顧愛(ài)國(guó)　潘虹　王莉

摘要[目的]建立呋蟲(chóng)胺·吡蚜酮制劑含量的高效液相色譜分析方法。[方法]以乙腈-水溶液作為流動(dòng)相，采用Agilent XDB C18 柱和二極管陣列檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定有效成分呋蟲(chóng)胺和吡蚜酮的含量。[結(jié)果]呋蟲(chóng)胺和吡蚜酮在100～500 mg/L濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)（r）分別為0.999 8和0.999 6；標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.045和0.063，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.11%和0.61%；平均回收率分別為99.79%和99.64%。[結(jié)論]試驗(yàn)建立的高效液相色譜方法操作簡(jiǎn)便，精密度與準(zhǔn)確度完全符合分析檢驗(yàn)要求，可同時(shí)快速測(cè)定呋蟲(chóng)胺和吡蚜酮含量。

關(guān)鍵詞呋蟲(chóng)胺；吡蚜酮；高效液相色譜法

中圖分類(lèi)號(hào)S482.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

A文章編號(hào)0517-6611（2015）07-094-02

呋蟲(chóng)胺·吡蚜酮可濕性粉劑是一種全新復(fù)配殺蟲(chóng)劑，廣譜、高效、低毒、內(nèi)吸活性強(qiáng)，持效期長(zhǎng)、增效效果顯著[1-2]；主要用于防治水稻稻飛虱等半翅目害蟲(chóng)，但有關(guān)呋蟲(chóng)胺·吡蚜酮復(fù)配制劑的高效液相色譜分析方法目前未見(jiàn)報(bào)道。為此，筆者以乙腈-水溶液為流動(dòng)相，采用Agilent XDB C18柱和紫外檢測(cè)器，建立了同時(shí)定量分析有效成分呋蟲(chóng)胺和吡蚜酮的液相色譜分析方法，旨在為相關(guān)部門(mén)監(jiān)測(cè)呋蟲(chóng)胺·吡蚜酮制劑含量提供參考。

1材料與方法

1.1材料

Agilent 1200 高效液相色譜儀：具二極管陣列檢測(cè)器和全自動(dòng)進(jìn)樣器、色譜工作站；乙腈為色譜純； Millipore 超純水制備系統(tǒng)；呋蟲(chóng)胺標(biāo)準(zhǔn)品（純度99.3%，國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)檢中心）、吡蚜酮標(biāo)準(zhǔn)品（純度99.5%，國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)檢中心）；50%呋蟲(chóng)胺·吡蚜酮可濕性粉劑試樣。

1.2色譜條件

Agilent XDB C18 不銹鋼柱：250.0 mm×4.6 mm（i.d），檢測(cè)波長(zhǎng)250 nm，流動(dòng)相為乙腈-水（10∶90，V/V），流速1.0 ml/min，進(jìn)樣量5 μl，柱溫25 ℃。保留時(shí)間：呋蟲(chóng)胺8.70 min，吡蚜酮13.73 min。典型液相色譜分別見(jiàn)圖1、圖2。

圖1呋蟲(chóng)胺·吡蚜酮標(biāo)樣液相色譜圖譜

圖2 呋蟲(chóng)胺·吡蚜酮可濕性粉劑液相色譜圖譜

1.3分析步驟

1.3.1標(biāo)樣溶液的配制。

稱(chēng)取呋蟲(chóng)胺標(biāo)樣0.040 g和吡蚜酮標(biāo)樣0.070 g （精確至0.000 2 g） 置于50 ml容量瓶中，用甲醇稀釋定容，超聲波振蕩5 min使標(biāo)樣溶解，冷卻至室溫，搖勻。吸取上述配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液5 ml，置于25 ml容量瓶中，用甲醇定容，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾后備用。

1.3.2試樣溶液的配制。

稱(chēng)取含呋蟲(chóng)胺0.040 g和吡蚜酮0.070 g的試樣（精確至0.000 2 g），置于50 ml容量瓶中，用甲醇稀釋定容，超聲波振蕩5 min使試樣溶解，冷卻至室溫，搖勻。吸取上述溶液5 ml，置于25 ml容量瓶中，用甲醇定容，搖勻，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾后備用。

1.3.3測(cè)定。在“1.2”色譜條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰兩針的響應(yīng)值相對(duì)變化小于1.5%時(shí)，按標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4計(jì)算。將測(cè)得的兩針試樣溶液及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中的呋蟲(chóng)胺（吡蚜酮）峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中呋蟲(chóng)胺（吡蚜酮）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（Xi）按下式進(jìn)行計(jì)算：

Xi=A2×m1×wA1×m2×100

式中，A1——標(biāo)準(zhǔn)溶液中呋蟲(chóng)胺（吡蚜酮）峰面積平均值；A2——試樣溶液中呋蟲(chóng)胺（吡蚜酮）峰面積平均值；

m1——標(biāo)樣溶液中呋蟲(chóng)胺（吡蚜酮）的質(zhì)量（g）；m2——試樣的質(zhì)量（g）；w——標(biāo)樣中呋蟲(chóng)胺（吡蚜酮）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）。

2結(jié)果與分析

2.1色譜分離條件的選擇

2.1.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇。

樣品為雙組分復(fù)配制劑，必須避開(kāi)低波長(zhǎng)時(shí)溶劑吸收的干擾，同時(shí)兼顧復(fù)配制劑各組分的有效分離及數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，因此，采用混配標(biāo)樣，利用色譜工作站數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)，采集波長(zhǎng)190～400 nm的各組分紫外光譜吸收曲線，反復(fù)試驗(yàn)，最終確定以250 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.1.2流動(dòng)相的選擇。

試驗(yàn)選擇250.0 mm×4.6 mm（i.d）Agilent XDB C18 不銹鋼柱，經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)，最終確定最優(yōu)化流動(dòng)相為乙腈-水（10∶90，V/V），流速為1.0 ml/min，實(shí)現(xiàn)了各組分的有效分離，且保留時(shí)間適中，是理想的分析呋蟲(chóng)胺·吡蚜酮復(fù)配制劑的分析方法。

2.2線性關(guān)系

配制一系列不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定。以呋蟲(chóng)胺（吡蚜酮）的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)作圖（圖3、圖4），得線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)：呋蟲(chóng)胺為y=1 577.2x+227 748，R=0.999 8；吡蚜酮為y=1 448.4x+383 791，R=0.999 6。結(jié)果表明呋蟲(chóng)胺和吡蚜酮在100～500 mg/L濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，具有較好的定量線性關(guān)系。

圖3呋蟲(chóng)胺線性曲線

圖4吡蚜酮線性曲線

2.3方法的精密度

采用呋蟲(chóng)胺和吡蚜酮可濕性粉劑3批次，進(jìn)行5次重復(fù)測(cè)定，考察定量分析方法的精密度。結(jié)果表明，呋蟲(chóng)胺和吡蚜酮的定量結(jié)果變異系數(shù)分別為0.11%和0.61%（表1），滿(mǎn)足樣品定量分析要求。

2.4方法的準(zhǔn)確度

在已知呋蟲(chóng)胺和吡蚜酮含量的可濕性粉劑中，各添加了4個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行添加回收率試驗(yàn)。結(jié)果表明，呋蟲(chóng)胺添加回收率在99.49%～100.21%，平均回收率為99.79%，吡蚜酮的添加回收率在99.23%～100.12%，平均回收率為99.64%（表2），方法準(zhǔn)確度較高，滿(mǎn)足定量分析要求。

表1精密度試驗(yàn)結(jié)果

樣品名稱(chēng)試樣批次含量∥%12345平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差∥%

呋蟲(chóng)胺 1 40.38040.32040.35040.29040.27040.320 0.0440.11

240.32040.25040.23040.34040.29040.290 0.046

340.48040.41040.39040.45040.37040.420 0.045

吡蚜酮 110.29010.34010.25010.21010.18010.250 0.0630.61

210.46010.37010.33010.43010.48010.410 0.063

310.45010.43010.31010.35010.33010.370 0.062

表2 回收率試驗(yàn)結(jié)果

序號(hào) 添加后含量∥mg

呋蟲(chóng)胺吡蚜酮實(shí)測(cè)量∥mg呋蟲(chóng)胺吡蚜酮

回收率∥%呋蟲(chóng)胺吡蚜酮

1 4.512 7.5304.489 7.472 99.49 99.23

2 5.531 8.5635.508 8.512 99.58 99.40

3 6.545 9.5946.537 9.574 99.88 99.79

4 7.563 10.5897.57910.602100.21 100.12

平均99.79 99.64

3結(jié)論

試驗(yàn)建立的高效液相色譜方法操作簡(jiǎn)便，精密度與準(zhǔn)確度完全符合分析檢驗(yàn)要求，可同時(shí)快速測(cè)定呋蟲(chóng)胺和吡蚜酮含量，廣泛適用于質(zhì)檢機(jī)構(gòu)與生產(chǎn)企業(yè)對(duì)呋蟲(chóng)胺·吡蚜酮復(fù)配制劑的質(zhì)量監(jiān)督與控制。

參考文獻(xiàn)

[1]

張亦冰. 新內(nèi)吸殺蟲(chóng)劑——呋蟲(chóng)胺[J].世界農(nóng)藥，2003，25（5）：46-47.

[2] 劉建華，張小峰，季美娟. 吡蚜酮原藥高效液相色譜分析[J].農(nóng)藥，2008，47（10）：741-742.