唐浩，李玉波，黃素，楊瀟，劉明華

（1四川省宜賓市第三人民醫(yī)院，四川宜賓644000；2四川醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，四川瀘州646000）

肛愈膏鎮(zhèn)痛抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究*

唐浩1，李玉波1，黃素1，楊瀟2，劉明華2

（1四川省宜賓市第三人民醫(yī)院，四川宜賓644000；2四川醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，四川瀘州646000）

目的：研究自制肛愈膏的鎮(zhèn)痛抗炎作用。方法：采用醋酸致小鼠扭體反應(yīng)、小鼠熱板性疼痛試驗(yàn)觀察自制肛愈膏的鎮(zhèn)痛作用。采用二甲苯致小白鼠耳廓腫脹和蛋清性大鼠足跖腫觀察自制肛愈膏的抗炎作用。結(jié)果：肛愈膏能提高小鼠對(duì)熱板性疼痛的痛閾值，減少扭體反應(yīng)的平均次數(shù)，減輕二甲苯致小鼠耳廓腫脹度和蛋清性大鼠足跖腫脹值。結(jié)論：自制肛愈膏具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛抗炎作用。

肛愈膏；鎮(zhèn)痛；抗炎；扭體反應(yīng)

肛愈膏是由宜賓市第三人民醫(yī)院自行研制的痔瘡膏，主要成份有黃芪、白芷、槐米、當(dāng)歸、紫草、冰片，具有鎮(zhèn)痛抗炎、活血化瘀等功效，用于治療痔瘡術(shù)后，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。隨著社會(huì)的不斷發(fā)展，人們的生活節(jié)奏越來越快，生活也不規(guī)律，導(dǎo)致痔瘡等肛腸疾病在各年齡層的發(fā)生率都居高不下，劇烈的疼痛嚴(yán)重影響人們的正常生活工作質(zhì)量[1]。本實(shí)驗(yàn)研究了自制肛愈膏對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)、小鼠熱板性疼痛、二甲苯致小白鼠耳廓腫脹和蛋清性大鼠足跖腫的影響，為肛愈膏臨床用于治療痔瘡提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

SPF級(jí)SD大鼠，雌雄各半，體重：180～220 g；SPF級(jí)昆明種小鼠，雌雄兼有，體重：18～22 g。以上實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由四川醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物許可證號(hào)∶SCXK(川)2013-065。

1.2 受試品

肛愈膏：棕褐色膏藥，由宜賓市第三人民醫(yī)院提供。陽性對(duì)照∶市售馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏，批號(hào)∶150136。

1.3 儀器

9 mm打孔器（自制）；BSA-124S-CW電子天平（德國賽多利斯）；YLS-6B小鼠智能熱板儀（淮北正華生物儀器有限公司）；大鼠PV-200足趾容積測(cè)量?jī)x（四川成都泰盟科技有限公司）。

1.4 小鼠扭體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)

KM小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組12只。小鼠腹部備皮，24 h后給藥，陰性對(duì)照涂抹輔料芝麻油0.2 g/只，陽性對(duì)照組涂痔瘡膏0.2 g/只，低劑量組涂抹肛愈膏0.1 g/只，中劑量組涂抹肛愈膏0.2 g/只，高劑量組涂抹肛愈膏0.4 g/只。每天涂抹給藥1次，連續(xù)10 d。于末次涂藥30 min后，0.5%冰醋酸溶液腹腔注射，0.2 mL/只，記錄小鼠出現(xiàn)第一次扭體反應(yīng)（扭體反應(yīng)判斷∶腹部?jī)?nèi)凹，軀干與后肢伸展拉長，臀部高起）的時(shí)間和10 min內(nèi)產(chǎn)生扭體反應(yīng)的次數(shù)。

1.5 小鼠熱板性疼痛實(shí)驗(yàn)[2]

雌性KM小鼠，測(cè)定痛閾值（熱板溫度55±0.5℃，以小鼠出現(xiàn)舔后足所需時(shí)間作為該鼠的痛閾值），凡小鼠舔后足時(shí)間小于5 s或大于30 s或跳躍者均棄之，篩選出60只合格的小鼠。陰性對(duì)照組于小鼠雙后足足底涂抹輔料芝麻油0.2 g/只，陽性對(duì)照組涂痔瘡膏0.2 g/只，低劑量組涂抹肛愈膏0.1 g/只，中劑量組涂抹肛愈膏0.2 g/只，高劑量組涂抹肛愈膏0.4 g/只。每天涂藥1次，連續(xù)10 d。于末次涂藥后60 min以溫水清潔小鼠足底，分別測(cè)小鼠痛閾值，如超過60 s仍無反應(yīng)，則以60 s計(jì)算。

1.6 小鼠二甲苯性耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)

60只KM小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組12只。陰性對(duì)照組于小鼠左耳兩面涂抹輔料芝麻油0.2 g/只，陽性對(duì)照組涂痔瘡膏0.2 g/只，低劑量組涂抹肛愈膏0.1 g/只，中劑量組涂抹肛愈膏0.2 g/只，高劑量組涂抹肛愈膏0.4 g/只，各組小鼠右耳均不涂藥。每天涂藥1次，連續(xù)10 d。按照文獻(xiàn)方法[3]，于末次涂藥60 min后，以37℃溫水清潔左耳耳面后，于左耳兩面涂抹二甲苯25 μL/只，30 min后處死小鼠，用9 mm打孔器打下左右耳相同部位耳片稱重，腫脹度為左右耳片重量之差。

1.7 蛋清性大鼠足跖腫脹實(shí)驗(yàn)

60只SD大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組12只。陰性對(duì)照組于大鼠右后足涂抹輔料芝麻油0.2 g/只，陽性對(duì)照組涂痔瘡膏0.2 g/只，低劑量組涂抹肛愈膏0.1 g/只，中劑量組涂抹肛愈膏0.2 g/只，高劑量組涂抹肛愈膏0.4 g/只。每天涂藥1次，連續(xù)10 d。于末次涂藥1 h后以37℃溫水清潔大鼠右后足，用成都泰盟PV-200足趾容積測(cè)量?jī)x測(cè)正常右后足跖容積，于右后足跖皮下注入新鮮雞蛋清，0.1 mL/爪，然后分別于致炎1、3、6 h后測(cè)右后足跖容積，計(jì)算足跖腫脹度和足跖腫脹抑制率。

足腫脹度=[致炎后足跖容積(mL)-致炎前足跖容積(mL)]/致炎前足跖容積(mL)。

足腫脹抑制率=陰性對(duì)照組足跖腫脹度–給藥組足跖腫脹度/對(duì)照組足跖腫脹度。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 對(duì)小鼠扭體反應(yīng)的影響

肛愈膏中、高劑量組和陽性對(duì)照組能延長小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)的平均時(shí)間，減少扭體反應(yīng)的次數(shù)，與陰性對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表1。

表1 肛愈膏對(duì)小鼠扭體反應(yīng)的影響（±s，n=12）

表1 肛愈膏對(duì)小鼠扭體反應(yīng)的影響（±s，n=12）

注：a.表示與陰性對(duì)照組比較，P＜0.05

組別陰性對(duì)照陽性對(duì)照低劑量組中劑量組高劑量組劑量（g/只）0.2 0.2 0.1 0.2 0.4 F P平均扭體次數(shù)20.87±8.37 13.89±7.29a17.87±9.58 15.14±7.85a13.75±6.78a26.899 0.018出現(xiàn)扭體反應(yīng)的平均時(shí)間（min）3.36±2.78 6.36±3.87a4.24±2.89 5.84±3.03a7.04±3.47a39.965 0.011

2.2 對(duì)熱板性疼痛的影響

結(jié)果表2，肛愈膏高劑量組和陽性對(duì)照組均能提高小鼠的痛閾值（s），與陰性對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表2 肛愈膏對(duì)小鼠痛閾值的影響±s，n=12）

表2 肛愈膏對(duì)小鼠痛閾值的影響±s，n=12）

注：a.表示與陰性對(duì)照組比較，P＜0.05

組別陰性對(duì)照陽性對(duì)照低劑量組中劑量組高劑量組劑量（g/只）0.2 0.2 0.1 0.2 0.4 F P給藥后60 min痛閾值（s）26.69±11.44 46.74±23.82a30.4 3±12.53 38.52±19.87a45.66±24.25a24.179 0.013

2.3 對(duì)小鼠耳廓腫脹的影響

結(jié)果表3，肛愈膏中、高劑量組和陽性對(duì)照組均能明顯減輕二甲苯致小鼠耳廓腫脹度，與陰性對(duì)照組比較（P＜0.05）。

表3 肛愈膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響（±s，n=12）

表3 肛愈膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響（±s，n=12）

注：與陰性對(duì)照組比較，a.表示P＜0.05，b.表示P＜0.01

組別陰性對(duì)照陽性對(duì)照低劑量組中劑量組高劑量組劑量（g/只）0.2 0.2 0.1 0.2 0.4 F P耳片腫脹度（mg）9.89±1.75 6.55±1.31b8.67±1.85 7.83±1.45a6.21±1.25b45.875 0.002

2.4 對(duì)大鼠足跖腫脹的影響

結(jié)果表4，肛愈膏低、中、高劑量組和陽性對(duì)照組皮下注射蛋清3、6 h后均能在一定程度上減輕大鼠足跖腫脹度，與陰性對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

痔瘡是肛門直腸底部及肛門粘膜的靜脈叢發(fā)生曲張而形成的一個(gè)或多個(gè)柔軟的靜脈團(tuán)，是一種常見慢性病。中醫(yī)認(rèn)為痔瘡多因飲食不節(jié)，易生濕積熱，濕熱下注肛門，使肛門充血灼痛，引發(fā)痔瘡，或勞累過度，久坐則血脈不行，久行則氣血縱橫，瘀血流注肛門而生痔疾，亦或是便秘，久忍大便，大腸積熱，引發(fā)痔瘡。痔瘡包括內(nèi)痔、外痔、混合痔，常見癥狀有疼痛、出血、流膿、脫出等，治則應(yīng)以祛風(fēng)除濕、清熱解毒、鎮(zhèn)痛抗炎、收斂止血等方法[4]。

黃芪，又名綿芪，為豆科植物莢膜黃芪或蒙古黃芪的干燥根，味甘，微溫，具有利尿排毒、補(bǔ)氣固表、益氣補(bǔ)中、斂瘡生肌的功效，也有較廣泛的抗菌作用[5]。白芷（Angelica dahurica）為傘形科當(dāng)歸屬的植物，具有祛風(fēng)散寒，通竅止痛，消腫排膿，燥濕止帶等功效，用于頭痛、牙痛、腸風(fēng)痔漏、癰疽瘡瘍、皮膚瘙癢等，現(xiàn)代藥理研究表明白芷具有抗炎、鎮(zhèn)痛、解痙、降血和抗菌作用[6]。槐米為豆科植物槐（Sophora japonica L）的干燥花蕾及花，槐米性微寒、味苦，具有潤腸通便、止血涼血的功效，現(xiàn)代藥理研究表明槐米具有抗炎、抗病毒、祛痰、止咳等作用[7]。當(dāng)歸是最常用的中藥之一，具有補(bǔ)血、活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤燥滑腸的作用，能主治血虛諸證、月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉、痛經(jīng)等諸癥。紫草是一種中藥材，性味甘、咸，具有清熱涼血、活血、解毒透疹等功效，具有抗菌、抗炎、避孕、抗腫瘤和降血糖等作用[8]。冰片為龍腦香的樹脂和揮發(fā)油加工品提取獲得的結(jié)晶，可用于用于閉證神昏、用于目赤腫痛，喉痹口瘡、用于瘡瘍腫痛，潰后不斂等。

肛愈膏是由宜賓市第三人民醫(yī)院自行研制的痔瘡膏，主要成份有黃芪、白芷、槐米、當(dāng)歸、紫草和冰片，用于治療痔瘡術(shù)后，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。本實(shí)驗(yàn)選用疼痛和炎癥兩個(gè)模型，觀察肛愈膏的鎮(zhèn)痛抗炎作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，肛愈膏能明顯減少扭體反應(yīng)的平均次數(shù)，提高小鼠對(duì)熱板性疼痛的痛閾值，減輕小鼠耳廓腫脹度和蛋清性大鼠足跖腫脹值，顯示出較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛抗炎作用，對(duì)于痔瘡術(shù)后能改善局部炎癥，緩解疼痛，具有較好的臨床應(yīng)用前景。

表4 肛愈膏對(duì)大鼠蛋清性足跖腫脹的影響（±s，n=12）

注：與陰性對(duì)照組比較，a.表示P＜0.05，b.表示P＜0.01

組別劑量（g/只）致炎前足跖容積(mL)致炎后不同時(shí)間的足跖腫脹度和抑制率/% 1 h3 h6 h陰性對(duì)照陽性對(duì)照低劑量組中劑量組高劑量組0.2 0.2 0.1 0.2 0.4 F P 1.14±0.29 1.08±0.25 0.99±0.24 1.03±0.33 1.09±0.27 3.876 0.987 0.99±0.36（-）0.87±0.34（12.12）0.97±0.28（2.02）0.92±0.26（7.07）0.95±0.17（4.04）6.765 0.638 1.15±0.41（-）0.84±0.32a（26.95）0.96±0.17a（16.52）0.88±0.35a（23.48）0.77±0.22b（33.04）75.782 0.001 0.85±0.19（-）0.39±0.15b（54.12）0.56±0.21b（34.11）0.49±0.24b（42.35）0.45±0.18b（47.06）97.547 0.000

1.蔡曉松，韓翼，龍啟軍.黃柏片輔助預(yù)防痔瘡手術(shù)后感染的臨床研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24(16)：4064-4065，4068.

2.葉綠萍，龐黎明，李德鋼，等.痔瘡消炎膏抗炎鎮(zhèn)痛及促潰瘍面愈合的藥效學(xué)研究[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2014，7(10):752-755.

3.李海清，呂圭源，陳素紅，等.復(fù)方烏連提取物鎮(zhèn)痛、抗炎、止瀉的藥效學(xué)研究[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，38 (4):456-460.

4.譚靜范，秦澎湃.痔的治療技術(shù)現(xiàn)狀與展望[J].中國臨床醫(yī)生，2014，42(5):23-24.

5.郭憲清，張麗香，姜秉榮.黃芪皂苷類組分的現(xiàn)代藥理研究進(jìn)展[J].中國藥業(yè)，2006，15（12）：66-67.

6.朱藝欣，李寶莉，馬宏勝，等.白芷的有效成分提取、藥理作用及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2014，11(31): 159-162,166.

7.李飛，李秋紅，李廷利，等.槐米有效成分含量測(cè)定方法研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息，2008，25(4):19-21.

8.王恒，譚勇，李國玉，等.復(fù)方紫草燒燙傷涂膜劑的制備及質(zhì)量控制[J].中國藥師，2014，(4):673-674,675.

（2015-05-27收稿）

Studies on the analgesia and anti-inflammation effect of Gang-Yu ointment

Tang Hao1,Li Yubo1，Huang Su1，Yang Xiao2，Liu Minghua21The 3rdPeople’s Hospital of Yibin city,Yibin 644000,Sichuan province;2School of Pharmacy of Sichuan Medical University,Luzhou 646000,Sichuan Province,China

Objective：To observe the analgesia and anti-inflammation effect of Gang-Yu ointment. Methods：The analgesic effect was evaluated by hot plant test and wrest body test in mice.The antiinflammation effect was evaluated on mouse auris-swell model induced by dimethylbenzene and rat toe-swell model induced by egg albumin.Results：Gang-Yu ointment can significantly increase the threshold of pain, decrease the number of times of wrest body,and inhibit the swellingness on mouse auris-swell and toe-swell models.Conclusion：Gang-Yu ointment has significant analgesia and anti-inflammatory effect.

Gang-Yu ointment；Analgesia；Anti-inflammation；Wrest body

R285.5

A

10.3969/j.issn.1000-2669.2015.06.009

*四川省宜賓市科技局重點(diǎn)項(xiàng)目（NO:2012SF009）

唐浩(1975-)，男，副主任醫(yī)師，碩士。

劉明華(1972-)，男，教授，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail：99053808@qq.com。