沈江濤 陳黎

微柱凝膠法測ABO血型正反定型不符原因分析

沈江濤 陳黎

目的 探討微柱凝膠法測ABO血型正反定型不符原因及處理措施。方法 通過對住院與門診患者3000例進(jìn)行ABO血型血清學(xué)檢測，發(fā)生正反定型不符標(biāo)本18例患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果 正反定型不符標(biāo)本18例，其中自身因素占27.78%，治療因素所占比例為22.22%，疾病因素占44.44%。結(jié)論 微柱凝膠法為血型檢測的重要方法，鹽水凝集試管法為傳統(tǒng)的血型檢測方法，兩種方法聯(lián)合使用可提高疑難血型鑒別的準(zhǔn)確性。

微柱凝膠法；ABO血型；正反定型不符；分析

ABO血型同臨床輸血密不可分，準(zhǔn)確鑒定血型是保證輸血安全的關(guān)鍵，選擇一種準(zhǔn)確度高、靈敏度高和操作簡便的方法檢測血型具有重要的臨床意義。微柱凝膠法為傳統(tǒng)血型血清基礎(chǔ)發(fā)展的免疫學(xué)檢測技術(shù)，通過特異免疫反應(yīng)、分子篩技術(shù)及離心技術(shù)，將血型同血清與微柱凝膠有機(jī)結(jié)合，可檢測出微弱血型抗原抗體，但某些特殊情況可出現(xiàn)正反定型不一致情況[1]。應(yīng)用微柱凝膠法在ABO血型鑒定過程中，會出現(xiàn)抗原減弱、個(gè)體疾病、ABO亞型等影響，引發(fā)血型正反定型不符情況，若血型定型失誤，可能引發(fā)溶血性輸血反應(yīng)，嚴(yán)重甚至威脅患者生命安全[2]。本文通過對住院與門診患者3000例標(biāo)本進(jìn)行ABO血型血清學(xué)檢測，討論微柱凝膠法測ABO血型正反定型不符原因及應(yīng)對措施，現(xiàn)分析報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 泰州市第二人民醫(yī)院2013年1月～2014年10月住院與門診患者3000例標(biāo)本進(jìn)行ABO血型血清學(xué)檢測，發(fā)現(xiàn)正反定型不符標(biāo)本18例，男11例，女7例，年齡1～73歲，平均年齡（36.74±4.65）歲。

1.2 試劑與儀器 抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)；反定型紅細(xì)胞，抗A 1、A 1紅細(xì)胞，A 2紅細(xì)胞，譜細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)；ABO、RhD血型定型檢測卡(長春博訊生物技術(shù)有限公司)；抗人球蛋白檢測卡(長春博訊生物技術(shù)有限公司)。孵育器和專用離心機(jī)為長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司產(chǎn)品。

1.3 方法 配血試驗(yàn)、抗體鑒定和正反定型參照臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程，血型檢測標(biāo)準(zhǔn)方法：應(yīng)用微柱凝膠法進(jìn)行正反定型鑒定，若正?？砂l(fā)血型報(bào)告，若出現(xiàn)正反定型不符、凝集減弱情況時(shí)，應(yīng)用10%紅細(xì)胞懸液、增加受檢者血清和血漿進(jìn)行鹽水凝集試管法，結(jié)合顯微鏡觀察結(jié)果，若不能得出結(jié)論，應(yīng)將標(biāo)本、試劑混合置于37℃水浴箱中孵育30 min，離心觀察。通過生理鹽水洗滌標(biāo)本3次后排除自身抗體影響。疑難血型鑒定后，同型獻(xiàn)血人員標(biāo)本應(yīng)采用交叉配血試驗(yàn)，若無主次側(cè)無溶血及凝集，可發(fā)血型報(bào)告。

2 結(jié)果

應(yīng)用微柱凝膠法檢測，出現(xiàn)ABO正反定型不一致結(jié)果共18例。見表1。

3 討論

ABO血型正反定型不符原因包括技術(shù)、管理問題，主要包括:標(biāo)本，試劑錯(cuò)誤，試劑污染，器材不清潔，離心不足或離心過量，漏加試劑，陽性反應(yīng)出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，結(jié)果記錄錯(cuò)誤，標(biāo)本紅細(xì)胞血清本身問題，發(fā)生ABO血型正反定型不符，不可按照ABO血型正定型或者反定型確定血型結(jié)果，可導(dǎo)致ABO血型判斷錯(cuò)誤，應(yīng)通過復(fù)查，檢查ABO血型正反定型不一致原因，保證ABO血型定型準(zhǔn)確[3]。紅細(xì)胞A、紅細(xì)胞B抗原弱化為ABO血型正反定型不一致的常見因素，抗原弱化可以為遺傳因素引發(fā)的弱表現(xiàn)型，同時(shí)可也以是獲得性，例如白血病患者N-乙酰半乳糖轉(zhuǎn)移酶或半乳糖酶受抑制可引發(fā)紅細(xì)胞A抗原、紅細(xì)胞B抗原發(fā)生弱化，通過結(jié)合臨床和血清學(xué)特點(diǎn)，準(zhǔn)確判定引發(fā)抗原弱化因素，正定型中升高1倍以上懸浮紅細(xì)胞，同時(shí)可通過吸收放散試驗(yàn)的方式進(jìn)行檢測[4]。

表1 18例ABO血型正反定型不符原因[n(%)]

ABO血型正反不符因素包括很多方面：（1）自身因素：①亞型：因紅細(xì)胞ABO抗原位點(diǎn)少，細(xì)胞正定型出現(xiàn)干擾引發(fā)定型困難，可選擇受檢者唾液檢測；②冷凝集素：自身冷抗體是影響ABO血型正反定型不符的常見原因。冷凝集素屬于IgM抗體，其多存在于自身及供者紅細(xì)胞中，發(fā)生全凝集情況。（2）治療因素：①造血干細(xì)胞移植：造血干細(xì)胞移植導(dǎo)致正反定型不符是因ABO異基因造血干細(xì)胞移植，鑒定發(fā)生混合凝集，臨床應(yīng)進(jìn)行追蹤；②消化道大出血：治療消化道大出血過程中應(yīng)用甘露醇、羥乙基淀粉等血漿擴(kuò)容基，導(dǎo)致紅細(xì)胞出現(xiàn)為串錢狀，影響結(jié)果。（3）疾病因素：①腸道G菌：腸道G菌感染可引起獲得性B抗原，應(yīng)用吸收試驗(yàn)檢測檢測抗B，并進(jìn)行臨床追蹤；②急性白血?。杭毙园籽』颊邔Π肴樘寝D(zhuǎn)移酶產(chǎn)生影響，使A抗原和B抗原弱化，在檢測過程中可增加紅細(xì)胞數(shù)量；③自身免疫溶血性貧血：發(fā)生自身免疫溶血性貧血，通過抗人球蛋白試驗(yàn)，自身抗體試驗(yàn)為陽性，間抗試驗(yàn)陽性；④多發(fā)性骨髓瘤：多發(fā)性骨髓瘤易引發(fā)非特異性凝集，影響判定結(jié)果。（4）人為因素：采錯(cuò)患者血樣導(dǎo)致標(biāo)本混淆或標(biāo)本離心不充分等。

微柱凝膠免疫檢測是指通過微柱腔凝膠介質(zhì)將紅細(xì)胞抗原抗體發(fā)生凝聚反應(yīng)，應(yīng)用分子篩技術(shù)、特異性免疫技術(shù)、離心技術(shù)原理，將血型血清和凝膠分子篩技術(shù)結(jié)合，其具有操作簡便、準(zhǔn)確度高、靈敏度高等特點(diǎn)，在臨床得到較為廣泛的應(yīng)用。微柱凝膠法具有較多優(yōu)點(diǎn)，但其本質(zhì)是由于克隆抗體同紅細(xì)胞凝集進(jìn)行檢測，抗原和抗體強(qiáng)弱變化、血液異常血清蛋白、自身冷抗體、新生兒未形成抗體、異基因造血干細(xì)胞移植均可對微柱凝膠法的測定血型結(jié)果產(chǎn)生影響，導(dǎo)致正反定型不一致，最終導(dǎo)致血型判定結(jié)果[5]。微柱凝膠卡若保存不當(dāng)，可導(dǎo)致管內(nèi)液體降低，患者血清抗體和紅細(xì)胞抗原均顯著下降，抗原和抗體搭橋不及時(shí)，引發(fā)假陽性。鹽水凝集試管可調(diào)節(jié)血清、血漿使用量和紅細(xì)胞濃度，此方法有效彌補(bǔ)微柱凝膠法的缺陷[6]。微柱凝膠法經(jīng)初次檢測發(fā)生正反定型不一致情況，通過提高受檢者紅細(xì)胞濃度或增加受檢者血清、血漿兩，改善抗原和抗體比例，調(diào)整至最合適比例，應(yīng)用鹽水凝集試管法，確定正確的血型，由此證明血型抗原、抗體僅為降低，并不是完全缺失。抗原、抗體減弱在影響微柱凝膠法對血型正確鑒定外，高冷凝集素也是影響血型鑒定的重要因素，高效價(jià)冷凝集速為患者體內(nèi)產(chǎn)生的抗自身紅細(xì)胞嗜異性冷抗體，此抗體屬于IgM類抗體，體外一定條件下或在室溫條件下其可同ABO系統(tǒng)紅細(xì)胞或自身紅細(xì)胞發(fā)生非特異性凝集反應(yīng)，在交叉配血、正反定型時(shí)出現(xiàn)全凝集現(xiàn)象，導(dǎo)致血型判斷錯(cuò)誤[7-8]。應(yīng)用37℃水浴箱和生理鹽水洗滌，將微柱凝膠法同鹽水凝集法結(jié)合，保證判斷的準(zhǔn)確性。

本研究顯示，應(yīng)用微柱凝膠法檢測ABO血型，出現(xiàn)配血不合共18例，其中正反定型不符標(biāo)本18例，其中自身因素占27.78%，治療因素所占比例為22.22%，疾病因素占44.44%,人為因素占5.56%。綜上所述，微柱凝膠法為血型檢測的重要方法，具有優(yōu)點(diǎn)和不可取代性，鹽水凝集試管法為傳統(tǒng)的血型檢測方法，兩者聯(lián)合使用取長補(bǔ)短，提高疑難血型鑒別的準(zhǔn)確性，在臨床檢查過程中，遇到正反定型不符合情況應(yīng)查明原因做出正確的分析。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2015.36.030

江蘇 225500 泰州市第二人民醫(yī)院輸血科 （沈江濤 陳黎）