王雨，林志健，張冰，聶安政，周月，朱春勝，牛紅娟，王雪潔

（北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100029)

研究報(bào)告

龍城和迪法克鵪鶉血清尿酸生理值范圍探討

王雨，林志健，張冰*，聶安政，周月，朱春勝，牛紅娟，王雪潔

（北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100029)

目的探討不同品系、性別鵪鶉血清尿酸值生理值范圍。方法收集本實(shí)驗(yàn)室前期11批不同品系、性別鵪鶉的血清尿酸值，動(dòng)態(tài)觀察其血清尿酸的含量變化，利用醫(yī)學(xué)參考值的方法對(duì)收集到數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果雄性迪法克鵪鶉血清尿酸的平均值為（221.06±79.59)μmol/L，血清尿酸水平參考值范圍為（87.32～382.34)μmol/L；雌性迪法克鵪鶉血清尿酸的平均值為（189.85±68.58)μmol/L，血清尿酸水平參考值范圍為（72.72～369.73)μmol/L；雄性龍城鵪鶉血清尿酸的平均值為（217.22±72.91)μmol/L，血清尿酸水平參考值范圍為（82.92～360.24)μmol/L，雌性龍城鵪鶉血清尿酸的平均值為（197.27±66.84)μmol/L，血清尿酸水平參考值范圍為（95.36～348.73)μmol/L。通過(guò)對(duì)不同品系雄雌鵪鶉血清尿酸值的比較，發(fā)現(xiàn)雌性鵪鶉的血清尿酸值均低于雄性鵪鶉，差異有顯著性（P＜0.01)；通過(guò)對(duì)不同品系雌雄鵪鶉各日齡組的比較，發(fā)現(xiàn)不同品系雌雄鵪鶉各日齡組間的血清尿酸值差異無(wú)顯著性。結(jié)論明確了不同品系、性別鵪鶉血清尿酸水平變化范圍。

鵪鶉；尿酸；生理值

尿酸作為一種還原性物質(zhì)參與人體內(nèi)的氧化還原過(guò)程，正常范圍內(nèi)的尿酸具有抗氧化、抗DNA損傷等生理功能，一旦超出其正常范圍可能導(dǎo)致高尿酸血癥，特別是近年來(lái)，隨著現(xiàn)代生活水平的不斷提高，人們生活習(xí)慣、飲食結(jié)構(gòu)的改變，糖、脂、蛋白質(zhì)的大量攝入，高尿酸血癥的患病率不斷升高，并有年輕化的趨勢(shì)[1］，有研究顯示高尿酸血癥與肥胖、高血壓、高脂血癥、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、胰島素抵抗的發(fā)生密切相關(guān)，已成為識(shí)別代謝綜合征的早期標(biāo)志[2］。因此，為了對(duì)高尿酸血癥進(jìn)行進(jìn)一步研究，一個(gè)合理穩(wěn)定的動(dòng)物模型及模型動(dòng)物尿酸指標(biāo)參考值的建立至關(guān)重要。近五十多年來(lái)，鵪鶉作為新型實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ捅挥糜诟骷膊☆I(lǐng)域，因其與人類(lèi)相似的嘌呤核苷酸代謝途徑，有報(bào)道將鵪鶉作為塑造高尿酸血癥首選動(dòng)物模型[3、4］。然而，目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于鵪鶉尿酸生理值范圍鮮有報(bào)道，本文主要報(bào)道不同品系、性別鵪鶉的血清尿酸值，并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析得出其參考值范圍，以期為實(shí)驗(yàn)研究提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

迪法克鵪鶉、龍城鵪鶉共11批，其中雄性迪法克鵪鶉42只，雌性迪法克鵪鶉22只；雄性龍城鵪鶉73只，雌性龍城鵪鶉43只，均為6～14周齡，均購(gòu)自北京種禽公司德嶺鵪鶉廠。收集本實(shí)驗(yàn)室前期測(cè)得的這11批6～14周齡不同品系、性別鵪鶉的血清尿酸值共1160例，各值均源于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組數(shù)據(jù)，其中雄性迪法克鵪鶉287例，雌性迪法克鵪鶉180例，雄性龍城鵪鶉408例，雌性龍城鵪鶉285例。

1.1.2 檢測(cè)試劑盒與儀器

Sunrise酶標(biāo)儀，瑞士Teacan公司；尿酸檢測(cè)試劑盒（尿酸酶比色法)，批號(hào):141181，均購(gòu)自中生北控生物科技股份有限公司。

1.2 飼養(yǎng)環(huán)境條件

各批實(shí)驗(yàn)均于北京中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物室進(jìn)行，自由攝食，實(shí)驗(yàn)室溫（24±1)℃，濕度40% ～70%，鵪鶉育成料由北京種禽公司德嶺鵪鶉廠提供，配方:玉米52%，豆粕25%，骨粉與微量元素各6%，石粉5%，棉籽殼和麩皮各3%。

1.3 方法

1.3.1 血液采集方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均禁食不禁水12 h，頸靜脈取血，3000 r/min離心10 min，分離血清后進(jìn)行生化指標(biāo)檢驗(yàn)。

1.3.2 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)在SAS 9.2軟件中統(tǒng)計(jì)，所有數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)分布和方差齊性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布且方差齊的使用醫(yī)學(xué)參考值法，不符合正態(tài)分布或不滿足方差齊性檢驗(yàn)使用百分位數(shù)法[16］，以此確定正常值范圍。兩組數(shù)據(jù)的比較根據(jù)各組正態(tài)及方差齊與否選擇雙尾t檢驗(yàn)或是非參數(shù)檢驗(yàn)，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多組數(shù)據(jù)比較根據(jù)各組正態(tài)及方差齊與否選擇ANOVA分析或非參數(shù)檢驗(yàn)，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩品系雌雄鵪鶉不同日齡體重統(tǒng)計(jì)結(jié)果

據(jù)表1可見(jiàn)，兩品系雌雄鵪鶉體重呈持續(xù)穩(wěn)定增長(zhǎng)，相同日齡下龍城雌雄鵪鶉體重均低于迪法克雌雄鵪鶉。

2.2 同一品系雌雄鵪鶉血清尿酸值結(jié)果分析

結(jié)果顯示，雌性龍城鵪鶉的血清尿酸值低于雄性龍城鵪鶉，差異有顯著性（P＜0.01)。雌性迪法克鵪鶉的血清尿酸值低于雄性迪法克鵪鶉，差異有顯著性（P＜0.01)。同時(shí)，雄性龍城鵪鶉和雄性迪法克鵪鶉血清尿酸值差異無(wú)顯著性（P＞0.05)，雌性龍城鵪鶉和雌性迪法克鵪鶉血清尿酸值差異無(wú)顯著性（P＞0.05)。見(jiàn)表2。

表1 兩品系雌雄鵪鶉不同日齡體重統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，g)Tab.1 The body weight ofmale and female quails on different days

表1 兩品系雌雄鵪鶉不同日齡體重統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，g)Tab.1 The body weight ofmale and female quails on different days

注:相同日齡同性別不同品系比較*P＜0.05，**P＜0.01。Note.Comparison between different strains of the same day-age and gender，*P＜0.05，**P＜0.01.

日齡 ♂♀Age（days)龍城Longcheng 42 148.99±9.84 131.99±8.87**157.4±20.11 137.86±10.71 49 152.62±11.5 132.88±9.13**174.59±23.37 149.25±14.05 56 165.26±13.59 142.52±10.5**195.38±20.67 172.25±17.57 63 173.24±20.64 144.50±9.94**212.04±18.35 186.81±15.03 70 169.34±10.87 144.26±10**209.17±20.64 190.72±15.62 77 171.49±11.18 145.61±9.76**214.89±19.69 192.1±16.38 84 174.99±11.94 147.02±10**217.2±19.75 190.13±14.21 91 172.51±12.25 145.80±10.26**213.82±20.07 188.61±15.52迪法克Difake龍城Longcheng迪法克Difake

2.4 兩品系雌雄鵪鶉不同日齡組血清尿酸統(tǒng)計(jì)分析

由表3可見(jiàn)經(jīng)ANOVA分析或非參數(shù)檢驗(yàn)，迪法克雌雄鵪鶉和龍城雌雄鵪鶉各日齡組間血清尿酸值差異均無(wú)顯著性（P＞0.05)。

表2 兩品系雌雄鵪鶉血清尿酸統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，μmol/L)Tab.2 The serum uric acid inmale and female quails

表2 兩品系雌雄鵪鶉血清尿酸統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，μmol/L)Tab.2 The serum uric acid inmale and female quails

注:雌雄性別比較*P＜0.05**P＜0.01。Note.Comparison betweenmale and female quails，*P＜0.05**P＜0.01.

品系Strains參考范圍Reference range龍城Longcheng 雄性 217.22±72.91 82.92～360.24雌性 197.27±66.84**95.36～348.73迪法克Difake 雄性 221.06±79.59 87.32～382.34雌性 189.85±68.58**72.72～369.73性別Genders尿酸Uric acid

表3 兩品系雌雄鵪鶉不同日齡組血清尿酸統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，μmol/L)Tab.3 The serum uric acid in male and female quails in the age of different days

表3 兩品系雌雄鵪鶉不同日齡組血清尿酸統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，μmol/L)Tab.3 The serum uric acid in male and female quails in the age of different days

日齡 ♂♀Age（days)龍城Longcheng 42 259.15±93.65 213.32±77.16 184.11±64.83 193.10±64.60 49 237.08±103.39 221.70±79.52 199.45±67.94 220.21±86.87 56 217.20±82.37 204.04±68.92 210.13±80.90 189.55±61.83 63 214.67±76.32 206.13±70.41 224.21±81.49 209.06±70.65 70 220.33±64.60 225.19±70.34 184.95±70.97 184.58±58.97 77 198.66±67.43 215.73±71.83 172.46±67.25 205.48±65.49 84 203.51±81.11 243.89±80.34 156.36±46.39 196.43±57.90 91 198.34±52.08 220.90±55.15 177.45±69.82 170.02±44.82迪法克Difake龍城Longcheng迪法克Difake

3 討論

高尿酸血癥動(dòng)物模型主要有大鼠、小鼠及禽類(lèi)動(dòng)物如雞和鵪鶉，不同動(dòng)物造模各有特點(diǎn)。嚙齒類(lèi)動(dòng)物大鼠、小鼠廣泛用于高尿酸血癥動(dòng)物模型，但其體內(nèi)含有尿酸酶，尿酸酶可將尿酸轉(zhuǎn)化為更易溶于水的尿囊素排出體外，這與人類(lèi)的代謝途徑相差較大，造模較困難，并且模型維持時(shí)間較短。自1992年即有研究者利用基因工程技術(shù)破壞尿酸酶基因，獲得尿酸酶缺乏的突變小鼠，雖然尿酸水平極顯著升高，但價(jià)格昂貴，操作復(fù)雜，對(duì)腎臟損傷嚴(yán)重，死亡率高。亦有注射外源性尿酸的相關(guān)造模報(bào)道，均維持時(shí)間較短。禽類(lèi)動(dòng)物體內(nèi)不含尿酸酶，與人類(lèi)的嘌呤核苷酸代謝途徑相似度較高，大部分以尿酸的形式從尿中排出，僅有很少一部分（約為1/20)被分解為尿囊素、氨等，故可將禽類(lèi)動(dòng)物應(yīng)用于高尿酸血癥模型的建立[5］。鵪鶉，屬鳥(niǎo)綱（Aves)，雞形目（Callformes)，雉科（Phasianidae)，鶉（Coturnix)，其學(xué)名為Coturnix japonica，是雞形目中較小的一種家禽，結(jié)合飼養(yǎng)以及實(shí)驗(yàn)操作的可行性可作為高尿酸血癥較理想的動(dòng)物模型。在實(shí)驗(yàn)研究中，對(duì)血液生化指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)，不僅需要與空白對(duì)照組的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，還需與其正常參考值進(jìn)行比較，才能更好地進(jìn)行判斷，臨床上對(duì)不同人群的血液生化指標(biāo)進(jìn)行了研究并給出了正常值的參考范圍，對(duì)于常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大小鼠亦有血液生化指標(biāo)參考值的報(bào)道。陳奇等[6］對(duì)嚙齒類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大小鼠的血尿酸值進(jìn)行了研究，給出了大鼠血尿酸參考值范圍為15～21 mg/dL，小鼠血尿酸參考值范圍為17～28 mg/dL，而對(duì)于禽類(lèi)動(dòng)物的血尿酸值參考范圍鮮有報(bào)道，迄今只有兩篇文獻(xiàn)對(duì)鵪鶉的血尿酸的測(cè)定進(jìn)行了研究[7、8］，因此，鵪鶉血尿酸正常參考值的探討對(duì)于高尿酸血癥的研究具有十分重要的意義。

本實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)鵪鶉的飼養(yǎng)環(huán)境與條件給出了規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，室溫為（24±1)℃，濕度為40% ～70%，每天給予12 h的光照，飼料均為北京種禽公司德嶺鵪鶉廠提供的鵪鶉育成料，從而保證實(shí)驗(yàn)鵪鶉穩(wěn)定的正常生活狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)室前期亦對(duì)不同造模劑及其不同劑量誘導(dǎo)鵪鶉高尿酸血癥進(jìn)行了系統(tǒng)的觀察，發(fā)現(xiàn)15 g/（kg·d)酵母食餌誘導(dǎo)的鵪鶉高尿酸血癥模型具有血尿酸異常出現(xiàn)時(shí)間較早，模型穩(wěn)定、重復(fù)性好，實(shí)驗(yàn)操作方便，肝腎功能無(wú)明顯損害、與人類(lèi)飲食結(jié)構(gòu)改變相類(lèi)似等特點(diǎn)，可以作為尿酸紊亂的較理想的實(shí)驗(yàn)對(duì)象[9-11］。目前常用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的鵪鶉的品系有朝鮮龍城鵪鶉及法國(guó)迪法克鵪鶉，本實(shí)驗(yàn)室亦對(duì)不同品系、不同性別的鵪鶉及其造模特征進(jìn)行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)雄性迪法克鵪鶉在喂飼15 g/（kg·d)酵母食餌7 d后其血清尿酸水平顯著升高，并可持續(xù)升高至第32天[12］，雌性迪法克鵪鶉在喂飼15 g/（kg·d)酵母食餌7 d后其血清尿酸水平顯著升高，并可持續(xù)升高至第28天[13］。

流行病學(xué)研究顯示成年男性的血尿酸水平顯著高于閉經(jīng)前女性的血尿酸水平[14］，這與本研究結(jié)果中雄性迪法克鵪鶉血尿酸值顯著高于雌性迪法克鵪鶉相似，Hosoyamada等[15］研究證實(shí)雌激素可通過(guò)調(diào)節(jié)尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白促進(jìn)尿酸排泄，故本研究結(jié)果可能與雌激素存在一定關(guān)系，其具體機(jī)理需要進(jìn)一步探討。本研究結(jié)果亦顯示兩種品系雌雄鵪鶉不同日齡組間的血清尿酸值差異無(wú)顯著性，且各組血清尿酸值波動(dòng)較穩(wěn)定，這亦提示鵪鶉可作為高尿酸血癥合理穩(wěn)定的動(dòng)物模型。本文初步建立不同品系、性別鵪鶉的尿酸參考值范圍，可為鵪鶉應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供一定的參考，豐富其生物信息庫(kù)，從而滿足臨床醫(yī)學(xué)和藥理研究的需要。

[1］ 中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)心血管內(nèi)科醫(yī)師分會(huì).無(wú)癥狀高尿酸血癥合并心血管疾病診治建議中國(guó)專(zhuān)家共識(shí)[J］.中國(guó)醫(yī)學(xué)前沿雜志，2010，2（3):49-55.

[2］ 高麗娟，傅曉英.高尿酸血癥與代謝綜合征及其各組分關(guān)系的研究進(jìn)展[J］.新醫(yī)學(xué)，2011，42（4):276-278.

[3］ 張冰，劉小青，胡京紅，等.鵪鶉高血尿酸高甘油三酯血癥模型塑造 [J］.中國(guó)病理生理雜志，2003，19（8):1148-11501.

[4］ Huss D，Poynter G，Lansford R，Japanese quail（Coturnix japonica)as a laboratory animalmodel[J］.Lab Animal，2008， 37（11):513-519.

[5］ 林志健，張冰，黃勝男，李麗玉.高尿酸血癥并腹型肥胖動(dòng)物模型研究進(jìn)展[J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2014，22（4):81 -85.

[6］ 陳奇.中藥藥理研究方法學(xué) [M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2011:1188

[7］ 劉珍清，王曉波，劉穎，等.鵪鶉血清中脂類(lèi)代謝相關(guān)生化指標(biāo)正常參考值的測(cè)定[J］.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)，2012，29（5): 33-36.

[8］ 劉珍清，高新顏，李慧，等.正常鵪鶉血清血糖、甘油三酯、尿酸參考值生化測(cè)定[J］.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)，2007，24（2):27 -28，31.

[9］ 劉小青，張冰，劉春梅，等.鵪鶉高血尿酸血癥模型建立初探[J］.中國(guó)病理生理雜志，2001，17（10):1038-1040.

[10］ 劉小青，張冰，胡京紅，等.鵪鶉高血尿酸血癥模型建立及菊苣提取物對(duì)其影響的實(shí)驗(yàn)研究 [J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2003，23（1):44～47.

[11］ Akkasilpa S，Avihingsanon Y，Hanvivadhanakul P，et al.Clinicalmanifestations of patientswith hyperuricemia[J］.JMed Assoc Thai，2004，87（Suppl2):41-44.

[12］ 薩翼.高尿酸及高尿酸高甘油三酯血癥的模型研究及菊苣提取物對(duì)其干預(yù)機(jī)制[D］.北京:北京中醫(yī)藥大學(xué)，2004:48 -50.

[13］ 楊紅蓮，張冰，劉小青，等.雌性鵪鶉高尿酸血癥模型研究[J］.遼寧中醫(yī)雜志，2009，36（1):6-8.

[14］ Jing Fang.Michael HA.血清尿酸與心血管病死亡率.1971—1992年首次國(guó)民健康與營(yíng)養(yǎng)狀況普查及流行病學(xué)隨訪研究[J］.美國(guó)醫(yī)學(xué)會(huì)雜志中文版，2001，20（2):53-59

[15］ Kullberg BJ，van’tWout JW，van Furth R，etal.Roleofgranulocytes in increased host resistance to Candida albicans induced by recombinant interleukin-1[J］.Infect Immun，1990，58: 3319-3324.

[16］ 孫振球.醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)[M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2010:23 -24.

Normal range of serum uric acid in quails of different strains and genders

WANG Yu，LIN Zhi-jian，ZHANG Bing*，NIE An-zheng，ZHOU Yue，ZHU Chun-sheng，NIU Hong-juan，WANG Xue-jie
（Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China)

ObjectiveTo explore the normal range of serum uric acid in quails.M ethodThe data were collected from male and female quails of different strains in 11 experiments，and analyzed by the way ofmedical reference value.ResultThemean value of serum uric acid ofmale Difake strain quails was（221.06±79.59)μmol/L，and the normal range was（87.32 to 382.34)μmol/L.Themean value of serum uric acid of female Difake strain quails was（189.85± 68.58)μmol/L，and the normal range was（72.72 to 369.73)μmol/L.The mean value of serum uric acid of male Longcheng strain quailswas（217.22±72.91)μmol/L，and the normal range was（82.92 to 360.24)μmol/L.Themean value of serum uric acid of female Longcheng strain quails was（197.27±66.84)μmol/L，and the normal range was（95.36 to 348.73)μmol/L.The serum uric acid value of female quails was significantly lower than that ofmale quails. There was no significant difference in the value of serum uric acid between female and male quails from each day-age groups.ConclusionsThis study has established the normal ranges for serum uric acid in quails of different strains and genders.

Quail；Uric acid；Normal range

Q95-33

A

1005-4847（2015)06-0582-04

10.3969/j.issn.1005-4847.2015.06.007

2015-09-16

國(guó)家自然科學(xué)基金資助課題（81403152)；教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專(zhuān)項(xiàng)科研基金（20130013120001，20120013130002)；北京中醫(yī)藥大學(xué)青年教師專(zhuān)項(xiàng)自主課題（2013-QNJSZX008)；北京中醫(yī)藥大學(xué)科研創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)（2011-CXTD-014)。

王雨（1991-)，女，碩士研究生，研究方向:中藥防治代謝性疾病研究，E-mail:wangyuxh@163.com。

張冰（1959-)，女，教授/主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師，研究方向:中藥防治代謝性疾病研究，E-mail:zhangbing6@263.net。