豬殘次問題；加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，使用優(yōu)質(zhì)飼料（原料），堅(jiān)決不使用霉變飼料。

六、控制圓環(huán)病毒病仍需解決的科學(xué)問題

病毒與宿主免疫系統(tǒng)的相互作用；哪些風(fēng)險(xiǎn)因子是必須條件，兩者如何相互作用；區(qū)分滅活疫苗免疫和感染豬的方法；不同基因型之間的重組和新病毒的產(chǎn)生；混合感染及其防控。（本文根據(jù)錄音和資料整理，如有出入，最終解釋權(quán)歸其本人所有）