李曉

[摘 要] 以葡萄砧木'SO4'、'5BB'的試管苗、開(kāi)瓶馴化后的試管苗以及移栽成活的苗木為研究材料，測(cè)定了它們枝條在馴化后的根系活力、可溶性糖、可溶性蛋白、葉綠素含量的變化進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，最終得出結(jié)論。

[關(guān)鍵詞] 葡萄砧木 試管苗 生物學(xué)特性 生理指標(biāo)

[中圖分類號(hào)] S663.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1003-1650 （2015）09-0152-02

砧木，進(jìn)行嫁接栽培，或稱“砧化栽培”，已成為世界各主要葡萄栽培生產(chǎn)國(guó)發(fā)展葡萄的重要舉措口。離體繁殖的試管苗能否大量應(yīng)用于開(kāi)發(fā)生產(chǎn)，取決于試管苗是否有較高的移栽成活率，因此提高試管苗的成活率具有重要的現(xiàn)實(shí)意義和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1閉瓶在恒溫箱中的生長(zhǎng)期為40天的5BB和SO4試管苗。

1.1.2從恒溫箱取出在弱光下訓(xùn)練5天后開(kāi)瓶在強(qiáng)光下訓(xùn)練5天的5BB和SO4試管苗。

1.1.3馴化后成活的生長(zhǎng)期為2個(gè)月的5BB和SO4苗木。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1生根壯苗的培養(yǎng)

1.2.1.1光培煉苗

試管苗生根培養(yǎng)35～40d以后，選擇根長(zhǎng)1～3cm、苗高5cm左右的發(fā)育良好的試管壯苗放在強(qiáng)光下，不打開(kāi)瓶塞，使試管苗在自然強(qiáng)光的照射下鍛煉3～5d，在一定程度上提高移栽成活率。

1.2.1.2透氣煉苗經(jīng)過(guò)二次煉苗后，試管苗的根系數(shù)量增多，部分有側(cè)根，活力提高；葉片光合能力增強(qiáng)。鍛煉過(guò)程中因光照漸強(qiáng)，易致高溫，故應(yīng)遮蔭。

1.2.2過(guò)渡移栽

1.2.2.1移栽基質(zhì)的準(zhǔn)備

用蛭石和珍珠巖的比例為3：1的基質(zhì)混勻并參雜熟化且含有機(jī)質(zhì)多的表土，腐熟好的牛、羊、馬糞，粗細(xì)均勻、透氣性好的沙，拌勻過(guò)篩待用。對(duì)基質(zhì)進(jìn)行高壓、烘烤或藥劑滅菌，同時(shí)還需定期使用一定濃度的殺菌劑，以便更有效地保護(hù)幼苗，如濃度800～1000倍的多菌靈、托布津等，噴藥間隔宜7～10d一次。裝填育苗缽時(shí)要把袋底裝上營(yíng)養(yǎng)土至1/4處，待用。

1.2.2.2移栽技術(shù)

將生根試管苗小心從瓶中取出，在20攝氏度的水中浸泡約十分鐘，換水兩次洗凈根部的培養(yǎng)基，在生根劑溶液中浸根3～5分鐘，栽于準(zhǔn)備好的育苗缽中，每個(gè)育苗缽中栽植1株，移栽前，先將基質(zhì)澆透水，然后用鑷子或細(xì)竹筷夾住苗后種植在育苗缽內(nèi)，移栽過(guò)程需注意不窩根、不繞根、不傷葉試管苗根部，使根均勻分布于育苗缽中，再用基質(zhì)填滿剩余3/4的空間，裝滿后在地上輕墩幾下使苗根于營(yíng)養(yǎng)土貼緊，土面距營(yíng)養(yǎng)缽邊沿1cm左右，最后澆足定根水，噴灑一定劑量的殺菌劑，置于陽(yáng)光充足、平整、潮濕的地面上，用塑料小拱棚保濕，大約十五天左右。

1.2.2.3苗期管理

這是影響移植成活率的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，特別注意以下幾方面

第一，保濕并適當(dāng)遮蔭。保持移栽環(huán)境內(nèi)空氣相對(duì)濕度達(dá)到80%～95%。但基質(zhì)中的水分不宜過(guò)多，否則會(huì)使苗根頸處濕度過(guò)大，感染雜菌而爛莖死亡。故宜采用在移栽苗葉面和小拱棚內(nèi)空間內(nèi)人工噴細(xì)霧的方法，噴霧次數(shù)依外界天氣情況而定。移栽后還要注意遮蔭，避免中午強(qiáng)光直射，使棚內(nèi)溫度保持在25℃，最高不超過(guò)30℃。

第二，通風(fēng)。 移植后1周開(kāi)始通風(fēng)，早期只在溫度過(guò)高時(shí)通風(fēng)，每次1～2h，以后逐漸延長(zhǎng)通風(fēng)時(shí)間直至完全揭除棚膜，此時(shí)新的根系生長(zhǎng)。同時(shí)還需人工噴霧，保持拱棚內(nèi)一定的空氣濕度。揭棚10～15d后才可進(jìn)行常規(guī)管理。

第三，防病保苗。移栽苗在高溫，高濕，弱光條件下，最易感病菌。主要在根頸褐變和腐爛，地上部分枯萎后死亡。一般在移苗前使用800倍液多菌靈對(duì)介質(zhì)進(jìn)行消毒的解決方案，移栽后立即與一定濃度的撲海菌、多菌靈等殺菌劑進(jìn)行根灌或噴施，成活后每周處理1次，并每次配合追施由大量，微量鐵鹽組成液肥和水。

1.2.3生理指標(biāo)的測(cè)定

1.2.3.1葉綠素：用80%的丙酮提取法測(cè)定；

1.2.3.2植物體內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)：用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測(cè)定；

1.2.3.3可溶性糖：用葸酮法測(cè)定；

1.2.3.4根系活力：用甲烯藍(lán)法測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄砧木品種在不同時(shí)期的葉片可溶性糖含量

由圖知，品種5BB在整個(gè)馴化時(shí)期中可溶性糖的含量都高于SO4。不同葡萄砧木和品種的植物組織和細(xì)胞可溶性糖含量與其抗寒性密切相關(guān)，可溶性糖含量越高，增加的幅度越大，則植物抗寒性越強(qiáng)，所以，5BB較適應(yīng)寒冷的氣候并能茁壯成長(zhǎng)。

圖1. 兩個(gè)品種在處理中的可溶性糖含量（%）差異

2.2 葡萄砧木品種在不同時(shí)期的根系活力

葡萄砧木試管苗在瓶?jī)?nèi)生根，生長(zhǎng)速度較快，5～7天即伸入培養(yǎng)基內(nèi)，移栽時(shí)部分成褐色，已栓質(zhì)化，一段時(shí)間后葡萄砧木試管苗能迅速長(zhǎng)出大量的新根，蒸騰速率恢復(fù)，吸收功能大幅提高，逐漸滿足地上部分對(duì)水分和養(yǎng)分的需求，小苗開(kāi)始生長(zhǎng)。由圖知，品種5BB在馴化的過(guò)程中根系的活力較強(qiáng)，移栽過(guò)程中較易恢復(fù)生長(zhǎng)。

圖2. 兩個(gè)品種在處理中的根系活力的差異

2.3 葡萄砧木品種在不同時(shí)期葉片的蛋白質(zhì)含量

S04在每個(gè)馴化階段的蛋白質(zhì)含量顯著高于5BB且變化差異較5BB小，可溶性蛋白的親水性較強(qiáng)，能明顯增強(qiáng)細(xì)胞的持水力，其含量的增加可以使細(xì)胞束縛更多的水分，還可以減少原生質(zhì)因結(jié)冰而傷害致死的機(jī)率，從而提高其抗寒性。所以砧木SO4比5BB較適應(yīng)寒冷的地區(qū)移栽。

圖3. 兩個(gè)品種在處理中可溶性蛋白質(zhì)含量（%）的變化差異

2.4 葡萄砧木品種在不同時(shí)期葉片的葉綠素含量

在馴化過(guò)程中，葡萄試管苗氣孔開(kāi)張度逐漸減小，蒸騰速率大幅度降低，光飽和點(diǎn)逐漸上升，所以最大凈光合速率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，葉綠素濃度逐漸增加。由圖知，兩者的葉綠素含量均有上升的趨勢(shì)，5BB葉片內(nèi)葉綠素含量稍高于SO4。

圖4. 兩個(gè)品種在處理中葉綠素含量的變化差異

3 討論

萄砧木品種在生長(zhǎng)環(huán)境相同的情況下， 硬枝扦插困難，一方面受基因控制，另一方面，扦插時(shí)間和栽培技術(shù)措施也有一定的影響。實(shí)驗(yàn)中兩個(gè)品種的各個(gè)生理指標(biāo)與成活率雖然呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系，但是試驗(yàn)所用的材料的種類還是相對(duì)較少，實(shí)驗(yàn)規(guī)模有限，因此還有待于擴(kuò)大實(shí)驗(yàn)樣本的容量，進(jìn)一步研究其他品種。試驗(yàn)中雖然經(jīng)過(guò)馴化后移栽到基質(zhì)中的葡萄試管苗成活了，但是其長(zhǎng)勢(shì)非常微弱，尤其是品種SO4，經(jīng)過(guò)觀察其長(zhǎng)出的新根特別少。這種情況也不是移栽中的難題，早有研究認(rèn)為，葡萄插條在10℃以上才能發(fā)根，20～28℃發(fā)根速度加快。葡萄根原基形成所需要的溫度較萌芽高。在12℃條件下，中柱鞘活動(dòng)極為緩慢，在25℃～28℃時(shí)最適宜其活動(dòng)、分裂、能快速形成新根。

4 總結(jié)

砧木5BB在整個(gè)馴化過(guò)程中可溶性糖的含量、含量的增加幅度都高于SO4且各階段間的根系的活力較強(qiáng)，葉片內(nèi)葉綠素含量稍高于SO4。SO4在每個(gè)馴化階段的蛋白質(zhì)含量顯著高于5BB，且蛋白質(zhì)含量變化差異較5BB小，綜合比較，砧木5BB的長(zhǎng)勢(shì)較SO4的好。