羅 琳，鄧叔華，易 健，周賽男，佘 顏，劉柏炎，2

(1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)沙 410208;2.益陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校，益陽(yáng) 413000)

腦卒中是一種對(duì)人類(lèi)健康和生命安全造成極大威脅的難治性疾病，具有高發(fā)病率、高致殘率和高死亡率的特點(diǎn)。卒中不僅導(dǎo)致患者運(yùn)動(dòng)功能障礙出現(xiàn)偏癱，同時(shí)患者也出現(xiàn)不同程度的心理、認(rèn)知和語(yǔ)言功能的障礙，產(chǎn)生一系列情感行為學(xué)方面的變化，稱(chēng)為腦卒中后抑郁(post－stroke depression，PSD)。PSD是卒中后最常見(jiàn)和最嚴(yán)重的神經(jīng)精神并發(fā)癥之一，約有1/3的腦卒中患者出現(xiàn)抑郁癥狀［1］，不但嚴(yán)重影響患者神經(jīng)功能的康復(fù)，顯著降低患者的生活質(zhì)量，而且死亡率高達(dá)非PSD患者的3～4倍［2］。因此，對(duì)PSD患者進(jìn)行早期而有效的防治具有非常重要的現(xiàn)實(shí)和社會(huì)意義。抑郁癥的顯著特征之一是行為學(xué)的改變，其也是檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中抑郁動(dòng)物模型成功與否的重要指標(biāo)，本研究采用復(fù)合法制備腦卒中后抑郁大鼠模型，通過(guò)中藥補(bǔ)陽(yáng)還五湯的干預(yù)，并用氟西汀作對(duì)照，分別在應(yīng)激前和應(yīng)激后7 d、14 d和21 d進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，以期動(dòng)態(tài)觀察補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)腦卒中后大鼠行為學(xué)的影響。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)環(huán)境

SPF級(jí)雄性SD大鼠60只，體重(220～250)g，購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，生產(chǎn)許可證號(hào)［SCXK(湘)2011－0005］。飼養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心SPF級(jí)飼養(yǎng)間內(nèi)，使用許可證號(hào):［SYXK(湘)2008－0003］。

1.2 藥物與儀器

補(bǔ)陽(yáng)還五湯處方組成:黃芪120 g，歸尾6 g，赤芍 4.5 g，紅花 3 g，川芎 3 g，桃仁 3 g，干地龍 3 g。藥材均購(gòu)自湖南中醫(yī)藥大學(xué)附屬一醫(yī)院門(mén)診藥房，藥劑水煎濾出藥渣濃縮成每毫升含生藥2 g，冷藏待用;鹽酸氟西汀膠囊:禮來(lái)蘇州制藥有限公司，藥品批號(hào):國(guó)藥準(zhǔn)字J20080016。SMART2.5系統(tǒng)及立柱體曠場(chǎng)箱設(shè)備(深圳市瑞沃德生命科技有限公司)，WD－9405B型水平搖床(北京市六一儀器廠)，穿梭箱(西班牙Panlab公司)。

1.3 分組與給藥

大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，1周后測(cè)曠場(chǎng)試驗(yàn)(openfield test，OFT)基線值，選擇評(píng)分相近的大鼠60只隨機(jī)分為:假手術(shù)組、卒中組、PSD組、補(bǔ)陽(yáng)還五湯組、氟西汀組，共5組，每組12只。假手術(shù)組、卒中組每籠飼養(yǎng)6只，其余各組每籠飼養(yǎng)1只。給藥時(shí)間為21 d，從應(yīng)激后第1天開(kāi)始，每天灌胃1次，每周測(cè)體重1次，根據(jù)體重變化更新劑量。補(bǔ)陽(yáng)還五湯組每日灌胃1次，用量為13.26 mg/kg補(bǔ)陽(yáng)還五湯藥液(按體表面積計(jì)算相當(dāng)60 kg成人用量的3倍);氟西汀組予氟西汀溶液每日等容積混懸液灌胃1次，用量為1.54 mg/kg;余下各組均每日等容積灌胃蒸餾水10 mL/kg灌胃。

1.4 模型制備

采用大腦中動(dòng)脈栓塞法(middle cerebral artery occlusion，MCAO)制備腦缺血大鼠模型，并在此基礎(chǔ)上，給予孤養(yǎng)和慢性不可預(yù)知的溫和應(yīng)激法(chronic unpredictable mild stress，CUMS)聯(lián)合制備PSD模型。腦缺血大鼠模型:參照 Zea－Longa文獻(xiàn)［3］制備右側(cè)大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)大鼠模型，動(dòng)物術(shù)后參照Bederson［4］的5分制法對(duì)術(shù)后清醒大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分，分值在l～3分者入組，死亡不足動(dòng)物再隨機(jī)補(bǔ)充。假手術(shù)組動(dòng)物，除在手術(shù)過(guò)程中不插入錢(qián)栓以外，其他的過(guò)程相同。⑵CUMS模型:術(shù)后參照文獻(xiàn)［5］方法略加改進(jìn):①禁食禁水21 h;②行為限制30 min;③45°傾斜鼠籠24 h;④晝夜顛倒24 h;⑤水平搖晃5 min;⑥濕籠(100 g鋸屑加200 mL水)24 h;⑦聲電刺激(電壓0.9mA)8次/只等7種。每天隨機(jī)選取一種應(yīng)激，相同應(yīng)激不連續(xù)出現(xiàn)，每種應(yīng)激出現(xiàn)3次共21 d。假手術(shù)組除每天抓取1次外，不做其他處理。⑶孤養(yǎng):大鼠單籠飼養(yǎng)。

1.5 行為學(xué)檢測(cè)

1.5.1 體重檢測(cè):在術(shù)前1d和 CUMS后第7、14、21天對(duì)各組大鼠進(jìn)行體重測(cè)量。

1.5.2 神經(jīng)功能評(píng)分:除假性手術(shù)組外，其余各組于CUMS后第 7、14、21天運(yùn)用 Ayelet Levy評(píng)分法［6］評(píng)價(jià)各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能恢復(fù)情況。評(píng)分:(1)提住尾巴將小鼠逐漸提高:前肢屈曲1分，后肢屈曲1分，30s內(nèi)頭移動(dòng)與縱軸形成角度＞10°1分;(2)將小鼠置于地面:正常爬行0分，無(wú)法直線爬行1分，沿患側(cè)轉(zhuǎn)圈2分，患側(cè)跌倒3分;(3)梁平衡測(cè)試:靜態(tài)姿勢(shì)下可平衡0分，抓握梁邊1分，抱住梁，有一肢體掉落2分，抱住梁，有兩肢體掉落，或在梁上旋轉(zhuǎn)(＞60s)3分，試圖在梁上保持平衡，但跌落(＞40 s)4分，試圖在梁上保持平衡，但跌落(＞20s)5分，跌落，但沒(méi)有試圖保持平衡或抓握梁(＜20s)6分;(4)反射缺失或異常動(dòng)作:耳廓反射(當(dāng)觸耳道時(shí)搖頭)1分，角膜反射(用棉花絲輕觸角膜時(shí)眨眼)1分。因此，分?jǐn)?shù)越高，損傷程度越重。

1.5.3 蔗糖水消耗實(shí)驗(yàn)［7］:于術(shù)前 1 d和 CUMS后第7、14、21天對(duì)各組大鼠進(jìn)行糖水消耗試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前訓(xùn)練大鼠飲用l%蔗糖水，即在每個(gè)鼠籠放置2個(gè)水瓶，在開(kāi)始的24 h內(nèi)兩瓶均裝有1%蔗糖水，隨后第2個(gè)24 h內(nèi)1個(gè)瓶裝純凈水，另1個(gè)瓶裝1%蔗糖水。進(jìn)行試驗(yàn)測(cè)定時(shí)大鼠禁食禁水20 h，然后給予每只測(cè)試大鼠一瓶1%蔗糖水和一瓶純凈水，1 h后取瓶測(cè)量計(jì)算動(dòng)物的糖水飲用比率(糖水消耗量/總液體消耗量×100%)。

1.5.4 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)［8］:于術(shù)前 1 d 和 CUMS 后第 21天進(jìn)行礦場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。采用立柱體曠場(chǎng)箱，規(guī)格(100×100×40)cm，周壁、底面為黑色。將大鼠置于曠場(chǎng)箱底面的中心，用SMART實(shí)時(shí)視頻圖像跟蹤分析系統(tǒng)記錄大鼠在3 min內(nèi)的移動(dòng)距離(travelled distance，Dist)、平均速度(不包含休息時(shí)間)(speedaverage(without resting time)，V.Avge)。測(cè)試時(shí)在光線昏暗、安靜的環(huán)境下進(jìn)行，每次測(cè)定結(jié)束后清除干凈動(dòng)物的排泄物，每只只測(cè)定1次，實(shí)驗(yàn)時(shí)間結(jié)束后通過(guò)錄像分析軟件統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析。所有統(tǒng)計(jì)均以P＜0.05作為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠不同時(shí)期體重比較

由表1結(jié)果可見(jiàn)，術(shù)后應(yīng)激第7天起PSD組、卒中組較假手術(shù)組體重增幅減慢(P＜0.05或P＜0.01)，且PSD組體重降低更明顯;應(yīng)激第14 d、21 d卒中組體重增長(zhǎng)逐漸恢復(fù)正常，而PSD組體重增幅明顯減慢(P＜0.01);補(bǔ)陽(yáng)還五湯干預(yù)后在應(yīng)激第7天與PSD組相比體重增加(P＜0.05)，第14、21天體重增加明顯高于PSD組(P＜0.01)，氟西汀和補(bǔ)陽(yáng)還五湯組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明補(bǔ)陽(yáng)還五湯及氟西汀能改善卒中后抑郁大鼠模型的抑郁狀態(tài)，增加大鼠體重。

2.2 神經(jīng)功能評(píng)分比較

由表2結(jié)果可見(jiàn)，通過(guò)Ayelet Levy評(píng)分法檢測(cè)，各組大鼠在術(shù)后均出現(xiàn)了程度不等的神經(jīng)功能缺損，術(shù)后應(yīng)激第7天神經(jīng)功能評(píng)分比較各組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);隨后PSD組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分逐漸增加，第14、21天與卒中組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或 P＜0.01);治療組氟西汀和補(bǔ)陽(yáng)還五湯組其神經(jīng)功能評(píng)分逐漸降低，且與PSD組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05或P＜0.01)，表明其均促進(jìn)其神經(jīng)功能恢復(fù)，但氟西汀組和補(bǔ)陽(yáng)還五湯組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)(P＞0.05)。

表1 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)體重比較(n=10，±s，g)Tab.1 Comparison of the body weight of rats in each group at different time－points(n=10，±s，g)

表1 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)體重比較(n=10，±s，g)Tab.1 Comparison of the body weight of rats in each group at different time－points(n=10，±s，g)

注:與假性手術(shù)組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01;與卒中組比較，△P ＜0.05，△△P ＜0.01;與 PSD 比較，﹡P ＜0.05，﹡﹡P ＜0.01。Note.Compared with the sham operation group，#P ＜0.05，##P ＜0.01;Compared with the cerebral ischemic stroke group，△P ＜0.05，△△P ＜0.01;Compared with the PSD group，﹡P ＜0.05，﹡﹡P ＜0.01.

應(yīng)激第21天Stress，21 days假性手術(shù)組 Sham operation group 250.90 ±18.30 285.55 ±18.04 310.58 ±22.77 333.66 ±25.05卒中組 Stroke group 258.63 ±16.33 266.35 ±17.19# 288.58 ±20.05 309.69 ±21.28 PSD 組 PSD group 260.82 ±17.90 250.44 ±16.82## 263.80 ±14.87##△ 277.09 ±14.77##△氟西汀組 Fluoxetine group 257.07 ±17.75 267.03 ±18.60 288.00 ±23.29* 309.81 ±22.50*補(bǔ)陽(yáng)還五湯組 Chinese medicine group 260.66 ±20.02 278.81 ±18.09* 308.38 ±19.27＊＊ 329.09 ±20.69組別Groups 應(yīng)激前Before stress應(yīng)激第7天Stress，7 days應(yīng)激第14天Stress，14 days＊＊

表2 各組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分比較(n=10，±s)Tab.2 Comparisons of neurological score in the rats of each group(n=10，±s)

表2 各組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分比較(n=10，±s)Tab.2 Comparisons of neurological score in the rats of each group(n=10，±s)

注:與卒中組比較，△P ＜0.05，△△P＜0.01;與 PSD比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。Note.Compared with the cerebral ischemic stroke group，△P ＜0.05，△△P ＜0.01;Compared with the PSD group，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01.

應(yīng)激第14天Stress，14 days組別Group 應(yīng)激第7天Stress，7 days Chinese medicine group應(yīng)激第21天Stress，21 days假性手術(shù)組 Sham operation group 7.83 ±1.66 6.40 ±1.50 5.10 ±1.62卒中組 Stroke group 8.27 ±1.45 8.98 ±1.76△ 9.22 ±1.59△△PSD 組 PSD group 6.73 ±1.70 5.44 ±1.51* 3.86 ±1.73＊＊氟西汀組 Fluoxetine group 6.55 ±1.83 4.30 ±1.80△＊＊ 2.91 ±1.63△＊＊補(bǔ)陽(yáng)還五湯組

2.3 蔗糖水消耗實(shí)驗(yàn)

由表3結(jié)果可見(jiàn)，造模前各組大鼠飲用糖水消耗比例無(wú)明顯差異(P＞0.05);從術(shù)后應(yīng)激第7天起PSD模型組糖水消耗率呈下降趨勢(shì)，且與假手術(shù)組、卒中組有顯著性差異(P ＜0.05或P ＜0.01);給予藥物干預(yù)后，氟西汀組在應(yīng)激14 d、21 d糖水消耗率有所上升，與PSD組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，而補(bǔ)陽(yáng)還五湯組在應(yīng)激第7天與PSD模型組比較就明顯增加了糖水消耗率(P＜0.05)，說(shuō)明在一定階段其療效優(yōu)于氟西汀，補(bǔ)陽(yáng)還五湯組在應(yīng)激14 d、21 d與PSD組比較均可明顯增加糖水消耗率(P ＜0.01)。

2.4 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

由表4結(jié)果可見(jiàn)，術(shù)后應(yīng)激21 d后，PSD組大鼠運(yùn)動(dòng)總路程顯著縮短，運(yùn)動(dòng)平均速度明顯減低，與卒中組、假性手術(shù)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或P ＜0.01);通過(guò)補(bǔ)陽(yáng)還五湯干預(yù)治療后運(yùn)動(dòng)總路程明顯增加、運(yùn)動(dòng)平均速度也明顯加快，與PSD組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05或P ＜0.01);而補(bǔ)陽(yáng)還五湯組與氟西汀組在運(yùn)動(dòng)總路程和平均速度上差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)(P＞0.05)。說(shuō)明補(bǔ)陽(yáng)還五湯和氟西汀均可增加卒中后抑郁大鼠移動(dòng)距離和平均速度。

表3 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)糖水消耗率比較(n=10，±s，%)Tab.3 Comparisons of sugar consumption in the rats of each group at different time－points(n=10，±s，%)

表3 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)糖水消耗率比較(n=10，±s，%)Tab.3 Comparisons of sugar consumption in the rats of each group at different time－points(n=10，±s，%)

注:與假性手術(shù)組比較，#P ＜0.05##P ＜0.01;與卒中組比較，△P ＜0.05，△△P ＜0.01;與 PSD 比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;與氟西汀比較:☆P＜0.05。Note.Compared with the sham operation group，#P ＜0.05，##P ＜0.01;Compared with the cerebral ischemic stroke group，△P ＜0.05，△△P ＜0.01;Compared with the PSD group，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;Compared with the fluoxetine group，☆P ＜0.05.

應(yīng)激第21天Stress，21 days假性手術(shù)組 Sham operation group 81.62 ±8.02 77.05 ±5.63 81.44 ±9.04 83.28 ±7.40卒中組 Stroke group 80.06 ±6.22 78.87 ±8.04 80.62 ±6.64 82.63 ±5.55 PSD 組 PSD group 80.93 ±5.58 68.04 ±5.46#△ 54.33 ±8.22##△△ 42.70 ±7.71##△△氟西汀組 Fluoxetine group 78.80 ±7.25 69.22 ±5.80#△ 76.62 ±5.08＊＊ 79.33 ±4.66＊＊補(bǔ)陽(yáng)還五湯組 Chinese medicine group 77.75±7.80 76.94±4.48＊☆ 79.01±6.62＊＊ 81.71±7.04組別Group 應(yīng)激前Before stress應(yīng)激第7天Stress，7 days應(yīng)激第14天Stress，14 days＊＊

表4 各組大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果比較(n=10，±s)Tab.4 Comparison of open－field test results in the rats of each group(n=10，±s)

表4 各組大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果比較(n=10，±s)Tab.4 Comparison of open－field test results in the rats of each group(n=10，±s)

注:與假性手術(shù)組比較，#P ＜0.05##P ＜0.01;與卒中組比較，△P ＜0.05，△△P ＜0.01;與 PSD 比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。Note.Compared with the sham operation group，#P ＜0.05，##P ＜0.01;Compared with the cerebral ischemic stroke group，△P ＜0.05，△△P ＜0.01;Compared with the PSD group，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01.

造模前Before modeling組別Groups應(yīng)激后After stress造模前Before modeling應(yīng)激后After stress假性手術(shù)組Sham operation group 1246.20 ±145.78 1503.08 ±282.60 13.08 ±3.65 12.77 ±2.28卒中組 Stroke group 1333.09 ±212.62 1498.24 ±352.64 12.69 ±4.24 10.46 ±3.83 PSD 組 PSD group 1378.75 ±268.08 838.57 ±265.50##△△ 12.04 ±2.66 6.05 ±4.09#△氟西汀組 Fluoxetine group 1447.78 ±303.66 1315.66 ±312.21＊＊ 10.91 ±4.09 10.88 ±2.45*補(bǔ)陽(yáng)還五湯組 Chinese medicinegroup 1293.34 ±255.07 1499.32 ±277.42＊＊ 11.57 ±2.88 12.63 ±2.66*

3 討論

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，PSD是以精神和軀體癥狀相結(jié)合的復(fù)雜的神經(jīng)精神情感障礙性疾病，它是各種神經(jīng)生物學(xué)和社會(huì)心理因素綜合作用的結(jié)果，其發(fā)病符合生物－心理－社會(huì)醫(yī)學(xué)模式，即PSD的發(fā)生既是卒中后出現(xiàn)了顱內(nèi)特定部位損傷的直接結(jié)果，又是卒中這一突發(fā)應(yīng)激事件給患者帶來(lái)各種心理反應(yīng)及社會(huì)因素影響的結(jié)果［9］。中醫(yī)學(xué)辨證認(rèn)為，PSD屬于“郁證”范疇，因其發(fā)生在中風(fēng)之后，又將其歸為中風(fēng)與郁證之合病，屬于“因病致郁”;卒中后氣虛血瘀、血瘀阻絡(luò)為其病機(jī)核心，又因肢體偏癱等因素思慮過(guò)度，情志不舒，傷及肝脾二臟為其發(fā)病的最重要原因［10］。因此目前多數(shù)醫(yī)家認(rèn)為本病病位在腦，涉及肝、脾、腎等，其證屬本虛標(biāo)實(shí)或虛實(shí)夾雜，病之本屬精氣血虧虛，病之標(biāo)則為痰瘀互結(jié)［11］，故治療上基于急則治標(biāo)、緩則治本的原則，在辨證論治原有疾病的基礎(chǔ)上，以補(bǔ)氣活血通絡(luò)為治其本。本實(shí)驗(yàn)所選補(bǔ)陽(yáng)還五湯是補(bǔ)氣行瘀、疏通經(jīng)絡(luò)的代表方劑，是治療中風(fēng)后遺癥的經(jīng)典名方，方中當(dāng)歸、川芎、赤芍、桃仁、紅花活血化瘀，地龍通經(jīng)活絡(luò)，并重用黃芪大補(bǔ)元?dú)?，使全方具有補(bǔ)氣而不留邪，活血而不傷正之功效［12］。

本實(shí)驗(yàn)首先通過(guò)線栓法制備腦缺血卒中模型造成大鼠腦血管急性病理?yè)p傷，再運(yùn)用孤養(yǎng)法及慢性不可預(yù)知的溫和應(yīng)激法聯(lián)合模擬恢復(fù)期負(fù)性壓力環(huán)境制備PSD模型大鼠，目前該模型廣泛應(yīng)用于PSD形成機(jī)制和藥物療效評(píng)價(jià)的研究［13］。對(duì)于PSD大鼠的顯著特征之一—行為學(xué)的觀察，其體重變化、糖水消耗實(shí)驗(yàn)和曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)是反映動(dòng)物抑郁癥狀和軀體癥狀的關(guān)鍵指標(biāo)，因此本研究用以上三個(gè)重要指標(biāo)來(lái)綜合評(píng)價(jià)補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)PSD大鼠的干預(yù)作用。

臨床上抑郁癥病人通常會(huì)出現(xiàn)食欲下降、體重減輕現(xiàn)象，所以體重的變化是衡量PSD大鼠的量化指標(biāo)之一。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在應(yīng)激刺激第7d、14d、21dPSD組大鼠體重增幅明顯減慢，與假手術(shù)組比較有顯著性差異，而卒中組在第14d后體重增幅逐漸恢復(fù)正常，提示應(yīng)激事件影響到了動(dòng)物體重的增長(zhǎng);給予藥物干預(yù)的氟西汀組和補(bǔ)陽(yáng)還五湯組，均能明顯改善PSD大鼠體重增長(zhǎng)情況，提示中藥補(bǔ)陽(yáng)還五湯干預(yù)對(duì)促進(jìn)食物的吸收有一定促進(jìn)作用，可以緩解動(dòng)物因應(yīng)激事件引起的體重增幅減慢的現(xiàn)象。

興趣缺乏、快感缺失是CUMS模型動(dòng)物抑郁行為中最為核心的癥狀之一，嚙齒類(lèi)動(dòng)物快感缺失的定量評(píng)價(jià)方法主要為糖水消耗實(shí)驗(yàn)［14］。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，基于嚙齒類(lèi)動(dòng)物喜好糖水的天性，經(jīng)過(guò)應(yīng)激處理的PSD組大鼠的糖水消耗量明顯較假手術(shù)組和卒中組大鼠下降，表明PSD大鼠對(duì)獎(jiǎng)賞機(jī)制的敏感性減低，出現(xiàn)了明顯的抑郁癥狀。而通過(guò)氟西汀、補(bǔ)陽(yáng)還五湯藥物干預(yù)的大鼠糖水消耗量明顯增加，且補(bǔ)陽(yáng)還五湯組在應(yīng)激第7天與PSD組比較就明顯增加了糖水消耗率，說(shuō)明在一定階段其療效優(yōu)于氟西汀，提示補(bǔ)陽(yáng)還五湯能增加PSD大鼠對(duì)獎(jiǎng)賞機(jī)制的敏感性，減輕其抑郁癥狀。

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)由Hall在1934年提出，用于觀察動(dòng)物在特定陌生環(huán)境一定時(shí)間內(nèi)中的自發(fā)活動(dòng)行為，是反應(yīng)大鼠對(duì)未知環(huán)境的探索能力及情緒反應(yīng)的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)采用小動(dòng)物視頻圖像跟蹤分析系統(tǒng)，動(dòng)態(tài)分析大鼠在曠場(chǎng)箱中的活動(dòng)軌跡，

以運(yùn)動(dòng)總路程和平均速度等為觀察指標(biāo)，能更直接地反應(yīng)動(dòng)物的抑郁程度，從而避免了傳統(tǒng)的人為觀察記錄動(dòng)物的跨格次數(shù)所造成標(biāo)準(zhǔn)不一致性、主觀性程度大以及費(fèi)時(shí)費(fèi)力等缺點(diǎn)，取得更加真實(shí)準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)［15］。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，通過(guò)21d的應(yīng)激刺激后，PSD組大鼠總路程顯著縮短，運(yùn)動(dòng)平均速度明顯減低，與卒中組、假性手術(shù)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明動(dòng)物對(duì)未知環(huán)境出現(xiàn)了興奮性和探索能力降低等癥狀，與抑郁癥狀具有一定相似性。而給予干預(yù)治療后運(yùn)動(dòng)總路程明顯增加、運(yùn)動(dòng)平均速度也明顯加快，提示補(bǔ)陽(yáng)還五湯干預(yù)可以改善PSD大鼠的探索性活動(dòng)，緩解抑郁癥狀。

以往研究表明腦卒中后抑郁的發(fā)生與腦卒中的亞型無(wú)關(guān)，而與腦卒中后的神經(jīng)功能損傷程度有關(guān)，神經(jīng)功能的恢復(fù)有助于腦卒中后抑郁癥狀的緩解［16－17］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示，應(yīng)激 14d、21d 后 PSD組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分逐漸增加，神經(jīng)功能損傷加劇，與卒中組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而給與藥物干預(yù)后，神經(jīng)功能恢復(fù)良好。

綜上所述，本文對(duì)卒中后抑郁大鼠的行為學(xué)變化進(jìn)行了初步探討，顯示補(bǔ)陽(yáng)還五湯具有一定的治療PSD的效果，不但減輕了PSD大鼠的抑郁程度，而且對(duì)卒中引起的神經(jīng)功能缺損有良好的恢復(fù)作用，充分發(fā)揮了中藥多靶點(diǎn)、多效應(yīng)的作用，但其具體的作用機(jī)制還有待今后從顯微形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)等方面進(jìn)行深入的探究。

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