曾聰聰, 劉 曦， 劉網(wǎng)網(wǎng)， 王 玲， 程錦國(guó), 陳三妹, 陳國(guó)榮△

(1. 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院， 浙江 溫州 325000； 2. 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科， 浙江 溫州 325015； 3. 紹興文理學(xué)院醫(yī)學(xué)院, 浙江 紹興 312000)

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姜黃素衍生物B06對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用*

曾聰聰1, 劉 曦1， 劉網(wǎng)網(wǎng)2， 王 玲2， 程錦國(guó)1, 陳三妹3△, 陳國(guó)榮2△

(1. 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院， 浙江 溫州 325000； 2. 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科， 浙江 溫州 325015； 3. 紹興文理學(xué)院醫(yī)學(xué)院, 浙江 紹興 312000)

目的：觀察姜黃素衍生物B06對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用及機(jī)制。方法：雄性SD大鼠35只，隨機(jī)均分成5組(n=7)：正常對(duì)照組、高脂組、高脂治療組、糖尿病組、糖尿病治療組。采用高脂飲食結(jié)合鏈脲佐菌素誘導(dǎo)2型糖尿病大鼠模型。治療組給予0.2 mg/kg·d劑量的B06灌胃，維持8周。檢測(cè)血肌酐、尿素氮、尿酸，光鏡和電鏡觀察大鼠腎組織的形態(tài)學(xué)改變，Masson染色觀察腎組織的膠原纖維，并用免疫組化方法檢測(cè)腎臟IV型膠原、纖維連接蛋白的表達(dá)。結(jié)果：糖尿病組大鼠血肌酐、尿素氮水平升高；光鏡下見(jiàn)腎小球系膜基質(zhì)增多，膠原纖維增多，腎小球毛細(xì)血管基底膜增厚；電鏡下足細(xì)胞足突腫脹及足突融合；Masson染色示腎小球亮綠色陽(yáng)性基質(zhì)增多；免疫組化顯示IV型膠原、纖維連接蛋白的表達(dá)水平升高。經(jīng)B06干預(yù)后，血肌酐、尿素氮下降；腎小球病變減輕，腎臟組織IV型膠原、纖維連接蛋白的表達(dá)水平降低。結(jié)論：B06對(duì)2型糖尿病大鼠的腎臟具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能是通過(guò)降低腎臟IV型膠原、纖維連接蛋白的表達(dá)，從而抑制細(xì)胞外基質(zhì)的積聚和腎小球系膜增殖,發(fā)揮抗腎纖維化的作用。

糖尿??；高脂；姜黃素衍生物B06；IV型膠原；纖維連接蛋白；腎臟；大鼠

隨著2型糖尿病發(fā)病率的上升，作為糖尿病最常見(jiàn)、最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，糖尿病腎病(diabetic nephropathy, DN)的發(fā)病率也逐年上升。但是，由于該病發(fā)病機(jī)制尚不明確，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)主要采用降糖、降壓等對(duì)癥治療，尚未發(fā)現(xiàn)理想的藥物能逆轉(zhuǎn)或阻斷 DN 的發(fā)展。祖國(guó)醫(yī)學(xué)中雖無(wú)“糖尿病腎病”獨(dú)立病名的記載，但其與“腎水”、“消渴”密切相關(guān)。中醫(yī)認(rèn)為糖尿病腎病的病機(jī)可概括為“本虛標(biāo)實(shí)”，以陽(yáng)虛為本，痰、濕、瘀為邪實(shí)，其中血瘀貫穿疾病始終，故活血化瘀通絡(luò)是基本治療原則，臨床上可選用活血藥為主。姜黃素是從中藥姜黃的根莖中提取出來(lái)的酚類(lèi)色素[1]，具有抗炎、抗氧化、消除氧自由基、抗腫瘤、降血脂等多種藥理作用。而B(niǎo)06是姜黃素類(lèi)似物的一種，它不僅具有姜黃素的一般特性，而且由于它去除了不穩(wěn)定的β-二酮基團(tuán)，使得其在代謝、生物利用度等方面均優(yōu)于姜黃素，從而更好地發(fā)揮姜黃素的藥理作用。本研究室前期的實(shí)驗(yàn)證實(shí)了B06對(duì)糖尿病大鼠的心肌[2]、肝臟[3]均有保護(hù)作用，然而B(niǎo)06對(duì)糖尿病大鼠的腎臟病變是否有作用目前還未見(jiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)對(duì)高脂組、糖尿病組大鼠行BO6干預(yù)，觀察大鼠腎功能相關(guān)指標(biāo)的變化及腎臟的形態(tài)學(xué)表現(xiàn)，并檢測(cè)腎組織的IV型膠原(collagen IV，Col-IV)、纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)的表達(dá)水平，研究B06對(duì)糖尿病大鼠腎臟病變的影響及其機(jī)制，為糖尿病腎病的治療提供新的思路和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物分組及模型建立

健康SPF級(jí)雄性SD大鼠35只(溫州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體重(180±20)g，普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)均分成5組(n=7)：正常對(duì)照(normal control，NC)組、高脂(high-fat，HF)組、高脂治療(HF+B06 treatment，F(xiàn)T)組、糖尿病(diabetes mellitus, DM)組、糖尿病治療(DM+B06 treatment, DT)組[2]。對(duì)照組繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)，其余組改用高脂飼料(飼料配方參考文獻(xiàn)[4])喂養(yǎng)4周，誘發(fā)胰島素抵抗。采用腹腔注射30 mg/kg 劑量鏈脲佐菌素的方法制造2型糖尿病大鼠模型，72 h后尾靜脈測(cè)血糖,血糖>16. 7 mmol/L為造模成功。造模完成后，F(xiàn)T、DT組按0.2 mg/kg·d劑量的B06(溶于2%羧甲基纖維素鈉)灌胃8周。以往研究證明2%羧甲基纖維素鈉對(duì)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響，故不再設(shè)單純生理鹽水灌胃組。因此NC組、HF組、DM組給予等容積的2%羧甲基纖維素鈉灌胃。實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物自由進(jìn)食進(jìn)水，未使用胰島素及其它降糖藥物。治療結(jié)束，禁食12 h，股動(dòng)脈放血處死動(dòng)物。

1.2 藥品與試劑

姜黃素衍生物B06(純度為99.2%)，由溫州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院梁廣教授惠贈(zèng)；鏈脲佐菌素、胰島素檢測(cè)試劑盒分別購(gòu)于購(gòu)于廈門(mén)星隆達(dá)化學(xué)試劑、上海西塘生物科技有限公司；Anti-FN、Anti-Col-IV、兔二抗購(gòu)于北京中杉金橋生物試劑公司。

1.3 生化指標(biāo)的檢測(cè)

1.3.1 空腹血糖(fasting blood-glucose，F(xiàn)BG)、血胰島素(fast insulin，F(xiàn)INs)、血胰島素抵抗指數(shù)(homeostasis model assessment of insulin resistance，HOMA-IR)、總甘油三酯(total triglyceride，TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)的測(cè)定

1.3.2 血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿酸(uric acid,UA)的測(cè)定 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后分別取上述5組大鼠，股動(dòng)脈放血處死，取血,室溫凝固約30 min，3 000 r/min離心10 min，取上清液，用日立7600大型生化分析儀檢測(cè)各組大鼠FBG、TG和TC、Scr、BUN、UA。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定FINs，并計(jì)算HOMA-IR。

1.4 光鏡標(biāo)本制備

1.4.1 HE染色標(biāo)本制備 大鼠腎臟皮質(zhì)處取3 mm厚度的小塊組織，置于10%中性福爾馬林固定液中固定，梯度乙醇脫水，石蠟包埋之后，制成厚度3 μm的切片，行HE染色，中性樹(shù)膠封固。光鏡下觀察腎小球體積大小、系膜基質(zhì)、毛細(xì)血管基底膜等的變化情況。

1.4.2 膠原纖維(Masson)染色標(biāo)本制備 石蠟切片，常規(guī)脫蠟，蘇木素染色5 min，1%鹽酸酒精分化2 s，沖水17 min，置Masson液(組成成份：變色酸2R 0.25 g、磷鎢酸0.5 g、冰醋酸0.5 ml、蒸餾水50 ml)中染色5 min，水洗，亮綠液染色5 min，95%乙醇脫水1 min，于石碳酸二甲苯中3 s，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。光鏡下觀察腎臟膠原纖維的染色情況。

1.5 電鏡標(biāo)本制備

取腎臟皮質(zhì)處大小約1 mm×1 mm×1 mm的組織一塊，置于2.5%的戊二醛溶液中，于4℃固定l h，PBS漂洗，鋨酸后固定，PBS漂洗之后，丙酮梯度脫水。Epon8l2包埋，半薄切片進(jìn)行定位之后，用RMC—XL型超薄切片機(jī)切片，采用鉛鈾雙重染色，在H-7500型透射電鏡下進(jìn)行觀察。

1.6 免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)腎臟組織中Col-IV、FN蛋白的表達(dá)水平

腎臟組織經(jīng)固定，常規(guī)脫水包埋。石蠟切片至3 μm厚度，經(jīng)烘烤、二甲苯脫蠟、梯度酒精脫水、3%過(guò)氧化氫孵育、高壓抗原修復(fù)、山羊血清封閉后，滴加Ⅰ抗抗體，4℃冰箱過(guò)夜，然后滴加Ⅱ抗，37℃孵育30 min，DAB顯色1～3 min，蘇木素復(fù)染，透明、固封。PBS代替一抗作陰性對(duì)照。選取腎小球毛細(xì)血管基底膜或者系膜基質(zhì)對(duì)Col-IV、FN進(jìn)行定位。對(duì)其定量分析采用Image-Pro Plus 6.0圖像處理軟件進(jìn)行。并對(duì)所得數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

2.1.1 FBG、FINs、HOMA-IR、及TG、TC檢測(cè)結(jié)果 與NC組相比較，HF組FBG、HOMA-IR及TG明顯升高(P<0.01)，F(xiàn)INs、TC升高(P<0.05)； DM組FBG、HOMA-IR和TG、TC明顯升高(P<0.01)，F(xiàn)INs差異不顯著，但有升高趨勢(shì)；DM組較HF組FBG、HOMA-IR、TG、TC水平明顯上升(P<0.01)，分析DM組糖脂代謝紊亂、胰島素抵抗更明顯。經(jīng)B06干預(yù)后，F(xiàn)T組、DT組大鼠的血糖血脂大多指標(biāo)均明顯降低(P<0.01，表1)。

2.1.2 Scr、BUN、UA結(jié)果 與NC組相比，HF組血清Scr、BUN水平有升高趨勢(shì)，但差異不顯著；DM組Scr、BUN較NC組明顯升高(P<0.01),與HF組相比，雖無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但可見(jiàn)明顯的上升趨勢(shì)；經(jīng)B06干預(yù)后，F(xiàn)T組 Scr、BUN水平均有所下降，但差異不顯著，而DT組較DM組Scr、BUN下降，有顯著性差異(P<0.01)。兩治療組之間Scr、BUN差異不顯著。分析姜黃素B06對(duì)糖尿病腎病的腎功能具有一定的保護(hù)作用。各組之間UA水平無(wú)顯著性差異(表2)。

Tab. 1 Comparision of levels of FBG,FINs,HOMA-IR and TG,TC among various groups(n=7，±s)

NC： Normal control； HF： High fat； FT： High fat treatment； DM： Diabetes mellitus； DT： Diabetes treatment； FBG： Fasting blood glucose； FINs： Fasting insulin； HOMA-IR： Homeostasis model assessment of insulin resistance； TG： Triglyceride； TC： Total cholesterol

*P<0.05,**P<0.01vsNC;##P<0.01vsHF;ΔΔP<0.01vsDM

GroupScr(μmol/L)BUN(mmol/L)UA(mmol/L)NC31.01±8.427.16±1.09103.14±32.61HF39.76±8.218.95±1.06104.70±33.51DM70.34±17.28**14.68±2.34**109.43±30.19FT32.10±8.167.99±1.76122.00±25.12DT33.00±8.12##9.22±1.92##102.43±28.60

NC: Normal control; HF: High fat; FT: High fat treatment; DM: Diabetes mellitus; DT: Diabetes treatment; Scr: Serum creatinine; BUN: Blood urea nitrogen ; UA: Uric acid

**P<0.01vsNC；##P<0.01vsDM

2 腎臟的形態(tài)學(xué)改變

2.1 光鏡下觀察結(jié)果

(1)HE染色：NC組大鼠腎小球毛細(xì)血管管腔規(guī)則，管壁菲薄，腎小球體積未見(jiàn)肥大，結(jié)構(gòu)完整(圖1A)。與NC組相比，DM組及HF組大鼠的腎小球體積增大，毛細(xì)血管袢卷曲紊亂，系膜區(qū)增大，系膜基質(zhì)增生。其中DM組(圖1B)病變較HF組(圖1C)更明顯。經(jīng)B06干預(yù)后，F(xiàn)T組(圖1D)、DT組(圖1E)腎組織病變有所減輕(圖1，見(jiàn)彩圖頁(yè)Ⅳ)。(2)Masson染色：NC組大鼠腎小球毛細(xì)血管基底膜顯示少量呈亮綠色的膠原纖維(圖2A)。與NC組相比，DM組(圖2B)和HF組(圖2C)大鼠腎臟表現(xiàn)為系膜基質(zhì)增多，主要位于腎小球系膜區(qū)，并可見(jiàn)亮綠色的膠原纖維增多，提示毛細(xì)血管基底膜增厚。B06干預(yù)后，F(xiàn)T組(圖2D)、DT組(圖2E)亮綠色陽(yáng)性基質(zhì)稀疏減少，毛細(xì)血管基底膜結(jié)構(gòu)改善(圖2，見(jiàn)彩圖頁(yè)Ⅳ)。

2.2 電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察結(jié)果

電鏡下可以觀察到，腎小球?yàn)V過(guò)膜由毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、基底膜、足細(xì)胞突起構(gòu)成，NC組大鼠腎小球?yàn)V過(guò)膜的基底膜厚度均勻一致，足突細(xì)長(zhǎng)(圖3A)。與NC組相比，DM組(圖3B)、HF組(圖3C)大鼠的基底膜輕度增厚，足突腫脹、變短、融合，線(xiàn)粒體腫脹。B06干預(yù)后，F(xiàn)T組(圖3D)、DT組(圖3E)大鼠腎小球毛細(xì)血管基底膜基本恢復(fù)正常，足突腫脹減輕，足突融合現(xiàn)象減少，分析可能因?yàn)榻S素B06能保護(hù)足細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整。

Fig. 3 Kidney tissue morphological changes of each group(TEM×10 000)

A: Normal control group； B: Diabetes mellitus group； C: High fat group； D: Diabetes treatmen group； E: High fat treatment group

2.3 腎臟組織Col-IV、FN蛋白免疫組織化學(xué)結(jié)果

2.3.1 Col-IV在各組大鼠腎臟的表達(dá)情況 NC組大鼠的腎組織中有少量的Col-IV表達(dá)，在腎小球系膜區(qū)、毛細(xì)血管基底膜及腎球囊基底膜可見(jiàn)微量的棕黃色染色，呈弱陽(yáng)性(圖4A)。DM組(圖4B)、HF組(圖4C)腎組織中Col-IV表達(dá)明顯增強(qiáng)(P<0.01)，腎小球系膜區(qū)、毛細(xì)血管基底膜及腎球囊基底膜染色明顯加深，出現(xiàn)棕黃色深染的粗線(xiàn)條，呈強(qiáng)陽(yáng)性。經(jīng)B06干預(yù)后，F(xiàn)T組腎組織Col-IV蛋白表達(dá)水平有降低趨勢(shì)(圖4D)；DT組(圖4E，圖4見(jiàn)彩圖頁(yè)Ⅳ)腎組織Col-IV表達(dá)水平明顯減弱(P<0.05，表3)。表明姜黃素B06能明顯減少腎臟組織Col-IV的異常沉積。

GroupCol-IV(IOD×105)FN(IOD×105)NC0.34±0.030.31±0.04HF0.40±0.02**0.36±0.02**FT0.37±0.030.32±0.03##DM0.50±0.09**0.43±0.06**DT0.36±0.09Δ0.35±0.072ΔΔ

NC: Normal control; HF: High fat; FT: High fat treatment; DM: Diabetes mellitus; DT: Diabetes treatment; Col-IV: Collogen IV; FN: Fibronectin

**P<0.01vsNC；##P<0.01vsHF；ΔP<0.05,ΔΔP<0.01vsDM

2.3.2 FN在各組大鼠腎臟的表達(dá)情況 NC組大鼠腎小球FN蛋白呈弱陽(yáng)性表達(dá)，可見(jiàn)呈網(wǎng)狀或細(xì)線(xiàn)條狀分布的棕黃色顆粒(圖5A)，DM組(圖5B)、HF組(圖5C)大鼠腎小球內(nèi)FN呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)(P<0.01)，在圖中可見(jiàn)腎小球毛細(xì)血管基底膜染色顯著加深。經(jīng)B06干預(yù)后，F(xiàn)T組(圖5D)、DT組(圖5E，圖5見(jiàn)彩圖頁(yè)Ⅳ)FN表達(dá)較之前明顯減低(P<0.01，表3)。分析可能因?yàn)榻S素B06能減少FN在腎小球基底膜的沉積，從而保護(hù)腎臟結(jié)構(gòu)。

3 討論

DN作為最嚴(yán)重的糖尿病微血管病變之一, 是引起終末期腎功能衰竭的主要原因[5]。進(jìn)展到后期，由于嚴(yán)重的代謝紊亂，在治療上通常比其他腎病更加困難。祖國(guó)醫(yī)藥以其多途徑、多靶點(diǎn)、副作用少的特點(diǎn),而有著極大的優(yōu)勢(shì)和潛力。藥理學(xué)研究現(xiàn)較為明確的有效的中藥活性成分主要有：生物堿、蒽醌類(lèi)、多糖[6]、皂苷、黃酮、萜類(lèi)等[7]。主要作用機(jī)理[8]是：促進(jìn)胰島素分泌,增加組織對(duì)外周葡萄糖的攝取利用、促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn),改善糖脂代謝和胰島素的敏感性等,以此達(dá)到降糖及改善胰島素抵抗的作用；另外還對(duì)糖尿病的并發(fā)癥具有一定的防治作用。

現(xiàn)代研究認(rèn)為，胰島素抵抗與胰島素分泌缺陷是2型糖尿病的發(fā)病基礎(chǔ)，而高脂血癥可抑制胰島素的輸送與外周葡萄糖的利用，因此高脂血癥被認(rèn)為是促進(jìn)2型糖尿病發(fā)生發(fā)展的危險(xiǎn)因素之一。高脂血癥的脂代謝紊亂表現(xiàn)為高甘油三酯、低密度脂蛋白增高、高密度脂蛋白降低，脂質(zhì)沉積于腎小球，本身可誘導(dǎo)腎臟損害，而在糖尿病的基礎(chǔ)上對(duì)腎臟的破壞更是嚴(yán)重。因此，本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)高脂血癥組模擬糖尿病早期階段，通過(guò)姜黃素B06的干預(yù)，提示對(duì)糖尿病早期即行藥物干預(yù)能顯著改善胰島素抵抗、糖脂代謝紊亂及腎臟損傷情況。

DN時(shí),腎臟結(jié)構(gòu)及功能變化的主要原因之一是細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrixc,ECM)的進(jìn)行性積聚，從而引起系膜基質(zhì)的增多，基底膜增厚。FN和Col-IV不僅是腎小球及腎小管基底膜的主要結(jié)構(gòu)蛋白，也是DN時(shí)ECM增多的主要成分。Wahab[9]發(fā)現(xiàn)系膜細(xì)胞在高糖刺激下,分泌FN明顯增多。FN是ECM中變化較早且明顯的指標(biāo)之一,FN的合成增加預(yù)示著ECM的過(guò)度積聚。Col-IV是腎臟細(xì)胞外基質(zhì)最豐富的成分，屬于典型的基底膜膠原，對(duì)于構(gòu)建腎小球基底膜的支架具有重要的作用。生理作用是對(duì)腎小球毛細(xì)血管提供強(qiáng)而有韌性的支持作用，同時(shí)它的膠原纖維廣泛地與系膜細(xì)胞和腎小球毛細(xì)血管基膜相連，可將系膜細(xì)胞的收縮活動(dòng)傳遞至基底膜和毛細(xì)血管，以調(diào)控腎小球毛細(xì)血管的收縮活動(dòng)[10]。另外，F(xiàn)N 作為一種始動(dòng)因素,還可誘導(dǎo)Col-IV的形成、促進(jìn)腎小球病變。因此，減少FN、Col-IV的表達(dá)，能減少ECM的沉積，從而保護(hù)腎小球結(jié)構(gòu)及功能變化。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用高脂飲食結(jié)合小劑量鏈脲佐菌素成功制備高脂血癥及糖尿病模型，并在實(shí)驗(yàn)中比較高脂組與糖尿病組，能更直觀的觀察到糖尿病不同階段中腎臟的變化，是本實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新點(diǎn)之一。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，DM組、HF組大鼠的血糖、血脂、血清Scr、BUN，腎臟組織內(nèi)FN、Col-IV的表達(dá)水平均高于NC組，且DM組比HF組升高更明顯，經(jīng)姜黃素衍生物B06干預(yù)后，大鼠血糖血脂、血清Scr、BUN水平降低，F(xiàn)N、Col-IV的表達(dá)減少。且光鏡下腎小球的形態(tài)接近于NC組的形態(tài)，腎小球體積大小一致，毛細(xì)血管基底膜厚度較均勻。腎小球系膜區(qū)膠原纖維減少，電鏡下大鼠足突融合減輕。表明B06可以通過(guò)糾正糖脂代謝紊亂，減少2型糖尿病大鼠腎臟FN、Col-IV的表達(dá)，延緩ECM的沉積，減輕腎功能損傷，保護(hù)腎臟形態(tài)。提示B06可能為治療糖尿病腎病的新靶點(diǎn)。

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Protective effect of curcumin derivative B06 on kidney of type 2 diabetic rats

ZENG Cong-cong1, LIU Xi1, LIU Wang-wang2, WANG Ling2, CHENG Jin-guo1,CHEN San-mei3△, CHEN Guo-rong2△

(1. the Second Affiliated Hospital, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000; 2. Department of Pathology, the First Affiliated Hospital, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325015; 3. Medical Colledge, Shaoxing University, Shaoxing 312000， China)

Objective: To observe the effect and mechanism of curcumin derivative B06 on kidney from rats with hyperlipidemia and type 2 diabetes. Methods: Thirty five male SD rats were randomly divided into five groups(n=7): the normal control group, high-fat group, high-fat +B06-treatd group, diabetic group, diabetic +B06-treated group. After fed with high-fat diet for 4 weeks, the later two groups were injected with streptozotocin intraperitoneally to induce type 2 diabetes mellitus. B06-treated groups were given B06 by gavage at a dosage of 0.2 mg/kg·d for 8 weeks. After the treatment, the serum creatinine，blood urea nitrogen and uric acid were detected biochemically，the morphology of kidney was observed with light and transmission electron microscopy，the expression of collagen fibers was observed with Masson staining, the protein expression of collogen IV and fibronectin in kidney were determined by Immunohistochemistry. Results: It was showed that the levels of the serum creatinine and blood urea nitrogen elevated significantly in diabetic group. In high-fat and diabetic groups, increased glomerular mesangial matrix and collagen fiber and thicken glomerular basal membrane were observed under light microscopy, swelling and fusion of foot process were found under electron microscope; increased green matrix within glomeruli was observed under Masson staining. collogen IV and fibronectin protein expression were significantly enhanced in high-fat group and diabetic group. After B06’s intervention, the levels of serum creatinine and blood urea nitrogen were decreased in diabetic groups, the morphological change of kidney was obviously relieved, Collogen IV and fibronectin protein expression reduced. Conclusion: Curcumin derivative B06 exerts a protective effect on kidney in type 2 diabetic rats, reduced expressions of collogen IV and fibronectin, inhibition of the accumulation of extracellular matrix and glomerular mesangial proliferation, and then prevention of renal fibrosis may be the mechanism.

diabetes mellitus; hyperlipidemia; curcumin derivatives B06; collogen IV; fibronectin; kidney; rat

浙江省公益性技術(shù)應(yīng)用研究計(jì)劃項(xiàng)目(2011c23123)；溫州市高層次人才創(chuàng)新技術(shù)項(xiàng)目

2014-10-08 【修回日期】2014-11-06

R587.1

A

1000-6834(2015)01-038-05

10.13459/j.cnki.cjap.2015.01.012

△【通訊作者】Tel: 13819738583， 13606751212； E-mail: chengr1978@aliyun.com， csm498@163.com