周 靜，朱宇熹

(1.荊楚理工學(xué)院形態(tài)教研室，湖北荊門 448000；2.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤科 400016)

論著·臨床研究

多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測對乳腺癌新輔助化療的臨床價值

周 靜1，朱宇熹2

(1.荊楚理工學(xué)院形態(tài)教研室，湖北荊門 448000；2.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤科 400016)

目的 觀察多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測在乳腺癌新輔助化療治療前后變化，以期發(fā)現(xiàn)敏感性較高的腫瘤標(biāo)志物并評價其臨床價值。方法 將40例健康體檢者(對照組)與64例乳腺癌患者(試驗組)進(jìn)行多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測，評價出具有診斷意義的指標(biāo)。試驗組術(shù)前采取TAC方案化療4周期，治療完成后3周再次進(jìn)行多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測，評價上述指標(biāo)的臨床意義。結(jié)果 癌抗原153(CA153)、癌抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、鐵蛋白(FT)在試驗組的陽性率分別為32%、27%、21%、19%，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。4項指標(biāo)聯(lián)合檢測可提高檢測靈敏度。化療后試驗組CA153、CA125、CEA呈顯著性下降(P<0.05)。結(jié)論 CA153、CA125、CEA、FT可作為乳腺癌輔助診斷的腫瘤標(biāo)志物，其中CA153、CA125、CEA與新輔助化療療效具有一致性，具有臨床價值。

乳腺腫瘤；蛋白芯片；標(biāo)志物；化學(xué)治療

乳腺癌是全世界范圍內(nèi)女性常見的惡性腫瘤之一，在我國其發(fā)病率亦呈上升趨勢，嚴(yán)重威脅女性健康。近年來越來越多的學(xué)者關(guān)注乳腺癌的早期診斷及早期治療，因此腫瘤標(biāo)志物的研究得到臨床高度重視。本研究通過對照研究探討多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片在乳腺癌新輔助化療中的變化，以期發(fā)現(xiàn)具有臨床價值的腫瘤標(biāo)志物，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 64例患者(試驗組)均在2012年3月至2013年8月在荊楚理工學(xué)院第一臨床學(xué)院腫瘤科治療，均為初治女性，且經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)為乳腺癌。年齡27～68歲，平均(41.3±13.6)歲。根據(jù)美國癌癥聯(lián)合委員會制訂標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期，其中ⅡA期15例，ⅡB期19例，ⅢA期13例，ⅢB期17例。所有患者均為初治患者，KPS≥70分，預(yù)計生存時間超過4個月。另 40例健康體檢者(對照組)來自體檢中心自愿受試者。

1.2 方法

1.2.1 儀器和試劑 多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片采用上海數(shù)康生物公司研制開發(fā)的“C-12多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片診斷系統(tǒng)”。

1.2.2 檢測方法 試驗組對象均在化療開始前及治療完成后3周采集靜脈血，分離血清。多腫瘤標(biāo)志物采用蛋白芯片技術(shù)，包括糖鏈抗原(CA19-9)，神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)，癌胚抗原(CEA)，糖鏈抗原242(CA242)，鐵蛋白(FT)，β-人絨毛促性腺素(β-HCG)，甲胎蛋白(AFP)，游離前列腺特異性抗原(Free-PSA)，前列腺特異性抗原(PSA)，癌抗原125(CA125)，生長激素(HGH)，癌抗原153(CA153)。對照組進(jìn)行一次蛋白芯片檢測。

1.2.3 治療方法 采用TAC方案化療：阿霉素50 mg/m2，d1；多西他賽75 mg/m2，d1；環(huán)磷酰胺500 mg/m2，d1，3周使用1次；常規(guī)給予托烷司瓊靜注止吐，多西他賽前給予地塞米松，期間給予G-CSF升白支持?；?個周期后，達(dá)PR或CR者繼續(xù)化療至4個周期后手術(shù)；評價未達(dá)PR者則終止新輔助化療行手術(shù)。終止治療者不作為試驗組對象。

1.2.4 臨床療效評價 參照WHO評估標(biāo)準(zhǔn)：CR 腫塊完全消失；PR 腫塊縮小50%以上；SD腫塊縮小小于50%，或者增大未超過25%；PD 一個或多個病變增加25%以上，或出現(xiàn)新的病變。

1.2.5 腫瘤標(biāo)志物的測定 測定標(biāo)準(zhǔn)均按照試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)比較。

表1 兩組多腫瘤標(biāo)志物各項指標(biāo)統(tǒng)計結(jié)果

2 結(jié)果

2.1 試驗組與對照組蛋白芯片檢測結(jié)果 對所有患者及健康體檢者進(jìn)行多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測結(jié)果，見表1、圖1。

圖1 試驗組16人份蛋白芯片檢測結(jié)果

2.2 試驗組CA153、CA125、CEA、FT及4項聯(lián)合檢測的價值比較 分別計算上述指標(biāo)的靈敏度和特異度，與4項指標(biāo)聯(lián)合檢查相比較，結(jié)果見表2。

表2 試驗組CA153、CA125、CEA、FT及4項聯(lián)合檢測價值比較(%)

2.3 試驗組CA153、CA125、CEA、FT治療前后水平的變化 試驗組64例患者均接受4個周期新輔助化療，將化療前后上述指標(biāo)進(jìn)行比較，結(jié)果見表3。

表3 試組CA153、CA125、CEA、FT治療前后的變化

*：P<0.05，與治療前比較。

3 討論

腫瘤標(biāo)志物由腫瘤組織產(chǎn)生，存在于腫瘤組織本身，或分泌至血液或其他體液中，或因腫瘤組織刺激，由宿主細(xì)胞產(chǎn)生而含量明顯高于正常參考值的一類物質(zhì)。近年來，蛋白組學(xué)及芯片技術(shù)在腫瘤臨床研究中已取得引人矚目的進(jìn)展。多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片診斷技術(shù)因其具有快速、高效、高通量的特點(diǎn)，已逐漸受到重視，并被廣泛應(yīng)用于臨床[1]。

已有文獻(xiàn)報道，應(yīng)用于乳腺癌的血清標(biāo)志物主要有CA153、CA125、CK19、CEA、AFP和CA19-9等，但目前還未發(fā)現(xiàn)可以對乳腺癌進(jìn)行確診的單一指標(biāo)[2]。其中血清CA153是一種在乳腺癌中過度表達(dá)的糖蛋白抗原，也是目前公認(rèn)的診斷乳腺癌比較靈敏的腫瘤標(biāo)志物。有關(guān)CA153在乳腺癌中的陽性表達(dá)不同學(xué)者報道不一，黃文海等[3]報道乳腺癌患者CA153陽性率可達(dá)52.6%。另有報道CA153是監(jiān)測乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)情況的最佳指標(biāo)，對乳腺癌的早期診斷和術(shù)后療效監(jiān)測均有十分重要的臨床價值[4]。本研究中，試驗組患者CA153陽性率為31%，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。另外完成新輔助化療4個周期后，試驗組CA153呈顯著性下降趨勢。結(jié)果表明CA153對乳腺癌的輔助診斷及新輔助化療療效判定有一定意義。

CA125是上皮性卵巢癌抗原被單克隆抗體OC125識別的一種糖蛋白，該抗原在細(xì)胞內(nèi)合成和儲存，當(dāng)組織惡變時轉(zhuǎn)出至細(xì)胞外。目前主要用于卵巢癌的診斷、術(shù)前評估及隨訪[5]。有文獻(xiàn)報道，在乳腺癌患者血清中陽性率占24.0%，尤其是在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者中，血清CA125的陽性率可達(dá)到44．6%[6]。也有研究表明CA125伴隨CEA升高最常見于乳腺癌和結(jié)直腸癌[7]。本研究結(jié)果表明，乳腺癌患者CA125陽性率為27%，與報道基本一致。試驗組治療后CA125亦呈下降趨勢。

CEA是一種具有人類胚胎抗原特異決定簇的酸性糖蛋白，主要存在于胚胎胃腸黏膜上皮與一些惡性組織的細(xì)胞表面，是一個廣譜性的腫瘤標(biāo)志物，可在多種腫瘤中表達(dá)，主要用于消化道腫瘤的診斷和療效評定。另外在乳腺癌、肺癌及其他惡性腫瘤患者的血清中也會升高。有報道稱CA153、CA125、CEA 3項腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測能提高乳腺癌早期診斷的敏感性且有較好的特異性，具有一定的臨床應(yīng)用價值[8]。本研究試驗組CEA陽性率為21%，化療4個周期后亦呈顯著性下降趨勢。

FT是體內(nèi)腺上皮細(xì)胞與中性細(xì)胞所分泌的一種糖蛋白，具有很強(qiáng)的鐵結(jié)合能力，廣泛分布于具有分泌功能的組織及其分泌物中，是人體體液中重要的蛋白成分之一。由于腫瘤會引發(fā)周圍組織損傷壞死，或者含鐵離子在細(xì)胞內(nèi)皮系統(tǒng)中累積導(dǎo)致血液中FT升高。有報道，F(xiàn)T升高在惡性腫瘤患者中顯著高于良性病變患者及健康體檢者，腫瘤組陽性率最高，其次為良性組，不過值得注意的是0.5% 的健康體檢者FT也有升高[9]。本研究結(jié)果顯示，試驗組FT陽性率為19%，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，但在治療前后變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

綜上所述，本研究結(jié)果表明CA153、CA125、CEA、FT在乳腺癌患者的陽性率分別為32%、27%、21%、19%，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。4項聯(lián)合檢測可進(jìn)一步提高陽性率水平，聯(lián)合檢測的意義優(yōu)于單項檢測，上述4項指標(biāo)可輔助乳腺癌的診斷。同時CA153、CA125、CEA 3項指標(biāo)在患者進(jìn)行新輔助化療前后的變化差異有顯著性，具有輔助評價臨床療效的價值。

[1]周建光，楊梅．多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測在腫瘤診斷中的臨床應(yīng)用及研究進(jìn)展[J]．中國醫(yī)學(xué)檢驗雜志，2010，11(3)：165-166.

[2]盧曉峰，張俊英，孫淑明，等．CA153、CA125、CEA、AFP聯(lián)合檢測在乳腺癌診斷中的價值[J]．中國醫(yī)藥指南，2012，10(30)：54-55.

[3]黃文海，陳潤浩，俞建平，等．血清腫瘤標(biāo)志物檢測在乳腺癌診斷中的意義[J]．中國臨床醫(yī)學(xué)，2012，19(3)：323-324.

[4]莊浩．乳腺癌患者手術(shù)治療前后血清CA15-3、CA125和VEGF檢測的臨床意義[J]．放射免疫學(xué)雜志，2010，23(3)：260-261．

[5]Aggarwal P,Kehoe S.Serum tumour markers in gynaecological cancers[J].Maturitas，2010，67(1)：46-53．

[6]Dupom WD，Pad FF,Hartmann WH，et al．Breast cancer risk associated with proliferative breast disease and atypical hyperplasia[J]．Cancer,1993，71(4)：1258-1265．

[7]蔣萱，王東，楊雪琴，等．多腫瘤標(biāo)志物蛋白診斷價值白芯片檢測中CA125對惡性腫瘤的診斷價值[J]．中國腫瘤臨床，2012，39(9)：607-610.

[8]左新華，周斌．CA153、CA125、CEA聯(lián)合檢測在乳腺癌診斷中的應(yīng)用價值[J]．中國醫(yī)藥科學(xué)，2011，1(10)：135-137．

[9]李毅，許明芳，顧咸慶，等．多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測中鐵蛋白在惡性腫瘤中的診斷價值[J]．重慶醫(yī)學(xué)，2012，41(19)：1920-1924.

The clinic value of multi-tumor marker protein chip in breast cancer with neoadjuvant chemotherapy

ZhouJing1,ZhuYuxi2

(1.MedicalSchoolofJingchuCollegeofTechnology,Jingmen,Hubei448000,China;2.DepartmentofOncology,theFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China)

Objective To observe the evaluation of multi-tumor marker protein chip in breast cancer with neoadjuvant chemotherapy,and to find high saitivity tumor makers,then evaluate the clinical significance.Methods Forty health examination persons(control group) and sixty-four breast cancer patients(experimental group) were accepted with multi-tumor marker protein chip inspection,then we evaluated the markers of diagnosis.The experimental group patients were accepted four cycles preoperative chemotherapy with TAC plan,and tested multi-tumor marker protein chip three weeks after therapy.Then we evaluated the clinical significance of the markers above-mentioned.Results The positive rate of CA153,CA125,CEA and FT was 32%,27%,21% and 19% in the experimental group,it indicated significant change compared with the control group (P<0.05).And it indicated significant reducing change of CA153,CA125 and CEA in the experimental group (P<0.05) after therapy.The sensitivity would be increased when the four markers were tested combined.Conclusion CA153,CA125,CEA and FT could be used as assistance diagnosis index;CA153,CA125and CEA could keep consistence to the curative effect of neoadjuvant chemotherapy and have clinical value.

breast neoplasms;protein chip;tumor marker;chemotherapy

周靜(1981-)，講師，碩士，主要從事腫瘤病理研究。

10.3969/j.issn.1671-8348.2015.05.031

R737.9

A

1671-8348(2015)05-0665-02

2014-09-09

2014-11-12)