李瑩，席興軍，周曉晶，初僑，林楠，王尉，張經(jīng)華，

(1.北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院，北京 100124；2.北京市理化分析測(cè)試中心，有機(jī)材料檢測(cè)技術(shù)與質(zhì)量評(píng)價(jià)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100089； 3.中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院，北京 100191)

N-乙?；窠?jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制*

李瑩1，席興軍3，周曉晶2，初僑3，林楠2，王尉2，張經(jīng)華1，2

(1.北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院，北京 100124；2.北京市理化分析測(cè)試中心，有機(jī)材料檢測(cè)技術(shù)與質(zhì)量評(píng)價(jià)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100089； 3.中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院，北京 100191)

采用半制備液相色譜法制備N-乙?；窠?jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。分別以UV，IR，MS和NMR方法對(duì)N-乙酰基神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行定性分析，以高效液相色譜方法進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)和穩(wěn)定性檢驗(yàn)，經(jīng)F檢驗(yàn)表明在置信區(qū)間為95%的范圍內(nèi)測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定。與國(guó)內(nèi)8家資質(zhì)合格的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行聯(lián)合定值，計(jì)算出不確定度結(jié)果。N-乙?；窠?jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值結(jié)果為98.63%，置信水平為95%時(shí)的擴(kuò)展不確定度為0.098 6%(k=2)。該N-乙?；窠?jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可用于有關(guān)食品檢測(cè)方法的校正。

N-乙?；窠?jīng)氨酸；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；均勻性；穩(wěn)定性；不確定度

N-乙酰基神經(jīng)氨酸（N-acetylneuraminic acid，NANA，結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1）是唾液酸家族中最常見(jiàn)的一種［1］。

圖1 N-乙酰基神經(jīng)氨酸結(jié)構(gòu)式

唾液酸是一族神經(jīng)氨酸的氮或氧基取代的衍生物，是一個(gè)含有9個(gè)碳原子并具有吡喃糖結(jié)構(gòu)的酸性氨基糖，系統(tǒng)命名為5-氨基-3，5-二脫氧-D-甘油-D-半乳壬酮糖。5號(hào)碳上不同的連接基團(tuán)構(gòu)成了不同的唾液酸衍生物，最主要的兩種唾液酸為5-乙酰氨基-3，5-二脫氧-D-甘油-D-半乳壬酮糖（N-乙酰神經(jīng)氨酸）和3-脫氧-D-甘油-D-半乳壬酮糖（KDN），其它唾液酸均由這兩種衍生而成［2-5］。

唾液酸廣泛存在于動(dòng)物組織和體液中［6］，是糖蛋白、低聚糖和糖脂的重要成分。N-乙?；窠?jīng)氨酸能使唾液產(chǎn)生光滑的感覺(jué)，通過(guò)改變粘液的流體阻力充當(dāng)免疫調(diào)節(jié)劑，以及在大腦和神經(jīng)系統(tǒng)的產(chǎn)生和發(fā)育中發(fā)揮非常重要的作用［7］。此外，N-乙酰基神經(jīng)氨酸是一種天然的營(yíng)養(yǎng)成分，在燕窩［8-9］、鹿茸［10］、雞蛋［11-12］、奶粉［13-14］等食品中含量較高，且已經(jīng)作為一種營(yíng)養(yǎng)輔助劑加入到嬰幼兒配方奶粉中。經(jīng)查新，國(guó)內(nèi)外未發(fā)現(xiàn)N-乙酰基神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，為了滿足相關(guān)產(chǎn)品分析檢測(cè)、質(zhì)量控制工作的需求，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可比性和溯源性，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的國(guó)際發(fā)展趨勢(shì)［15］，筆者制備了N-乙?；窠?jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

半制備高效液相色譜系統(tǒng)：LC-6AD型，日本島津公司；

高效液相色譜儀：LC-20A型，日本島津公司；

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：EYELA-OSB-2100型，東京理化器械株式會(huì)社；

冷凍干燥機(jī)：ALPHR1-2 LD plus型，德國(guó)CHRIST公司；

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：UV-1800型，日本島津公司；

傅立葉變換紅外-近紅外光譜儀：Spectrum 400型，美國(guó)珀金-埃爾默公司；

核磁共振譜儀：Bruker 400 MHz，德國(guó)Bruker公司；

超高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜儀：UHR-TOFmaXis 4G型，德國(guó)Bruker公司；

甲醇：色譜純，美國(guó)Thermo Fisher公司；

超純水：默克密理博Milli-Q Integral 3純水機(jī)生產(chǎn)。

1.2 半制備色譜條件

色譜柱：SHIM-PACK PREP-ODS(H)·KIT柱（250 mm×20 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸(1∶9)；流量：7 mL/min；柱溫：30℃；運(yùn)行時(shí)間：11 min；檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品制備

取N-乙酰基神經(jīng)氨酸粗提品適量溶解于超純水溶劑中，充分溶解后經(jīng)半制備液相色譜系統(tǒng)分離純化，收集目標(biāo)峰餾分，進(jìn)行旋蒸后冷凍干燥，最終獲得純度大于98%的高純度化合物。經(jīng)定性分析后，分裝在干凈、干燥的2 mL棕色樣品瓶中，于4℃冷藏。

1.4 定性分析方法

經(jīng)紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜和核磁共振波譜分析，對(duì)N-乙酰基神經(jīng)氨酸進(jìn)行定性。

紫外光譜測(cè)定使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，以乙腈為背景溶劑，于0～400 nm下波長(zhǎng)掃描，得到紫外光譜圖。

紅外光譜測(cè)定使用傅立葉變換紅外-近紅外光譜儀，采用KBr壓片法得到紅外光譜圖。

質(zhì)譜測(cè)定使用超高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜儀，在正、負(fù)離子模式下測(cè)定，掃描范圍（m/z）：100～1 000。

核磁共振波譜測(cè)定使用400 MHz核磁共振譜儀，氘代試劑為DMSO-d6（含TMS），25℃條件下得到氫譜和碳譜。

1.5 純度定值分析方法

采用高效液相色譜技術(shù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度，并通過(guò)8家實(shí)驗(yàn)室協(xié)作對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行定值。從不同HPLC洗脫條件、不同色譜柱等多方面對(duì)所制備樣品的純度進(jìn)行定值。

1.5.1 不同色譜柱條件

采用兩根C18色譜柱Waters XTerraRP C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）和Waters Atlantis HILIC Silica柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），在相同的流動(dòng)相、不同流動(dòng)相配比的條件下測(cè)定N-乙?；窠?jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度。

（1）Waters XTerra RP C18柱的色譜條件

流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸(1∶9)，流量為1.0 mL/min；柱溫：30℃；運(yùn)行時(shí)間：20 min；檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm。

（2）Waters Atlantis HILIC Silica柱的色譜條件

流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸（95∶5），流量為1.0 mL/min；柱溫：25℃；運(yùn)行時(shí)間：20 min；檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm。

1.5.2 不同流動(dòng)相條件

流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸（8∶2）與乙腈-0.1%磷酸（95∶5），流量均為1.0 mL/min；柱溫：30℃；運(yùn)行時(shí)間：20 min；檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm。

1.5.3 定值色譜條件

色 譜 柱：Waters Atlantis HILIC Silica柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸（95∶5），流量為1 mL/min；柱溫：25℃；運(yùn)行時(shí)間：20 min；檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm。

此方法為最終定值確定方法，為了保證定值結(jié)果的準(zhǔn)確度，8家定值單位均采用此方法進(jìn)行定值。

2 結(jié)果與討論

2.1 定性分析

分別采用UV，IR，MS和NMR方法對(duì)N-乙?；窠?jīng)氨酸進(jìn)行定性。

UV（CH3OH）：波長(zhǎng)為203 nm，譜圖見(jiàn)圖2；MS：m/z310.1129［ M+H］+，譜圖見(jiàn)圖3；308.0992［M-H］+，譜圖見(jiàn)圖4。1HNMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ1.70(t，J=11.8 Hz，1H，3-H)，1.89(s，3H，12-H)，1.99(q，J=4.9 Hz，1H，3'-H)，3.18(d，J=1.0 Hz，1H，10-H)，3.29(dd，J=10.9 Hz，J=6.8 Hz，1H，15-H)，3.50(ddd，J=2.2 Hz，J=6.8 Hz，J=9.0 Hz，1H，14-H)，3.51(d，J=8.4 Hz，1H，1-H)，3.61(dd，J=10.9 Hz，J=2.2 Hz，1H，15'-H)，3.74(dd，J=10.6 Hz，J=1.0 Hz，1H，6-H)，3.83(dd，J=4.9 Hz，J=11.8 Hz，1H，2-H)，8.04(d，J=8.4 Hz，1H，9-H)譜圖見(jiàn)圖5；13CNMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ53.50，66.19，39.97，95.13，70.82，171.76，69.64，172.26，23.04，70.29，64.09，譜圖見(jiàn)圖6；IR(KBr壓片)波數(shù)(cm-1)：3 339(νN-H)，2 933 (ν-C-H)，1 722(νC=O)，1 654(νC=O酰 胺 )，1 122(νC-O-C)，1 024(νC-O)，譜圖見(jiàn)圖7。

圖2 紫外光譜圖

圖3 正離子模式質(zhì)譜圖

圖4 負(fù)離子模式質(zhì)譜圖

圖5 N-乙?；窠?jīng)氨酸核磁共振氫譜圖

圖6 N-乙?；窠?jīng)氨酸核磁共振碳譜圖

圖7 N-乙?；窠?jīng)氨酸紅外光譜圖

綜合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)及與數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)比［16］，確定本樣品為N-乙?；窠?jīng)氨酸。

2.2 定值方法

2.2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的確定

采用高效液相色譜配備檢測(cè)器為SPD-M20A二極管陣列檢測(cè)器，進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描后生成三維光譜圖見(jiàn)圖8，根據(jù)三維光譜圖確定N-乙酰基神經(jīng)氨酸的最佳吸收波長(zhǎng)。由圖8可知，N-乙酰基神經(jīng)氨酸的最佳檢測(cè)波長(zhǎng)為203 nm。

圖8 N-乙?；窠?jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)三維圖譜

2.2.2 色譜柱選擇

分 別 選 擇 Waters XTerra RP C18柱 (150 mm×4.6 mm，5 μm)和Waters Atlantis HILIC Silica柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)進(jìn)行比較，C18柱對(duì)N-乙?；窠?jīng)氨酸的保留效果較差，而HILIC Silica親水色譜柱對(duì)N-乙?；窠?jīng)氨酸的保留效果較好，最終選擇規(guī)格為150 mm的HILIC Silica色譜柱作為定量分析色譜柱。

2.2.3 流動(dòng)相選擇

選用甲醇-0.1%磷酸、乙腈-0.1%磷酸兩組流動(dòng)相進(jìn)行比較，試驗(yàn)結(jié)果表明，甲醇-0.1%磷酸流動(dòng)相對(duì)N-乙?；窠?jīng)氨酸的分離效果較差；乙腈-0.1%磷酸水流動(dòng)相的分離效果較好，峰型理想，故選擇乙腈-0.1%磷酸（95∶5）作為定值實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相。

2.2.4 檢測(cè)器比較

對(duì)島津蒸發(fā)光散射檢測(cè)器ELSD-LTⅡ和島津二極管陣列檢測(cè)器（DAD）進(jìn)行比較，結(jié)果表明，二極管陣列檢測(cè)器信號(hào)響應(yīng)較好，且為實(shí)驗(yàn)室常用檢測(cè)器，最終確定檢測(cè)器為二極管陣列檢測(cè)器。

2.3 均勻性檢驗(yàn)

根據(jù)JJG 1343-2012《 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值的通用原則及統(tǒng)計(jì)學(xué)原理的要求》［17］，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)。采用的是隨機(jī)順序重復(fù)測(cè)量的方法，從分裝后200瓶樣品中隨機(jī)抽取20瓶樣品。抽取的樣品瓶號(hào)按照正序、倒序、亂序的方式測(cè)量3次，結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

表1 N-乙?；窠?jīng)氨酸均勻性檢驗(yàn)的測(cè)量數(shù)據(jù)(n=3) %

表2 N-乙?；窠?jīng)氨酸均勻性研究方差分析結(jié)果

查F臨界值表，得F0.05(19，40)=2.03，計(jì)算得F=MS瓶間/MS瓶?jī)?nèi)=1.99＜F0.05(19，40)，表明本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是均勻的。

式中：n0=3。

瓶間標(biāo)準(zhǔn)偏差sbb是該方差的平方根：sbb=sA=0.015 5。

重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差sr由MS瓶?jī)?nèi)開(kāi)平方求得，sr=0.027。

2.4 穩(wěn)定性考察

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性考察按先密后疏的原則，分別在第0，1，3，6個(gè)月進(jìn)行穩(wěn)定性檢測(cè)。筆者以6個(gè)月為期，對(duì)制備的N-乙?；窠?jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在不同時(shí)間段條件下進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 N-乙酰基神經(jīng)氨酸穩(wěn)定性檢驗(yàn)結(jié)果

通過(guò)對(duì)表3數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，采用直線作為經(jīng)驗(yàn)?zāi)Ｐ停^察斜率值是否有顯著變化，以此對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性變化進(jìn)行預(yù)測(cè)。斜率β1按式(2)計(jì)算：

式中：β1——回歸系數(shù)，即直線斜率；

xi——第i個(gè)時(shí)間點(diǎn)；

yi——第i個(gè)時(shí)間點(diǎn)的檢測(cè)值；

n——穩(wěn)定性測(cè)量次數(shù)，n=8。

直線上某點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)偏差：

與斜率相關(guān)的不確定度s(β1)：

自由度為n-2，P=0.95(95%置信水平)的分布因子t=2.441，由于|β1|＜t0.95，n-2·s(β1)，故斜率是不顯著的，因而未觀測(cè)到該樣品的不穩(wěn)定性。6個(gè)月(T=6)的長(zhǎng)期穩(wěn)定性的不確定度：us=s(β1)·T=0.034 7%。

上述結(jié)果表明N-乙酰基神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在6個(gè)月內(nèi)未觀測(cè)到明顯的不穩(wěn)定性。更長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定期將根據(jù)持續(xù)不斷的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行確定。

2.5 定值結(jié)果

本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值按照J(rèn)JG 1343-2012 標(biāo)準(zhǔn)要求，通過(guò)多個(gè)實(shí)驗(yàn)室協(xié)作實(shí)驗(yàn)定值，參加定值的實(shí)驗(yàn)室有8家，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定2個(gè)單元，每個(gè)單元測(cè)量3次，提供6次獨(dú)立重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)。所有實(shí)驗(yàn)室選擇方法是經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)總結(jié)的方法，且各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)方法一致。定值數(shù)據(jù)及其方差分析結(jié)果分別見(jiàn)表4、表5。

表4 N-乙?；窠?jīng)氨酸HPLC純度定值結(jié)果 %

式中：sL2——每次測(cè)量瓶?jī)?nèi)方差，；

m——參加實(shí)驗(yàn)室數(shù)目；

sr2——m次測(cè)量瓶間方差，sr2=s22；

n——定值實(shí)驗(yàn)室測(cè)量結(jié)果數(shù)目。

2.6 不確定度評(píng)定結(jié)果

不確定度由三部分組成：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不均勻性引入的不確定度；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不穩(wěn)定性引入的不確定度；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值過(guò)程引入的不確定度。

均勻性引入的不確定度ubb=sbb=0.015 5%。

穩(wěn)定性引入的不確定度：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)穩(wěn)定性研究時(shí)間為6個(gè)月，故其不確定度us=s(β1)·T=0.034 7%。

合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度u：

擴(kuò)展不確定度U=ku=0.098 6%，k=2。

2.7 定值結(jié)果表達(dá)

N-乙酰基神經(jīng)氨酸純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值結(jié)果為98.63%，擴(kuò)展不確定度為0.098 6%（k=2）。

3 結(jié)論

研制了N-乙?；窠?jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，采用波譜法進(jìn)行定性分析，采用液相色譜法進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)及穩(wěn)定性考察，考察結(jié)果根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行判定，符合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均勻性與穩(wěn)定性的要求。對(duì)定值結(jié)果的不確定度進(jìn)行了評(píng)定，確保用戶在不同時(shí)間、不同空間，使用不同包裝的該種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，所使用的量值及不確定度準(zhǔn)確可靠，對(duì)于N-乙?；窠?jīng)氨酸的準(zhǔn)確測(cè)定具有重要意義。該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可滿足含有N-乙?；窠?jīng)氨酸相關(guān)食品的分析檢測(cè)、質(zhì)量控制工作的需求，為其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可比性和溯源性提供技術(shù)支撐和量值溯源保證。

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［14］ 馮君，李宏基，韓立強(qiáng)，等.高效液相色譜法測(cè)定奶粉中唾液酸的含量［J］.中國(guó)乳品工業(yè)，2008(6): 62-64.

［15］ 張慶合，盧曉華，闞瑩，等.化學(xué)測(cè)量相關(guān)領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)現(xiàn)狀與趨勢(shì)［J］.化學(xué)試劑，2013，35(10): 865-870.

［16］ Klepach T，Zhang W，Carmichael I，et al.13C-1H and13C-13C NMR j-couplings in13C-labeledN-acetyl-neuraminic acid: correlations with molecular structure［J］. The Journal of Organic Chemistry，2008，73(12): 4 376-4 387.

［17］ JJF 1343-2012 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品定值的一般原則和統(tǒng)計(jì)方法［S］.

英科學(xué)家開(kāi)發(fā)新技術(shù)用蜜蜂檢測(cè)空氣污染狀況

據(jù)英國(guó)《每日電訊報(bào)》報(bào)道，不久前，英國(guó)科學(xué)家們開(kāi)發(fā)出環(huán)境檢測(cè)新技術(shù)，利用附著在蜜蜂身上的顆粒物來(lái)檢測(cè)空氣質(zhì)量，其原理是根據(jù)蜜蜂身上附著的污染顆粒物，尋找這些粒子的源頭，這樣大大縮小了污染源存在的可能范圍。

英國(guó)自然博物館一項(xiàng)最新研究發(fā)現(xiàn)，蜜蜂的身體和翅膀上有較強(qiáng)的靜電，因此他們能吸附各種微小的環(huán)境污染顆粒物。利用這一發(fā)現(xiàn)，科學(xué)家們開(kāi)始利用蜜蜂檢測(cè)空氣污染狀況。

傳統(tǒng)的空氣質(zhì)量觀測(cè)站只能固定地觀測(cè)附近空氣中微粒的數(shù)量。與此相反，一只蜜蜂每天能繞著蜂巢在四周飛行大約2 500 m。也就是說(shuō)，空氣質(zhì)量觀測(cè)者能通過(guò)觀察附著在蜜蜂身上的顆粒物，獲得方圓2 500 m內(nèi)污染顆粒物種類的數(shù)據(jù)。確定了空氣中污染物的種類，科學(xué)家就能從污染物出發(fā)，再進(jìn)一步縮小污染源可能存在的范圍。

(中國(guó)分析計(jì)量網(wǎng))

石墨烯傳感器可讓小分子“現(xiàn)形”

盡管科學(xué)家因?yàn)槭o(wú)與倫比的屬性而對(duì)其青睞有加，但迄今為止，其實(shí)際應(yīng)用仍然乏善可陳。不過(guò)，瑞士洛桑聯(lián)邦理工學(xué)院(EPFL)生物納米系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室和西班牙光子科學(xué)研究所的科學(xué)家們?cè)谧钚乱黄诘摹犊茖W(xué)》雜志上宣稱，他們利用石墨烯獨(dú)特的光學(xué)和電子學(xué)屬性，研制出了一種具有超高靈敏度的分子傳感器，可以探測(cè)蛋白質(zhì)或藥物小分子的詳細(xì)信息。

在紅外吸收光譜學(xué)這種標(biāo)準(zhǔn)的探測(cè)方法中，光被用來(lái)激活分子。不同分子的振動(dòng)不同，借由這種振動(dòng)，分子會(huì)顯示其存在甚至表現(xiàn)自己的“性格”。這些“蛛絲馬跡”可在反射光中“讀出”。但在探測(cè)納米大小的分子時(shí)，這一方法的表現(xiàn)差強(qiáng)人意。因?yàn)檎丈浞肿拥募t外光子的波長(zhǎng)約為6 μm，而目標(biāo)分子僅幾個(gè)納米，很難在反射光中探測(cè)到如此微小分子的振動(dòng)。

于是石墨烯受命于危難之間。研究合作者丹尼爾·羅德里戈解釋道，如果讓石墨烯擁有合適的幾何形狀，就能將光聚焦在其表面上的某個(gè)特定點(diǎn)上，并“傾聽(tīng)”附著其上的納米分子的振動(dòng)。他說(shuō)：“通過(guò)使用電子束轟擊并使用氧離子蝕刻，使石墨烯表面形成一些納米結(jié)構(gòu)。當(dāng)光到達(dá)時(shí)，納米結(jié)構(gòu)內(nèi)的電子會(huì)振蕩，產(chǎn)生的‘局域表面等離子體共振’可將光聚集在某個(gè)點(diǎn)上，與目標(biāo)分子的尺度相當(dāng)，因此能探測(cè)納米大小的結(jié)構(gòu)?！?/p>

除此之外，這一過(guò)程也能揭示組成分子的原子鍵的屬性。研究人員稱，當(dāng)分子振動(dòng)時(shí)，連接不同原子的原子鍵會(huì)產(chǎn)生多種振動(dòng)，不同振動(dòng)之間的細(xì)微差別可提供與每個(gè)鍵的屬性以及整個(gè)分子的健康狀況有關(guān)的信息。為了找出每個(gè)原子鍵發(fā)出的“聲音”從而確定所有的頻率，需要用到石墨烯。在實(shí)驗(yàn)中，研究人員對(duì)石墨烯施加不同的電壓，讓其“調(diào)諧”到不同的頻率，從而能“閱讀”其表面上的分子所有振動(dòng)情況，而使用目前的傳感器無(wú)法做到這一點(diǎn)。研究人員海蒂斯·奧特格說(shuō)：“我們讓蛋白質(zhì)附著在石墨烯上，并用這一方法，得到了分子全方位的信息?！?/p>

(分析儀器網(wǎng))

國(guó)家煤化工產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心成立

從國(guó)家認(rèn)監(jiān)委官網(wǎng)獲悉，新疆維吾爾自治區(qū)質(zhì)監(jiān)局依托自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院籌建的“國(guó)家煤化工產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心(新疆)”已按要求通過(guò)了國(guó)家認(rèn)監(jiān)委組織的“三合一”評(píng)審和授權(quán)，并經(jīng)質(zhì)檢總局組織的專家組驗(yàn)收合格，分級(jí)評(píng)定為B級(jí)。國(guó)家質(zhì)檢總局、國(guó)家認(rèn)監(jiān)委批準(zhǔn)國(guó)家煤化工產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心(新疆)正式成立。

近年來(lái)，新疆自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院能源、煤化工產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展迅速，人員、設(shè)備及檢測(cè)檢測(cè)量增加迅速，在自治區(qū)質(zhì)監(jiān)局領(lǐng)導(dǎo)的指示和相關(guān)處室指導(dǎo)幫助下，經(jīng)過(guò)中心全體人員一年多的辛勤努力，國(guó)家煤化工產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心(新疆)終于正式成立，為方便企業(yè)、服務(wù)地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展及檢驗(yàn)業(yè)務(wù)的順利發(fā)展提供了堅(jiān)實(shí)的技術(shù)保障。

(中國(guó)分析計(jì)量網(wǎng))

Development of N-acetylneuraminic Acid Certified Reference Material

Li Ying1, Xi Xingjun3, Zhou Xiaojing2, Chu Qiao3, Lin Nan2, Wang Wei2, Zhang Jinghua1，2
(1. College of Life Science and Bio-engineering, Beijing University of Technology, Beijing 100124, China; 2. Beijing Center for Physical and Chemical Analysis, Beijing Key Laboralory of Detection Technology & Quality Evaluation of Organic Material, Beijing 100089, China; 3. China National Institute of Standardization, Beijing 100191, China)

N-acetylneuraminic acid certified reference material was separated by semi-preparation HPLC. The qualitative analysis ofN-acetylneuraminic acid was identified by UV, IR, MS and NMR spectrum. The inspection of uniformity and stability were carried out by HPLC. The results examined byF-test statistical methods were stable in the confidence interval of 95%. The combined measurement was executed with 8 qualified laboratory rooms and the uncertainty value was counted at the same time. The purity ofN-acetylneuraminic acid certified reference material was 98.63% with the expanded uncertainty of 0.098 6%(k=2) in the confidence interval of 95%.N-acetylneuraminic acid certified reference material can be used for food detection methods of calibration.

N-acetylneuraminic acid; certified reference material; uniformity; stability; uncertainty

O652.3

：A

：1008-6145(2015)05-0001-06

10.3969/j.issn.1008-6145.2015.05.001

*創(chuàng)新工程Ⅲ-1(PXM2015_178305_000003)

聯(lián)系人：李瑩；E-mail: yingli816@sina.com

2015-08-10