徐新民 華文浩 李 敏 郭晶晶 陸 瑤 李瑞紅 王慧珠

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734株HIV/AIDS患者感染菌群分布及耐藥性分析

徐新民 華文浩 李 敏 郭晶晶 陸 瑤 李瑞紅 王慧珠

目的 了解筆者醫(yī)院HIV/AIDS患者感染病原菌的分布及耐藥情況，以指導(dǎo)臨床醫(yī)師合理用藥。方法 對(duì)筆者醫(yī)院2009年1月～2014年12月收治的HIV/AIDS患者各類標(biāo)本采用自動(dòng)微生物分析儀及配套試劑進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)，結(jié)果按CLSI 2014年版標(biāo)準(zhǔn)判讀，采用WHONET 5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果 在分離的734株病原菌中，結(jié)核分枝桿菌為主要機(jī)會(huì)性感染菌，占9.27%，其余病原菌以銅綠假單胞菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、白假絲酵母菌、馬內(nèi)菲青霉菌分列其后。亞胺培南對(duì)各種腸桿菌科細(xì)菌有較強(qiáng)抗菌活性。大腸桿菌對(duì)第2、3代頭孢菌素敏感度較低，對(duì)氨芐西林、哌拉西林、左氧氟沙星和環(huán)丙沙星耐藥率也較高，達(dá)70.0%～95.1%；凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素全部耐藥，對(duì)紅霉素和克林霉素耐藥率也較高，前者對(duì)這兩種抗菌藥耐藥率均高達(dá)90%以上。結(jié)論 結(jié)核分枝桿菌為HIV/AIDS患者的主要機(jī)會(huì)性感染菌，細(xì)菌耐藥現(xiàn)象比較嚴(yán)峻，臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理選擇抗菌藥物。

HIV/AIDS患者 病原菌分布 耐藥性 抗菌藥物

近年來(lái)，獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)和人類免疫缺陷病毒(HIV)感染者數(shù)量不斷增加，而大部分HIV/AIDS患者機(jī)體免疫力非常低下，常合并全身多系統(tǒng)器官的嚴(yán)重感染，菌群分布和耐藥性較復(fù)雜，不但感染率高，而且一旦感染很難控制，易誘發(fā)多臟器功能障礙，甚至死亡。本研究通過(guò)分析2009年1月～2014年12月筆者醫(yī)院收治的HIV/AIDS患者繼發(fā)感染之病原菌分布及耐藥狀況，以期對(duì)臨床合理使用抗菌藥物提供指導(dǎo)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

材料與方法

1.標(biāo)本來(lái)源:首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院2009年1月～2014年12月臨床送檢的12 491份HIV/AIDS患者標(biāo)本，排除同一患者相同部位先后分離的重復(fù)菌株，共計(jì)734株。

2.儀器和試劑:血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、巧克力瓊脂平板等均購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司；全自動(dòng)血培養(yǎng)儀BACTEC 9240和全自動(dòng)微生物細(xì)菌鑒定藥敏分析儀phoneix100均為美國(guó)BD公司。

3.病原菌培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn):細(xì)菌及酵母樣真菌培養(yǎng)按《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行，細(xì)菌鑒定及藥敏采用美國(guó)BD公司的phoneix100全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)，部分藥敏采用K-B紙片法，按NCCLS標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果。真菌藥敏采用ATB FUNGUS試條。

4.質(zhì)量控制:按照CLSI要求進(jìn)行質(zhì)量控制，質(zhì)控菌株包括大腸桿菌ATCC 25922，金黃色葡萄球菌ATCC 29213，銅綠假單胞菌ATCC 27853，肺炎鏈球菌ATCC 49619和糞腸球菌ATCC 29212，質(zhì)控菌株購(gòu)自國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)(原衛(wèi)生部)臨床檢驗(yàn)中心。

結(jié) 果

1.標(biāo)本類型及構(gòu)成比:HIV/AIDS患者送檢標(biāo)本類型比較多樣，類型和構(gòu)成比例分別為，痰36.5%、分泌物23.3%、血液20.7%、尿液8.2%、腦脊液2.6%、腹腔積液1.5%、胸腔積液1.2%、鎖穿管尖段0.8%、骨髓0.8%、膽汁0.4%、咽拭子0.4%、體液0.1%及其他2.3%。

2.菌株種類及分布：共分離病原菌734株，結(jié)核分枝桿菌為主要分離的感染菌，占9.27%(76/734)；革蘭陰性菌占40.73%，以銅綠假單胞菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌為主；革蘭陽(yáng)性菌占19.15%，以凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、屎腸球菌為主；真菌感染占14.02%，以白假絲酵母菌、馬內(nèi)菲青霉菌、熱帶假絲酵母菌為主(表1)。

表1 HIV/AIDS患者主要病原菌分布及構(gòu)成比

3.病原菌耐藥情況：革蘭陽(yáng)性球菌中，凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素全部耐藥，對(duì)紅霉素和克林霉素耐藥率也較高，對(duì)利奈唑胺和萬(wàn)古霉素最敏感，未見耐藥菌株。腸球菌屬耐藥情況比較嚴(yán)重，對(duì)紅霉素、克林霉素、氨芐西林、環(huán)丙沙星和吉米沙星均100%耐藥(表2)。 革蘭陰性桿菌中，大腸桿菌、肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌對(duì)1代、2代、3代頭孢明顯耐藥，但對(duì)亞胺培南和美羅培南則高度敏感；銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為20.8和18.3%，對(duì)多黏菌素B最為敏感。鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥情況最為嚴(yán)重，除了對(duì)多黏菌素B的耐藥了較低(14.3%)以外，其他所有抗菌藥物耐藥率均達(dá)30%以上。主要革蘭陰性桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥情況見表3。真菌中，除了克柔假絲酵母菌對(duì)氟康唑天然耐藥以外，大部分真菌對(duì)目前常用的抗菌藥物較為敏感，其中兩性霉素B對(duì)白色假絲酵母菌、馬內(nèi)菲青霉菌、熱帶假絲酵母菌都比較敏感，提示治療時(shí)可考慮選用(表4)。

討 論

本研究回顧性分析了2009年1月～2014年12月筆者醫(yī)院HIV/AIDS患者標(biāo)本分離的734株病原菌，結(jié)果顯示結(jié)核分枝桿菌為主要感染致病菌，占9.27%(76/734)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[1]。有研究表明，最常見的機(jī)會(huì)性感染菌是結(jié)核分枝桿菌，其次為口腔念珠菌[2, 3]。其他常見的機(jī)會(huì)性感染菌有新型隱球菌、隱孢子蟲、卡氏肺孢子蟲等。但也有研究顯示，真菌感染尤其新型隱球菌為主要感染病原菌[4]。這可能地域差異以及菌株數(shù)量有關(guān)。不同地區(qū)AIDS患者的主要機(jī)會(huì)性感染菌不同，云南、廣東和新疆分別以新型隱球菌、白假絲酵母菌和結(jié)核分枝桿菌為主[4～6]。這表明，由于地理位置的差異，HIV/AIDS患者機(jī)會(huì)性感染的病原譜也會(huì)有所不同。本研究中革蘭陰性桿菌占40.73%，以銅綠假單胞菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌為主；革蘭陽(yáng)性菌占19.155，以凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、屎腸球菌為主；真菌感染占14.02%，以白假絲酵母菌、馬內(nèi)菲青霉菌、熱帶假絲酵母菌為主。另外，AIDS患者由于機(jī)體免疫低下也易發(fā)生沙門菌屬、志賀菌屬及空腸彎曲菌等消化系統(tǒng)機(jī)會(huì)感染[7]。

本研究中，革蘭陽(yáng)性球菌對(duì)青霉素耐藥率最高，其中凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素全部耐藥。對(duì)紅霉素和克林霉素耐藥率也較高，但對(duì)利奈唑胺和萬(wàn)古霉素最敏感，耐藥率為0。腸球菌屬耐藥情況比較嚴(yán)重，對(duì)紅霉素、克林霉素、氨芐西林、環(huán)丙沙星和吉米沙星均100%耐藥，出現(xiàn)2例屎腸球菌對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥，未檢出耐萬(wàn)古霉素的糞腸球菌，腸球菌屬對(duì)利奈唑胺最為敏感，未檢出耐藥菌株。

表2 主要革蘭陽(yáng)性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率

CNS.凝固酶陰性葡萄球菌

表3 主要革蘭陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率

表4 真菌對(duì)抗真菌藥物的耐藥率

ND.CLSI/NCCLS沒(méi)有定義

亞胺培南對(duì)各種腸桿菌科細(xì)菌有較強(qiáng)抗菌活性。大腸桿菌對(duì)第2、3代頭孢菌素敏感率較低，對(duì)氨芐西林、頭孢噻肟、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星和哌拉西林耐藥率達(dá)70.0%～95.1%；銅綠假單胞菌對(duì)多黏菌素B和四環(huán)素最為敏感，對(duì)阿米卡星和頭孢他啶較為敏感，耐藥率分別為4.2%和9.7%。近年來(lái)鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率有上升趨勢(shì)，對(duì)各類抗生素耐藥率較高，除了多黏菌素B耐藥率相對(duì)較低(14.3%)以外，對(duì)其他所有抗菌藥物的耐藥率都在30%以上，應(yīng)引起臨床上廣泛重視。

對(duì)真菌的藥敏分析顯示除了克柔假絲酵母菌對(duì)氟康唑天然耐藥，以及氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑?qū)Π准俳z酵母存在35%～45%的耐藥以外，目前常用的抗菌藥物對(duì)其他真菌都較為敏感，尤其兩性霉素B和5-FU。兩性霉素B能選擇性地與真菌細(xì)胞膜上的麥角甾醇結(jié)合，增加細(xì)胞膜的通透性，使菌體內(nèi)物質(zhì)外滲，最終導(dǎo)致真菌死亡，因此它是目前公認(rèn)的抗真菌感染首選藥物[8]。

由此可見， AIDS患者感染HIV病毒的同時(shí)常合并其他一些細(xì)菌或真菌感染，給臨床治療帶來(lái)極大困難，臨床在選擇抗菌藥物時(shí)，也應(yīng)重視無(wú)菌部位標(biāo)本的采集及培養(yǎng)，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇抗菌藥物。

1 Bruchfeld J, Correia-Neves M, K?llenius G. Tuberculosis and HIV Coinfection[J]. Cold Spring Harb Perspect Med， 2015，5：pii: a017871

2 Xiao J, Gao G, Li Y,etal. Spectrums of opportunistic infections and malignancies in HIV-Infected patients in tertiary care hospital, China[J]. PLoS One 2013, 8(10): e75915

3 Haddow LJ, Moosa MY, Mosam A,etal. Incidence, clinical spectrum, risk factors and impact of HIV-associated immune reconstitution inflammatory syndrome in South Africa[J]. PLoS One, 2012, 7(11): e40623

4 張嗣興, 李惠琴, 寇建瓊, 等. 艾滋病患者感染菌群分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2012, 22(10): 2217-2220

5 唐秀文, 張晶. 2350例艾滋病患者血培養(yǎng)病原體和藥敏結(jié)果分析[J]. 廣西醫(yī)學(xué), 2010, 32(7)：782-785

6 龐秀慧，莫紅梅. 新疆100例HIV/AIDS患者機(jī)體細(xì)胞免疫與合并機(jī)會(huì)性感染關(guān)系的研究[J]．中國(guó)臨床實(shí)用醫(yī)學(xué), 2010, 4(8): 20-21

7 朱元祺，秦萍，黃偉麗，等．艾滋病患兒糞便中檢出鼠傷寒沙門菌氏1例[J]．世界華人消化雜志, 2006,14(12): 34-35

8 Li M, Liao Y, Chen M,etal．Antifungal susceptibilities of Cryptococcus species complex isolates from AIDS and non-AIDS patients in Southeast China[J]．Braz J Infect Dis，2012,16(2): 175-179

(修回日期：2015-05-06)

Pathogens Distribution and Resistance Analysis of 734 Strains in HIV/AIDS Patients.

XuXinmin,HuaWenhao,LiMin,etal.

DepartmentofClinicalLaboratory,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China

Objective To understand the pathogens distribution and drug resistance of HIV/AIDS patients in our hospital and to guide clinicians to use drug rationally. Methods We used automated microbiological analyzer and corresponding reagents to perform bacterial identification and drug susceptibility test for HIV/AIDS patients in January 2009 to December 2014 in our hospital. The results were determined by CLSI 2014 and WHONET 5.6 software was used for data analysis. Results Among 734 strains, the Mycobacterium tuberculosis is the main opportunity bacterial infection, accounting for 9.27%, and followed by Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolyticus, Candida albicans and Maerneifei penicillium. Imipenem has strong antibacterial activity for Enterobacteriaceae. Escherichia coli has a lower sensitive rate for the second and the third generation cephalosporins and resistant rate was 70.0%-95.1% for ampicillin, piperacillin, levofloxacin and ciprofloxacin. Coagulase-negative staphylococci and Staphylococcus aureus were resistant to penicillin, and the resistant rate for erythromycin and clindamycin was also higher. The former of these two antibiotic resistance rates was as high as 90%. Conclusion Mycobacterium tuberculosis was the major opportunity bacterial. Resistance phenomenon of bacterial is severe and the clinician should choose antibiotics reasonably based on susceptibility results.

HIV/AIDS patients; Pathogens distribution; Drug resistance; Antibiotics

100015 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院檢驗(yàn)科

王慧珠，電子信箱：whz660527@sina.com

R37

A DOI 10.11969/j.issn.1673-548X.2015.10.028

2015-04-24)