俞佳慧浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院，浙江杭州　310052

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杭州市蕭山區(qū)2013
—2015年手足口病病原譜分析

俞佳慧
浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院，浙江杭州310052

[摘要]目的了解2013—2015年杭州市蕭山區(qū)手足口病的病原體型別及分布特征，為進(jìn)一步掌握疫情動(dòng)態(tài)提供依據(jù)。方法采用實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）方法對(duì)轄區(qū)內(nèi)232例手足口病臨床診斷病例標(biāo)本進(jìn)行病原體檢測(cè)，并結(jié)合患兒臨床資料分析檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果232份標(biāo)本中共檢出腸道病毒（EV）陽(yáng)性結(jié)果150份，陽(yáng)性率為64.66%；其中腸道病毒71（EV71）陽(yáng)性結(jié)果32份，柯薩奇病毒A組16型 （CoxA16）陽(yáng)性結(jié)果26份，分別占EV陽(yáng)性標(biāo)本的21.33%、17.33%；非典型腸道病毒陽(yáng)性結(jié)果92份，所占比例為61.33%，已占據(jù)主導(dǎo)地位；5歲及其以下兒童EV感染占所有感染者的98.00%；不同性別患兒EV、EV71和CoxA16陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；患兒的主要臨床癥狀是發(fā)熱伴隨皰疹。結(jié)論引起蕭山區(qū)手足口病的病原譜出現(xiàn)較為明顯的變化，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)非典型腸道病毒的監(jiān)測(cè)。5歲及其以下兒童是EV感染的高危人群，需要加強(qiáng)對(duì)該類人群的防控力度，做到早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早治療。

[關(guān)鍵詞]手足口??；腸道病毒7l型；柯薩奇病毒A16型

手足口?。╤and,footandmouth disease,HFMD）是由多種腸道病毒（EV）引起的，以發(fā)熱和手、足、皮膚和口腔黏膜皰疹為主要癥狀的小兒急性傳染病，是我國(guó)法定報(bào)告管理的丙類傳染病，多發(fā)生于學(xué)齡前兒童。引起手足口病的病原體中，以腸道病毒71型（Enterovirus71,EV71）和柯薩奇病毒A組16型（Coxsackievirus A16,CoxA16）最為常見，兩者常相伴引起手足口病的暴發(fā)和流行[1]。2012年以來(lái)，柯薩奇病毒A組6型（Coxsackievirus A6，Cox-A6）逐漸成為中國(guó)手足口病的重要病原，其曾在歐洲和東南亞等世界多地引起過(guò)暴發(fā)流行[2]。大多數(shù)患兒癥狀輕微，少數(shù)患兒可出現(xiàn)無(wú)菌性腦膜炎、腦炎、急性弛緩性麻痹、神經(jīng)源性肺水腫和心肌炎等，個(gè)別重癥患兒病情進(jìn)展快，可導(dǎo)致死亡[3]。2009年衛(wèi)生部進(jìn)一步要求加強(qiáng)手足口病病原學(xué)監(jiān)測(cè)。為了解杭州市蕭山區(qū)手足口病的病原譜分布特征，對(duì)2013—2015年轄區(qū)內(nèi)采集的232例手足口病臨床診斷標(biāo)本進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)分析，為進(jìn)一步掌握疫情動(dòng)態(tài)提供科學(xué)依據(jù)。報(bào)道如下。

表1　2013—2015年不同年份腸道病毒檢測(cè)結(jié)果分析

1　資料與方法

1.1一般資料

采集患者3～5 d內(nèi)糞便標(biāo)本、肛拭子或咽拭子標(biāo)本，將標(biāo)本或拭子放入裝有3 ML病毒保存液的采樣管中，4℃保存待檢。2013—2015年共收集轄區(qū)腸道門診手足口病臨床診斷病例標(biāo)本232份，診斷依據(jù)依照《手足口病診療指南（2010版）》執(zhí)行。

1.2主要試劑和儀器

腸道病毒通用型（EV）/腸道病毒71型（EV71）/柯薩奇病毒16型（CA16）核酸測(cè)定試劑盒，QIAGEN RNeasy Mini Kit核酸提取試劑盒，以上試劑均在有效期內(nèi)使用；ABI7500熒光定量PCR儀，Centrifuge 5415D高速離心機(jī)。

1.3方法

病毒RNA提取按照QIAGEN RNeasy Mini Kit核酸提取試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，-40℃保存?zhèn)溆?；?shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)按照之江核酸測(cè)定試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行擴(kuò)增循環(huán)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。

1.4統(tǒng)計(jì)方法

檢測(cè)結(jié)果錄入Excel 2007進(jìn)行整理，采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用X2檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.1手足口病病原體檢測(cè)結(jié)果分析

2013—2015年采集的232例臨床診斷病例標(biāo)本中共檢出150例EV陽(yáng)性結(jié)果，總體陽(yáng)性率為64.66%（150/232），不同年份間手足口病陽(yáng)性檢出率依次為73.68%（56/76）、60.23%（53/88）、60.29%（41/68）。其中EV71陽(yáng)性結(jié)果32例，CoxA16陽(yáng)性結(jié)果26例，其他非典型（即非EV71和非CoxA16）腸道病毒陽(yáng)性病例92例，分別占EV陽(yáng)性病例的21.33%（32/150）、17.33%（26/150）、61.33%（92/150），結(jié)果見表1。2013—2015年EV陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；EV71、CoxA16與非典型腸道病毒陽(yáng)性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。從連續(xù)3年的檢測(cè)情況分析，蕭山區(qū)手足口病病原譜主要以非典型腸道病毒為主，EV71與CoxA16已經(jīng)不占據(jù)主導(dǎo)地位；EV71的檢出率呈下降趨勢(shì)，CoxA16的檢出率有高有低，非典型腸道病毒的檢出率呈升高趨勢(shì)。

2.2手足口病病原體檢測(cè)結(jié)果的年齡分布分析

232例手足口病臨床診斷病例中，EV陽(yáng)性病例的最小年齡為出生4個(gè)月，最大為14歲，將所有病例按照年齡分為8個(gè)組。5歲及其以下兒童為手足口病的高危人群，占EV陽(yáng)性病例總數(shù)的98.00%（147/150），見表2。

表2　手足口病病原體檢測(cè)結(jié)果的年齡分布

2.3手足口病病原體檢測(cè)結(jié)果的性別比例分析

150例EV陽(yáng)性結(jié)果中，男性患兒EV陽(yáng)性檢出率為63.33%（95/150），女性患兒EV陽(yáng)性檢出率為36.37%（55/ 150），男女比例為1.73∶1，結(jié)果顯示不同性別間手足口病的EV陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果見表3。

表3　手足口病病原體檢測(cè)結(jié)果的性別分布

2.4不同臨床癥狀患兒病原體檢測(cè)結(jié)果分析

232例手足口病臨床診斷病例中，多數(shù)患兒出現(xiàn)發(fā)熱癥狀，其中伴隨皰疹109例、伴隨嘔吐79例、伴隨精神異常31例，其他未發(fā)熱13例。由上可知，發(fā)熱伴隨皰疹是手足口病的主要表征。檢測(cè)確診率分別是發(fā)熱伴隨皰疹為76.15%（83/109）、發(fā)熱伴隨嘔吐為65.82%（52/79）、發(fā)熱伴隨精神異常為38.71%（12/31）、未發(fā)熱為23.08% （3/13），其中伴隨皰疹的確診率最高，結(jié)果見表4。

表4　手足口病不同臨床癥狀的檢測(cè)結(jié)果

3　討論

蕭山區(qū)2013—2015年連續(xù)3年的檢測(cè)結(jié)果顯示，232例手足口病臨床診斷病例的陽(yáng)性率為64.66%（150/ 232），EV71、CoxA16陽(yáng)性病例分別占EV陽(yáng)性病例的21.33%（32/150）、17.33%（26/150），還有61.33%（92/150）的病例由非典型（非EV71和非CoxA16）腸道病毒引起。蕭山區(qū)不同年份間手足口病陽(yáng)性檢出率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但是病原譜較以往已出現(xiàn)較為明顯的變化，優(yōu)勢(shì)病原體是非典型腸道病毒，檢出率在49.06%～70.73%之間變動(dòng)；由EV71與CoxA16感染引起手足口病比例差別不大，而且EV71的檢出率呈逐年下降趨勢(shì)，檢出率從26.79%降至12.20%，CoxA16的檢出率在7.14%～28.30%之間變動(dòng)。與CoxA16相比，EV71感染易導(dǎo)致手足口病重癥的發(fā)生，危險(xiǎn)因素較高。當(dāng)EV71成為某地區(qū)流行的優(yōu)勢(shì)病原體意味著該區(qū)域出現(xiàn)手足口病重癥病例的風(fēng)險(xiǎn)增高，目前蕭山區(qū)的重癥風(fēng)險(xiǎn)正處于降低階段。

通過(guò)對(duì)不同年齡、不同性別、不同癥狀患者的手足口病病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果分析，5歲及其以下兒童為手足口病的高危易感人群，占所有陽(yáng)性病例數(shù)的98.00%（147/150）。0～3歲往往是重癥病例發(fā)生的危險(xiǎn)年齡段，更加需要加大對(duì)該類人群的監(jiān)測(cè)力度，關(guān)注低齡兒童的疾病表征，做到早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早治療[4]。不同性別患者間陽(yáng)性檢出率無(wú)顯著差異，說(shuō)明手足口病普遍易感。統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)男性患兒發(fā)病率略高于女性患兒，這可能與男性患兒較女性更加活潑好動(dòng)有關(guān)?；顒?dòng)范圍與活動(dòng)強(qiáng)度的增大會(huì)明顯增加腸道病毒的暴露機(jī)會(huì)，感染幾率也隨之上升。手足口病的臨床診斷主要依賴臨床表征，該次研究對(duì)象中多數(shù)患兒表現(xiàn)發(fā)熱癥狀，其中近一半出現(xiàn)皰疹，說(shuō)明發(fā)熱伴隨皰疹是手足口病的主要表征，檢測(cè)確診率也高。

4　結(jié)語(yǔ)

綜上所述，手足口病嚴(yán)重影響嬰幼兒和兒童健康，目前尚無(wú)免疫預(yù)防措施和特效預(yù)防治療的藥物，容易引起聚集性疫情；手足口病的病原譜復(fù)雜多變，且該病原不同型別所致的手足口病在臨床上難以區(qū)別。因此，加強(qiáng)手足口病病原譜的綜合性動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，密切關(guān)注病原型別的構(gòu)成變化，及其可能發(fā)生的病毒變異與致病性的改變，及時(shí)準(zhǔn)確地對(duì)疫情進(jìn)行預(yù)警，對(duì)于及時(shí)、快速地治療和控制手足口病有著至關(guān)重要的作用。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Yang F,Zhang T,Hu Y,et al.Survey of enterovirus infections from hand,foot,and mouth disease outbreak in China, 2009[J].Virol J,2011（8）:508.

[2]Han JF,Xu S,Zhang Y,et al.Hand,foot,and mouth disease outbreak caused by Coxsackievirus A6,China,2013[J].JInfect, 2014,69(3):303-305.

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[4]呂華坤,繆梓萍,王笑笑,等.浙江省手足口病重癥危險(xiǎn)因素分析[J].疾病監(jiān)測(cè),2009,24(9):658-660.

[中圖分類號(hào)]R72

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1672-5654（2015）10（b）-0090-03

DOI：10.16659/j.cnki.1672-5654.2015.29.090

收稿日期：（2015-07-11）

[作者簡(jiǎn)介]俞佳慧（1984.6-），女，浙江杭州人，碩士研究生，兒科醫(yī)師，研究方向：兒童哮喘、寄生蟲感染等。

Analysis of Pathogen Spectrum of Hand,Foot and Mouth Disease in Xiaoshan District of Hangzhou from 2013 to 2015

YU Jia-hui
Department of Respiratory Medicine,The Children's Hospital of Zhejiang University School of Medicine，Hangzhou，Zhejiang Province，310052 China

[Abstract]Ob jective To understand etiological classification and distribution features of hand,foot and mouth disease (HFMD)in Xiaoshan district of Hangzhou,in order to provide the references for preventing and controlling the HFMD disease.Methods A total of 232 HFMD specimens confirmed by clinicalmeasureswere detected by using reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR),then analysis laboratory results combining with children's clinical data.Resu lts The 150 specimens were positive to enterovirus,and the positive rate was 65.59%.Furthermore,in the above results,there were 32 cases positive to enterovirus 71 and 26 cases positive to coxsackievirus A16,and the positive rates were 21.33%and 17.33%respectively.The positive rate of atypical enterovirus was 92 cases,dominated with 61.33%.Most of the HFMD patients were below the age of 5,which accounted for 98.00%to all the infectious patients.There was no statistical significance between genders in positive rates of enterovirus,enterovirus 71 and coxsackievirus A16(P＞0.05).Fever with herpes was the main clinical symptom in HFMD patients.Conclusion The pathogenic spectrum of HFMD in Xiaoshan was obviously changed,and themonitoring of atypical enterovirus should be strengthened.The children below the age of 5 were high risk group,needed to strengthen the supervision of this class of people,to achieve early detection,early isolation,early treatment.

[Key words]Hand-foot-mouth disease;Enterovirus 71;Coxsackievirus A16