佟　欣　佟子林　趙法政

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江哈爾濱150040

中醫(yī)陰黃證動(dòng)物模型研究現(xiàn)狀及展望

佟欣佟子林趙法政

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江哈爾濱150040

中醫(yī)證候動(dòng)物模型的制備水平是制約中藥藥性合理評(píng)價(jià)的關(guān)鍵所在，其直接影響藥理活性結(jié)論的有效性。近年來(lái)，評(píng)價(jià)動(dòng)物疾病模型的指標(biāo)，僅停留在對(duì)靜態(tài)而單一的生化指標(biāo)的分析，這樣的動(dòng)物疾病模型，無(wú)法反映疾病對(duì)機(jī)體的整體影響和疾病發(fā)生、轉(zhuǎn)歸的動(dòng)態(tài)過(guò)程，更不能客觀地評(píng)價(jià)藥效和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。本文在對(duì)中醫(yī)陰黃證形成本質(zhì)考察的基礎(chǔ)上，從歷年實(shí)驗(yàn)研究和臨床實(shí)踐角度對(duì)已有中醫(yī)陰黃證動(dòng)物模型造模方法進(jìn)行總結(jié)，為完善中醫(yī)陰黃證動(dòng)物模型造模方法提供研究思路。

中醫(yī)陰黃證；動(dòng)物疾病模型；藥效

陰黃作為黃疸的一個(gè)證型，隋代巢元方在《諸病源候論》中最先提出“陰黃”這一概念。書(shū)中根據(jù)黃疸的臨床表現(xiàn)不同進(jìn)行分類。該書(shū)在對(duì)陰黃證癥狀進(jìn)行詳細(xì)描述的同時(shí)也闡述了其發(fā)病機(jī)制。陰黃證臨床主要表現(xiàn)為身目俱黃，頭痛而不發(fā)熱。疾病產(chǎn)生主要是由體內(nèi)陰氣盛而格陽(yáng)于外，又外感熱毒所致。陰黃概念的提出要追溯到宋代政和中敕編《圣濟(jì)總錄》。宋代韓祗和《傷寒微旨論》中首次提出陰黃的病名。通過(guò)對(duì)臨床治療病案的分析與總結(jié)首次討論了陰黃的辨證施治。至元代羅天益《衛(wèi)生寶鑒》、明張介賓《景岳全書(shū)》、清代醫(yī)家顧松園、葉桂、沈金鰲在對(duì)前人治療案例進(jìn)行總結(jié)的基礎(chǔ)上，詳盡地分析陰黃證的病因病機(jī)，并將辨證論治系統(tǒng)化，提出了治療的原則，對(duì)現(xiàn)代臨床上陰黃證的治療起到了重要的借鑒作用［1］。

1　歷代醫(yī)家對(duì)陰黃證病因病機(jī)的論述

1.1脾虛寒濕學(xué)說(shuō)

漢代醫(yī)家張仲景在其所著《傷寒論·辨陽(yáng)明病脈證并治》中論述：“傷寒發(fā)汗已，身目為黃，所以然者，以寒濕在里不解故也”。指出陰黃癥是由于寒濕在里不解的緣故?！杜R證指南醫(yī)案·蔣玉式按》中論述：“陰黃之作，濕從寒化，脾陽(yáng)不能化濕，膽液為濁所阻，漬于脾，浸淫肌肉，溢于皮膚，色如熏黃。陰主晦，治在脾”?！额愖C治裁·黃疸》論述：“陰黃系脾臟寒濕不運(yùn)，與膽液浸淫，外漬肌肉，則發(fā)而為黃”。指出陰黃發(fā)病是由于寒濕困脾，治療的重點(diǎn)應(yīng)是健脾運(yùn)濕。

1.2脾腎虧損學(xué)說(shuō)

張景岳在《景岳全書(shū)》中論述：“陰黃之病何以然也，蓋必以七情傷臟，或勞倦傷形，因致中氣大傷，脾不化血，故脾土之色，自見(jiàn)于外”。指出陰黃的發(fā)病是由于情志不遂，脾虛導(dǎo)致氣血生化無(wú)源，黃疸之色即脾土之色。張仲景在《金匱要略》中將由于脾腎虧虛所致的黃疸定義為黑疸。指出“色黑為勞”，“額上黑，微汗出，手足中熱，薄暮即發(fā)，膀胱急，小便自利?！缢疇畈恢巍?。宋代竇材在《扁鵲心書(shū)》中論述：“黑疸由于脾腎兩經(jīng)，縱酒貪色則傷腎，寒飲則傷脾”。明代李中梓、清代顧松園提出陰黃脾腎虛寒說(shuō)，如《醫(yī)宗必讀·黃疸》篇云：“亦有脾腎虛寒，脈沉而細(xì)，身冷自汗，瀉利溺白，此名陰黃”。從歷代醫(yī)家的論述中不難看出，陰黃的發(fā)病均涉及到脾腎兩臟氣血虧虛，屬于黃疸重癥，預(yù)后不佳。

2　近代醫(yī)家對(duì)陰黃病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)

潘雪飛等［2］認(rèn)為陰黃的病位在肝，肝膽血瘀是主要的病機(jī)，治黃重在養(yǎng)肝化癖。葉放［3］認(rèn)為陰黃是由于脾腎虛寒，寒凝血瘀，導(dǎo)致脈絡(luò)不利，郁而發(fā)黃。郭華麗［4］指出陰黃的發(fā)病主要原因是脾臟受損，從而導(dǎo)致寒濕不能運(yùn)化，脾為后天之本，運(yùn)化無(wú)源累及先天之本，腎陽(yáng)的溫煦功能受損，不能有效的助肝陽(yáng)運(yùn)化寒濕，肝失疏泄，寒凝血瘀，膽汁淤積，逆于肌膚而發(fā)黃。黃疸日久，遷延不愈，濕熱之毒蘊(yùn)于體內(nèi)，瘀血阻滯，則兩目黃而發(fā)黑，是陰黃血癖證表現(xiàn)［5］。潘學(xué)柱［6］指出：陰黃的主要病位在肝，肝陽(yáng)虛損，寒凝肝脈是主要的病因病機(jī)，治療應(yīng)當(dāng)立足于振奮肝陽(yáng)，促進(jìn)膽汁的疏泄。潘雪飛等［7］認(rèn)為肝氣虛是陰黃發(fā)病的主要原因。肝主疏泄，使人體氣血得以布達(dá)周身，肝氣受損，肝陽(yáng)不得伸展，膽汁失于溫煦，淤積外溢，而導(dǎo)致肌膚發(fā)黃。肝氣虛損，不耐疲勞，而出現(xiàn)四肢倦怠乏力。陽(yáng)虛陰盛，產(chǎn)生兩脅脹滿，筋脈拘急，四肢厥冷的癥狀。陰黃證的發(fā)病與脾胃肝膽密切相關(guān)。肝體陰而用陽(yáng)，脾胃虛寒導(dǎo)致濕邪內(nèi)停，脾土侮木影響及肝，導(dǎo)致肝體虛損，膽汁疏泄不利，郁久發(fā)黃。

韓秀珍等［8］在臨床治療中發(fā)現(xiàn)，陰黃證多是由于在肝病的治療中久服寒涼、瀉下藥物引發(fā)，或是由于采用西醫(yī)的方法辨病不辨證所致，或是由其他疾病日久誤治發(fā)展而來(lái)。如臨床治療久治不愈的各種胃炎、胃潰瘍、胃腸炎、膽囊炎等疾病。唐玉廷［9］認(rèn)為素體陽(yáng)虛，脾陽(yáng)不足是發(fā)病的內(nèi)在原因。關(guān)幼波［10］認(rèn)為：陰黃的發(fā)病主要有三種情況：①患者正氣尚可，由于感受寒濕之邪，寒濕困脾所致，屬于陰黃輕癥；②由于患者脾陽(yáng)素虛，濕從寒化，困阻中焦；③由于誤治、施治，陽(yáng)黃日久轉(zhuǎn)為陰黃。吳定文［11］亦認(rèn)為，素體陽(yáng)虛是陰黃發(fā)病的根本，感受寒濕外邪是發(fā)病的重要條件，導(dǎo)致濕從寒化，膽汁排泄不利，浸淫肌膚發(fā)為陰黃。

3　陰黃證動(dòng)物模型的復(fù)制研究

近年來(lái)復(fù)制的中醫(yī)證候動(dòng)物模型多是采用化學(xué)的方法，使動(dòng)物的某些組織或器官產(chǎn)生功能損害或改變，從而模擬人體的疾病或臨床證候。張赤志等［12］采取實(shí)驗(yàn)大鼠大黃灌胃18 d，于第19天給予α-萘異硫氰酸酯（ANIT）的方法復(fù)制陰黃證動(dòng)物模型，并用茵陳術(shù)附湯以方測(cè)證。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)陰黃模型組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、總膽汁酸、總膽紅素均較正常對(duì)照組明顯增高（P＜0.05），經(jīng)茵陳附術(shù)湯治療后，谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、總膽汁酸、總膽紅素均較陰黃模型組明顯下降（P＜0.05），結(jié)果表明采用大黃與α-萘異硫氰酸酯（ANIT）的方法復(fù)制的陰黃證動(dòng)物模型具備脾胃虛寒、免疫力低下的特點(diǎn)，并且持續(xù)高膽紅素血癥。盧家兵等［13］采用大黃聯(lián)合α-萘異硫氰酸酯（ANIT）的方法復(fù)制陰黃證動(dòng)物模型，實(shí)驗(yàn)研究表明陰黃證模型大鼠外周血淋巴細(xì)胞存在凋亡情況，陰黃證免疫功能低下可能與免疫細(xì)胞凋亡有關(guān)。曲長(zhǎng)江等［14］按照傳統(tǒng)中醫(yī)病因病機(jī)的理論，建立病證結(jié)合的陰黃證動(dòng)物模型，并用中藥復(fù)方茵陳術(shù)附湯以方測(cè)證，對(duì)陰黃證動(dòng)物模型進(jìn)行病因病機(jī)、證候、臨床生化指標(biāo)的觀察和評(píng)價(jià)。佟欣等［15］從陰黃形成的病因病機(jī)入手，復(fù)制病癥結(jié)合的陰黃證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。采用大黃、乙醇、α-異硫氰酸萘酯三因素復(fù)合誘導(dǎo)，造成陰黃證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，并用治療陰黃證的經(jīng)典方劑茵陳四逆湯治療進(jìn)行反證，證明該模型成立。實(shí)驗(yàn)表明，陰黃證大鼠出現(xiàn)活動(dòng)減少、倦臥、扎堆、進(jìn)食減少、條狀稀便等癥狀與臨床陰黃證患者相似［16］。同時(shí)其肝臟病理學(xué)及肝功能等客觀化指標(biāo)改變與陰黃證的臨床研究一致［17］。

4　總結(jié)與展望

盡管學(xué)者們對(duì)中醫(yī)陰黃證動(dòng)物模型的復(fù)制做了大量的工作，但由于模型復(fù)制的思路和方法存在問(wèn)題，因此不能有效地反映臨床上陰黃證的表現(xiàn)特征。中醫(yī)證候動(dòng)物模型是人類研究、開(kāi)發(fā)和利用中醫(yī)藥治療疾病的重要工具，建立中醫(yī)證候動(dòng)物模型的標(biāo)準(zhǔn)與方法體現(xiàn)著某種生命觀、疾病觀和方法論，是實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)。中醫(yī)藥學(xué)的研究應(yīng)當(dāng)突破引經(jīng)據(jù)典、臨床總結(jié)的固有模式，與實(shí)驗(yàn)科學(xué)相結(jié)合，探尋療效物質(zhì)基礎(chǔ)的證據(jù)，倫理學(xué)也不允許直接通過(guò)人體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，故動(dòng)物模型成為中醫(yī)藥基礎(chǔ)與臨床研究向現(xiàn)代化發(fā)展的橋梁。證候是中醫(yī)學(xué)診斷治療的基礎(chǔ)與依據(jù)，證候的研究是中醫(yī)理論和臨床研究的核心，制備符合中醫(yī)證候特點(diǎn)的動(dòng)物模型是實(shí)現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵。評(píng)價(jià)動(dòng)物疾病模型的指標(biāo)，僅停留在對(duì)靜態(tài)而單一的生化指標(biāo)的分析，這樣的動(dòng)物疾病模型，無(wú)法反映疾病對(duì)機(jī)體的整體影響和疾病發(fā)生、轉(zhuǎn)歸的動(dòng)態(tài)過(guò)程，更不能客觀地評(píng)價(jià)藥效和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。此外，在對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)選取的生化指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)不統(tǒng)一，為多種疾病的共有指標(biāo)，缺乏特異性，檢測(cè)靈敏度低，對(duì)致病程度低的模型，得不到陽(yáng)性結(jié)果，難以評(píng)價(jià)模型的優(yōu)劣。因此，證候動(dòng)物模型的造模方法、評(píng)價(jià)指標(biāo)、可重復(fù)性等諸多問(wèn)題，成為制約中醫(yī)藥發(fā)展的瓶頸。

中醫(yī)證候動(dòng)物模型的復(fù)制應(yīng)該從疾病產(chǎn)生的原因、臨床發(fā)病的癥狀和有效經(jīng)典方劑治療的角度思考［18］。從中醫(yī)陰黃證的病因可以對(duì)造模因素進(jìn)行選取，如脾臟陽(yáng)虛、終日縱酒、飲食不節(jié)。臨床發(fā)病的癥狀即指四診信息，成功的動(dòng)物模型應(yīng)有畏寒、便溏的脾臟陽(yáng)虛癥狀和由于膽汁淤積而表現(xiàn)出的身黃、目黃、小便黃。能夠?qū)δＰ腕w表特征所反映的病理機(jī)制進(jìn)行概括，如脾臟寒濕不運(yùn)，與膽液浸淫，外漬肌肉，則發(fā)而為黃。臨床經(jīng)典方劑的選取是根據(jù)中醫(yī)理論體系中“有是證，用是方”演繹，“是方”必然對(duì)應(yīng)著“是證”，依據(jù)“以方驗(yàn)證“的共識(shí)，若是“是方”對(duì)“某證（對(duì)于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)而言就是某種藥理動(dòng)物模型）”有效，則“某證”就是“是方”對(duì)應(yīng)的是證。同時(shí)，應(yīng)充分利用基因組學(xué)、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)等先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)，作為中醫(yī)證候動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)方法，從整體觀出發(fā)，選取能夠客觀評(píng)價(jià)動(dòng)物疾病模型的有效動(dòng)態(tài)指標(biāo)。

［1］姚惠萍，劉慶幫.略論陰黃理論的形成［J］.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，19（1）：11-13.

［2］潘雪飛，張長(zhǎng)法，邱蔚蔚，等.養(yǎng)肝化癖退黃法對(duì)陰黃患者HA、LN的影響［J］.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，1997，3（4）：209-210.

［3］葉放.溫通湯治療陰黃證36例臨床小結(jié)［J］.江蘇中醫(yī)，1996，17（12）：7-8.

［4］郭華麗，陳犁.辨證分析治療陰黃證60例［J］.山西中醫(yī)，1997，13（5）：19-20.

［5］張赤志，陸定波.陰黃辨證探源［J］.湖北中醫(yī)雜志，1996，18（6）：17-18.

［6］潘學(xué)柱.“寒滯肝脈”、“陰黃”病機(jī)辨析［J］.甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1994，11（2）：9-10.

［7］潘雪飛，張長(zhǎng)法.陰黃辨治方法的研究［J］.中國(guó)中醫(yī)藥信息，1998，5（10）：8-9.

［8］韓秀珍，王玉祥.陰黃病因探析［J］.陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，22（4）：22-23.

［9］唐玉廷，李淑清.陰黃辨析及治療（附104例臨床資料分析）［J］.實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合雜志，1998，11（9）：535-836.

［10］北京中醫(yī)醫(yī)院.北京中醫(yī)醫(yī)院關(guān)幼波臨床經(jīng)驗(yàn)選［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1976：18-19.

［11］吳立文.陰黃證治探討［J］.浙江中醫(yī)雜志，1985，（9）：411-412.

［12］張赤志，曾浩，程良斌.陰黃證動(dòng)物模型的建立及其意義［J］.中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2000，6（7）：43-44.

［13］盧家兵，張赤志，晏雪生.陰黃證外周血淋巴細(xì)胞凋亡及基因調(diào)控的研究［J］.中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2002，12（3）：150-152.

［14］曲長(zhǎng)江，楊雪山.茵陳術(shù)附湯對(duì)陰黃證黃疸動(dòng)物模型β-葡萄糖醛酸酶含量UDPGT活性的影響［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2007，34（5）：688-689.

［15］佟欣，王喜軍，孫暉.茵陳四逆湯對(duì)陰黃證模型大鼠的治療作用研究［J］.世界科學(xué)技術(shù)（中醫(yī)藥現(xiàn)代化），2011，13（1）：87-92.

［16］段富津.方劑學(xué)［M］.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2000：242.

［17］潘雪飛，張長(zhǎng)法，邱蔚蔚，等.陰黃形成機(jī)制的研究［J］.中醫(yī)雜志，1997，（9）：560.

［18］田金洲，王永炎，時(shí)晶，等.證候模型研究的思路［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，11（28）：18-21.

Research status and prospect of the traditional Chinese medicine jaundice of Yin-huang animal model

TONG XinTONG ZilinZHAO Fazheng
Heilongjiang University of Chinese Medicine，Heilongjiang Province，Harbin150040，China

The level of TCM syndrome model preparation is the crux for rational evaluation of TCM drug's quality，which directly influences the reliability of the conclusion derived from pharmacological researches.The presented characteristics of the established model are always neglected because the evaluating parameters are often selected from one or more enzymologic indexes associated with hepatocyte injury，and the detecting methods are mainly adopted colorimetric methods，whose accuracy is restrained by the sensitivity and detectability of the instruments used.The evaluation indexes for these animal models were local pathologic injury，static level of index，micro-changes without presentative characteristics，etc.，which were greatly away from the TCM syndromes in humans with integral，dynamic，and could not evaluate the effectiveness and pharmacodynamic material basis objectively.This research could be helpful for screening out essential parts of Yin-huang Syndrome and developing more suitable remedies for clinical application and offer a new theoretical method for the replication of syndrome animal model.

TCM jaundice of Yin-huang；Animal model；Pesticide effect

R256.41

A

1673-7210（2015）05（c）-0043-03

2015-01-28本文編輯：任念）

黑龍江省青年科學(xué)基金項(xiàng)目（QC2012C095）；黑龍江省博士后資助經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目（LBH-Z11013）；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)校科研基金資助項(xiàng)目（201110）；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)“優(yōu)秀創(chuàng)新人才支持計(jì)劃”科研項(xiàng)目。

佟欣（1980.3-），女，博士，副教授；研究方向：社會(huì)醫(yī)學(xué)。

趙法政（1978.11-），男，碩士；研究方向：心身疾病的防控機(jī)制。