張 華， 李照偉， 李 濤， 王 慧， 尹 鑫， 王偉丞

(貴州省動物疫病預防控制中心，貴州貴陽550008)

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貴州省豬瘟血清學調查研究

張 華， 李照偉， 李 濤， 王 慧， 尹 鑫， 王偉丞

(貴州省動物疫病預防控制中心，貴州貴陽550008)

為了解2012—2014年貴州省豬瘟免疫防控情況，采用間接ELISA檢測方法，對隨機采集我省9個市(州)11 390個場點113 342份經(jīng)過豬瘟疫苗免疫后的豬血清樣品，進行豬瘟免疫抗體檢測。結果顯示，豬瘟免疫抗體平均合格率為80.92%； 2012—2014年豬瘟免疫抗體合格率分別為78.79%、 82.48%、 82.37%，連續(xù)3年均達到國家免疫合格標準70%以上，呈現(xiàn)穩(wěn)定的上升趨勢，且2013、 2014年樣品免疫抗體合格率顯著高于2012年；按照不同季度、不同場點、不同地區(qū)進行統(tǒng)計分析，檢測樣品豬瘟免疫抗體合格率也均達到70%以上。研究結果表明，貴州省近3年豬瘟免疫防控工作較為理想。

豬瘟；間接ELISA；血清學調查；貴州省

豬瘟(Clssical swine fever, CSF)是由黃病毒科，瘟病毒屬的豬瘟病毒(Clssical swine fever virus, CSFV)引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病[1]。該病在世界各國廣泛流行，是對養(yǎng)豬業(yè)危害嚴重的重要傳染病之一，造成了巨大的經(jīng)濟損失[2，3]。OIE將豬瘟列為必須通報的動物疫病，在我國也被列為一類動物疫病[4]。豬是該病唯一的自然宿主[1]?，F(xiàn)今集約化、規(guī)?；i飼養(yǎng)程度越來越高，大量引種、頻繁流通導致帶毒豬的存在和與其他豬病毒病混合感染的情況越來越嚴重，給豬瘟的免疫防控造成一些困難[5，6]。本調查旨在對2012—2014年連續(xù)3年采集豬瘟疫苗免疫后的豬血清樣品進行豬瘟免疫抗體檢測，通過不同年份、不同季度、不同場點以及不同地區(qū)樣品免疫抗體合格率的統(tǒng)計和比較，分析得出貴州省近3年豬瘟免疫預防的整體情況，從而系統(tǒng)全面地研判我省豬瘟的免疫防控工作是否有效，相應的免疫程序、技術措施是否合理，為今后更有針對性地防控豬瘟，以及對豬瘟免疫水平和免疫效果的評估提供科學的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品：2012—2014年間于豬瘟疫苗免疫后隨機采集豬血并及時分離血清，-20 ℃保存?zhèn)溆?。采集場點覆蓋全省9個市(州)，包括貴陽市、六盤水市、遵義市、安順市、銅仁市、畢節(jié)市、黔西南州、黔東南州和黔南州。

1.1.2 檢測試劑盒：豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒，購自武漢科前動物生物制品有限公司。

1.1.3 儀器設備：微量移液器、震蕩器、溫箱、酶標儀。

1.2 方法

1.2.1 血清樣品檢測方法：應用間接ELISA檢測法，嚴格按照檢測試劑盒內的說明書進行操作。通過配制洗滌液，稀釋樣品及陰陽性對照，設置陰性對照孔、陽性對照孔和待檢樣品孔，加樣，溫育，洗板，加酶標二抗，溫育，洗板，加酶結合底物，顯色，終止等操作，測定各孔的D630 nm值。

1.2.2 結果判定：在酶標儀上測各孔D630 nm值。試驗成立的條件是陽性對照孔平均D630 nm值≥0.6，陰性對照孔平均D630 nm值<0.3。樣品D630 nm值≥0.35，判為陽性；樣品D630 nm值<0.35，判為陰性。

2 結果

2.1 豬瘟免疫抗體總體檢測結果 2012—2014年于貴州省9個市(州)11 390個場點隨機采集113 342份豬血清樣品，進行豬瘟免疫抗體檢測。通過間接ELISA檢測方法，檢測出陽性血清91 719份，免疫合格率為80.92%(91 719/113 342)。見表1。

2.2 不同年份豬瘟免疫抗體檢測結果 由表1、圖1可看出，隨機檢測的113 342份豬血清樣品中，2012年檢測了46 582份，抗體合格率為78.79%(36 700/46 582)； 2013年檢測了28 136份，抗體合格率為82.48%(23 206/28 136)； 2012年檢測了38 624份，抗體合格率為82.37%(31 813/38 624)， 2013年和2014年的免疫抗體合格率均高于2012年。

通過卡方檢驗[7]，2013年的抗體合格率與2012年相比，以及2014年的抗體合格率與2012年相比，差異都是極顯著的。

表1 2012—2014年豬瘟樣品檢測情況

圖1 2012—2014年豬瘟樣品免疫合格率比較

2.3 不同季度豬瘟免疫抗體檢測結果 由表2、圖2可以看出，連續(xù)3年不同季度血清樣品的豬瘟免疫抗體合格率均達到了80%以上，其中第一季度的抗體合格率最高。

表2 2012—2014年不同季度豬瘟免疫抗體合格率 %

圖2 不同季度樣品豬瘟免疫抗體合格率比較

2012年4個季度的豬瘟免疫抗體合格率呈現(xiàn)明顯的下降趨勢，在第3、4季度下降到了80%以下； 2013年4個季度的豬瘟免疫抗體合格率則較平穩(wěn)，都保持在80%以上；而2014年4個季度的豬瘟免疫抗體合格率呈現(xiàn)先降后升的趨勢，總體也都保持在80%以上。

2.4 不同場點豬瘟免疫抗體檢測結果 由表3、圖3可看出，連續(xù)3年不同場點血清樣品豬瘟免疫抗體的合格率水平存在一定的差異，其抗體合格率由大到小依次為種豬場>商品代飼養(yǎng)場>散養(yǎng)戶>其他>交易市場，5個場點均達到70%以上免疫抗體水平，其中種豬場和商品代飼養(yǎng)場樣品的抗體合格率都達到了80%以上；連續(xù)3年中散養(yǎng)戶樣品的抗體合格率是逐年升高的。

圖3 不同場點樣品豬瘟免疫抗體合格率比較

表3 2012—2014年不同場點豬瘟免疫抗體合格率 %

2.5 不同地區(qū)豬瘟免疫抗體檢測結果 由表4、圖4可以看出，連續(xù)3年9個市(州)的血清樣品豬瘟免疫抗體合格率均達到了70%以上，其中7個市(州)的抗體合格率達到了80%以上；連續(xù)3年中六盤水市、銅仁市和畢節(jié)市的免疫抗體合格率都是逐年上升的。

表4 2012—2014年不同地區(qū)豬瘟免疫抗體合格率 %

圖4 不同地區(qū)樣品豬瘟免疫抗體合格率比較

3 討論

3.1 研究表明，2012—2014年于貴州省9個市(州)11 390個場點采集的113 342份豬血清樣品中，共檢出豬瘟免疫抗體陽性血清91 719份，免疫合格率為80.92%(91 719/113 342)。不同年份樣品的免疫合格率分別為78.79%、82.48%、82.37%，呈現(xiàn)上升且趨于穩(wěn)定的趨勢，2013年和2014年免疫合格率(80%以上)較2012年顯著上升，達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫抗體合格率 70%以上要求，這表明貴州省對于豬瘟的免疫預防是合理有效的，且免疫效果是顯著的。

3.2 對于不同季度樣品的調查發(fā)現(xiàn)，豬瘟免疫抗體合格率均達到80%以上，其中以第一季度的抗體合格率最高。在豬瘟高發(fā)的春秋季節(jié)，免疫抗體合格率都能保持在80%以上，這證明相應的豬瘟免疫程序和方法是行之有效的。

3.3 對于不同場點樣品的調查發(fā)現(xiàn)，豬瘟免疫抗體合格率均達到70%以上，抗體合格率依次為種豬場>商品代飼養(yǎng)場>散養(yǎng)戶>其他>交易市場，其中種豬場和商品代飼養(yǎng)場的抗體合格率達到了80%以上，這與其規(guī)范化的飼養(yǎng)管理、科學的免疫預防、系統(tǒng)的免疫監(jiān)測是密不可分的。與此同時，連續(xù)3年散養(yǎng)戶的樣品免疫抗體合格率逐年升高，這說明散養(yǎng)戶對于豬瘟免疫工作的重視程度在不斷增高，對于豬瘟免疫預防的意識在不斷加強。

3.4 對于不同地區(qū)樣品的調查發(fā)現(xiàn)，豬瘟免疫抗體合格率均達到70%以上，其中7個市(州)的抗體合格率達到80%以上，且連續(xù)3年六盤水市、銅仁市和畢節(jié)市的免疫抗體合格率都在逐年上升，這說明豬瘟免疫防控成效在我省是較普遍的。

3.5 目前，我國對豬瘟實施了強制免疫計劃[8]，由上述調查結果分析可知我省近幾年實施的豬瘟強制免疫措施是積極有效的，為進一步穩(wěn)定和提高豬瘟免疫抗體水平，應該在合理的免疫程序指導下，加強免疫抗體的監(jiān)測[9,10]，以此規(guī)劃免疫時間，并結合豬瘟病原學的檢測，雙重評價疫苗免疫效果。此外，還應注重豬瘟的綜合防控，加強種豬群凈化[11,12]，設置合理的飼養(yǎng)環(huán)境、飼養(yǎng)密度，定期清洗消毒，帶毒豬及時淘汰并無害化處理，向飼養(yǎng)管理人員普及相關知識等，尤其是散養(yǎng)戶應多借鑒規(guī)模化養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)、管理和免疫預防接種經(jīng)驗等[13]。這些都將為豬瘟從全面免疫、盲目免疫到重點免疫、針對性免疫打下基礎，對于預防控制該病具有重要意義。

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Serological Survey of Classic Swine Fever in Guizhou Province

Zhang Hua, Li Zhaowei, Li Tao, Wang Hui, Yin Xing, Wang Weicheng

(Animal Disease Prevention and Control Center in Guizhou Province，Guiyang Guizhou 550008，China)

To investigate the immune and prevention situation of classic swine fever in Guizhou province from 2012 to 2014, a total of 113 342 swab samples were collected from 11 390 sites in our 9 city (state). We detected the antibody of classic swine fever by indirect ELISA method. Results showed that the qualified rate of antibody was 80.92%, and the qualified rate from 2012 to 2014 respectively was 78.79%, 82.48% and 82.37%. Three consecutive years reached the national immunization standard, which also assumed ascending and stable trend. According to different seasons, different sites and different regions for statistical analysis, the qualified rate of the samples of classic swine fever antibody also reached more than 70%. These results suggested that the work of immunization prevention and control was ideal in our province in recent 3 years.

Clssical Swine Fever； ELISA； Serological Survey； Guizhou Province

2015-08-27

貴州省農(nóng)業(yè)攻關項目：貴州省主要人畜共患病綜合防控技術研究(黔科合NY字[2011]3061號)

張華(1969—)，男，高級獸醫(yī)師，貴州省動物疫病預防控制中心副主任。

S858.28

A

1007-1474(2015)06-0001-04