鄧海清 楊蕾 陳成 王國(guó)治 陳國(guó)慶

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結(jié)核病細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置要求探討

鄧海清 楊蕾 陳成 王國(guó)治 陳國(guó)慶

依據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》對(duì)于生物安全實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定和《結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》對(duì)于結(jié)核病細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)規(guī)定，探討了生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)(BSL-2)的基本要求，分析了目前關(guān)于BSL-2實(shí)驗(yàn)室存在的問題和不足，對(duì)從事結(jié)核分枝桿菌分離培養(yǎng)、涉及微生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行的結(jié)核分枝桿菌耐藥檢測(cè)與分型鑒定實(shí)驗(yàn)室提出改進(jìn)的建議，解決該類實(shí)驗(yàn)室存在的生物安全隱患，提高生物安全防護(hù)措施，以期得到國(guó)家相關(guān)部門和同仁的支持。

結(jié)核分枝桿菌; 細(xì)菌學(xué)技術(shù); 實(shí)驗(yàn)室; 安全措施

結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)是引起結(jié)核病的病原菌。結(jié)核病細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要實(shí)驗(yàn)過程涉及到結(jié)核分枝桿菌的微生物學(xué)、免疫學(xué)與分子生物學(xué)檢測(cè)等，根據(jù)原衛(wèi)生部公布的《人間傳染的病原微生物名錄》(以下簡(jiǎn)稱《名錄》)[1]，結(jié)核分枝桿菌危害程度分類屬于高致病性的第二類病原微生物。結(jié)核分枝桿菌可通過呼吸道、消化道和破損的皮膚黏膜等多途徑進(jìn)入機(jī)體，可侵襲機(jī)體任何組織、器官引起進(jìn)行性疾病，且耐藥結(jié)核病難以治愈；進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌分離培養(yǎng)、涉及微生物學(xué)技術(shù)的結(jié)核分枝桿菌耐藥檢測(cè)與分型鑒定工作的實(shí)驗(yàn)室涉及范圍廣、環(huán)節(jié)多，實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)是否得當(dāng)直接關(guān)系到醫(yī)務(wù)人員和科研工作者的個(gè)人健康，同時(shí)合理的實(shí)驗(yàn)室設(shè)置也減少了結(jié)核分枝桿菌污染環(huán)境的可能性。如何合理科學(xué)配置結(jié)核病細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施與設(shè)備以確保其安全，是結(jié)核病相關(guān)醫(yī)務(wù)人員和科研工作者必須面對(duì)的問題。

實(shí)驗(yàn)室基本要求與問題分析

依據(jù)《名錄》對(duì)結(jié)核分枝桿菌不同實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別的規(guī)定，在實(shí)驗(yàn)室操作涉及到“大量”病原菌的制備，或易產(chǎn)生氣溶膠的實(shí)驗(yàn)操作(如病原菌離心、凍干等)，以及結(jié)核分枝桿菌活菌感染的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)應(yīng)在《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求(GB19489-2008)》[2](以下簡(jiǎn)稱《通用要求》)規(guī)定的三級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室(BSL-3)或三級(jí)動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室(ABSL-3)進(jìn)行。樣本檢測(cè)包括樣本的病原菌分離純化、藥物敏感性試驗(yàn)(簡(jiǎn)稱“藥敏試驗(yàn)”)、生化鑒定、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、PCR核酸提取、涂片、顯微觀察等初步檢測(cè)和檢驗(yàn)活動(dòng)在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，非感染性材料的不含致病性活菌材料的分子生物學(xué)、免疫學(xué)等實(shí)驗(yàn)可在BSL-1實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。依據(jù)《名錄》規(guī)定，在國(guó)內(nèi)涉及面最廣的臨床結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。目前，我國(guó)對(duì)生物安全實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)施要求強(qiáng)制執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)有中華人民共和國(guó)住房和城鄉(xiāng)建設(shè)部與中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局聯(lián)合頒布的《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》[3](GB 50346-2011)、中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)發(fā)布的《通用要求》和中國(guó)防癆協(xié)會(huì)在1995年制定并于2006年再版修訂的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作標(biāo)準(zhǔn)《結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》[4]，其基本要求如下。

一、BSL-2實(shí)驗(yàn)室建筑基本要求

1. 實(shí)驗(yàn)室建筑要求分類：生物安全實(shí)驗(yàn)室根據(jù)所操作致病性生物因子的傳播途徑可分為a類和b類。a類指操作非經(jīng)空氣傳播生物因子的實(shí)驗(yàn)室；b類指操作經(jīng)空氣傳播生物因子的實(shí)驗(yàn)室。b1類生物安全實(shí)驗(yàn)室指可有效利用安全隔離裝置進(jìn)行操作的實(shí)驗(yàn)室；b2類生物安全實(shí)驗(yàn)室指不能有效利用安全隔離裝置進(jìn)行操作的實(shí)驗(yàn)室。結(jié)核病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室屬b1類實(shí)驗(yàn)室。

圖1 典型BSL-2實(shí)驗(yàn)室(圖片來源于世界衛(wèi)生組織《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)(第三版)》[5])

2. 位置要求：BSL-2生物安全實(shí)驗(yàn)室宜實(shí)施一級(jí)屏障(操作者和被操作對(duì)象之間的隔離)和二級(jí)屏障(生物安全實(shí)驗(yàn)室和外部環(huán)境的隔離)；實(shí)驗(yàn)室與建筑物其他部分可相通，實(shí)驗(yàn)室的走廊和通道應(yīng)不妨礙人員和物品通過。應(yīng)設(shè)計(jì)緊急撤離路線，緊急出口應(yīng)有明顯的標(biāo)識(shí)。

3. 其他要求：實(shí)驗(yàn)室選址、設(shè)計(jì)和建造應(yīng)符合國(guó)家和地方環(huán)境保護(hù)和建設(shè)主管部門等的規(guī)定和要求。實(shí)驗(yàn)室的安全保衛(wèi)、防火和安全通道設(shè)置應(yīng)符合國(guó)家的消防規(guī)定和要求，同時(shí)應(yīng)考慮生物安全的特殊要求；實(shí)驗(yàn)室的建筑材料和設(shè)備等應(yīng)符合國(guó)家相關(guān)部門對(duì)該類產(chǎn)品生產(chǎn)、銷售和使用的規(guī)定和要求。應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)。必要時(shí)，重要設(shè)備(如：培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等)應(yīng)配置備用電源。

二、BSL-2實(shí)驗(yàn)室設(shè)施基本要求

1. 基本布局：實(shí)驗(yàn)室基本布局如圖1所示。BSL-2實(shí)驗(yàn)室在實(shí)驗(yàn)室門口處應(yīng)設(shè)存衣或掛衣裝置，可將個(gè)人服裝與實(shí)驗(yàn)室工作服分開放置，靠近實(shí)驗(yàn)室出口宜設(shè)置洗手池，必要時(shí)應(yīng)設(shè)緊急噴淋裝置；實(shí)驗(yàn)室房間的入口處應(yīng)有警示和進(jìn)入限制及可視窗，房間的門根據(jù)需要安裝門鎖，門鎖及門的開啟方向應(yīng)不妨礙室內(nèi)人員逃生，門鎖應(yīng)便于內(nèi)部快速打開。放置生物安全柜實(shí)驗(yàn)間的門應(yīng)可自動(dòng)關(guān)閉，生物安全柜放置應(yīng)遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室入口。

2. 基礎(chǔ)設(shè)施要求：實(shí)驗(yàn)室可以利用自然通風(fēng)，如果采用機(jī)械通風(fēng)，應(yīng)避免交叉污染。如果有可開啟的窗戶，應(yīng)安裝可防蚊蟲的紗窗；實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物進(jìn)入的措施。應(yīng)設(shè)應(yīng)急照明裝置。供水和排水管道系統(tǒng)應(yīng)不滲漏，下水應(yīng)有防回流設(shè)計(jì)。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)避免不必要的反光和強(qiáng)光。實(shí)驗(yàn)室的室內(nèi)環(huán)境參數(shù)應(yīng)符合工作要求和衛(wèi)生等相關(guān)要求，機(jī)械通風(fēng)的實(shí)驗(yàn)室溫度在18 ℃～27 ℃，相對(duì)濕度在30%～70%，噪聲小于60 dB(A)，平均光照度300 lx。

3. 其他要求：實(shí)驗(yàn)室的墻壁、天花板和地面應(yīng)易清潔、不滲水、耐化學(xué)品和消毒滅菌劑的腐蝕。地面應(yīng)平整、防滑，不應(yīng)鋪設(shè)地毯。實(shí)驗(yàn)室臺(tái)柜和座椅等應(yīng)穩(wěn)固，邊角應(yīng)圓滑。實(shí)驗(yàn)室臺(tái)柜等擺放應(yīng)便于清潔，實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)防水、耐腐蝕、耐熱和堅(jiān)固。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有足夠的空間和臺(tái)柜等擺放實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和物品。應(yīng)根據(jù)工作性質(zhì)和流程合理擺放實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、臺(tái)柜、物品等，避免相互干擾、交叉污染，并應(yīng)不妨礙逃生和急救。

三、BSL-2實(shí)驗(yàn)室設(shè)備基本配置

1. 生物安全柜：BSL-2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備與其實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相匹配的生物安全柜，并按生物安全柜產(chǎn)品的設(shè)計(jì)要求安裝和使用。如果生物安全柜的排風(fēng)在室內(nèi)循環(huán)，室內(nèi)應(yīng)具備通風(fēng)換氣的條件；如果使用需要管道排風(fēng)的生物安全柜，應(yīng)通過獨(dú)立于建筑物其他公共通風(fēng)系統(tǒng)的管道排出。

2. 滅菌消毒設(shè)備：應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室或其所在的建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器或其他適當(dāng)?shù)南緶缇O(shè)備，所配備的消毒滅菌設(shè)備應(yīng)以風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估為依據(jù)。若操作刺激或腐蝕性物質(zhì)，應(yīng)在30 m內(nèi)設(shè)洗眼裝置。

四、BSL-2實(shí)驗(yàn)室存在的問題

1. 《名錄》不符合《條例》規(guī)定：盡管《名錄》明確規(guī)定包括藥敏試驗(yàn)檢測(cè)在內(nèi)的病原微生物樣本檢測(cè)可在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，但結(jié)核分枝桿菌藥敏試驗(yàn)檢測(cè)時(shí)已經(jīng)分離并確定是結(jié)核分枝桿菌，根據(jù)國(guó)務(wù)院令第424號(hào)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》[6](本文簡(jiǎn)稱《條例》)第二十一條規(guī)定生物安全一級(jí)、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，《名錄》的規(guī)定明顯不符合《條例》規(guī)定。

2. 生物安全隱患：根據(jù)《通用要求》定義：生物安全實(shí)驗(yàn)室要求生物安全防護(hù)水平為二級(jí)的實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物；結(jié)核分枝桿菌從其分類來看，主要包括國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株H37Rv、其減毒株H37Ra和臨床分離株等。臨床分離株又包含敏感、單耐藥、多耐藥、廣泛耐藥、全耐藥等結(jié)核分枝桿菌菌株，對(duì)于廣泛耐藥、全耐藥結(jié)核分枝桿菌目前并無有效的治療藥物。近年來，關(guān)于結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)是全球22個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一，患病人數(shù)僅次于印度，居世界第二位，其中耐多藥結(jié)核病在我國(guó)的流行異常嚴(yán)重，流行比例為9.3%，約是世界平均水平(4.8%)的2倍[7]，耐多藥結(jié)核病(MDR-TB)、廣泛耐藥結(jié)核病(XDR-TB)和全耐藥結(jié)核病等的出現(xiàn)使得結(jié)核病的防控面臨巨大的挑戰(zhàn)，從現(xiàn)有的BSL-2實(shí)驗(yàn)室防護(hù)水平來看，存在很大的生物安全隱患，并不能滿足結(jié)核分枝桿菌的細(xì)菌學(xué)檢測(cè)等試驗(yàn)的要求。

3. 結(jié)核分枝桿菌獲得性感染：關(guān)于結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室研究人員感染或醫(yī)院內(nèi)相關(guān)醫(yī)務(wù)人員感染的報(bào)道也是屢見不鮮，何廣學(xué)、韓超楠等[8-9]對(duì)國(guó)內(nèi)外結(jié)核分枝桿菌感染現(xiàn)狀進(jìn)行了總結(jié)分析，醫(yī)務(wù)人員獲得性肺結(jié)核比例顯著高于一般人群，感染和患病風(fēng)險(xiǎn)明顯高于普通人群；研究表明，醫(yī)院內(nèi)感染暴露因素比較復(fù)雜，我國(guó)還沒有系統(tǒng)的醫(yī)務(wù)人員感染結(jié)核分枝桿菌和患病篩查、合理的保護(hù)措施及有效的監(jiān)督制度，以及有關(guān)這方面的流行病學(xué)研究及微生物環(huán)境監(jiān)測(cè)，這些都有待進(jìn)一步完善。國(guó)內(nèi)學(xué)者就專門針對(duì)實(shí)驗(yàn)室獲得性感染事件進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)研究[10]，結(jié)核分枝桿菌感染事件高達(dá)223例，證明了目前的實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)還需要進(jìn)一步加強(qiáng)和改善。陸兵等[11]報(bào)道實(shí)驗(yàn)室獲得性結(jié)核分枝桿菌感染主要為吸入感染，因設(shè)備故障或缺陷、銳器損傷或擦傷、操作失誤、呼吸暴露(多數(shù)為未進(jìn)行有效的呼吸防護(hù))而造成感染。值得注意的是，所有實(shí)驗(yàn)室獲得性結(jié)核分枝桿菌感染事件中，未見BSL-3實(shí)驗(yàn)室發(fā)生結(jié)核分枝桿菌感染的報(bào)道，未見充分呼吸防護(hù)后發(fā)生結(jié)核分枝桿菌感染的報(bào)道。這也說明了一個(gè)問題，現(xiàn)有的BSL-2實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與要求存在不足，普通的BSL-2 實(shí)驗(yàn)室對(duì)于結(jié)核分枝桿菌的感染不能進(jìn)行有效的防護(hù)。

4. 建議：我國(guó)對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室硬件要求高于WHO生物安全手冊(cè)的規(guī)定。而且，根據(jù)《條例》規(guī)定，建立BSL-3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在國(guó)家生物安全實(shí)驗(yàn)室體系規(guī)劃內(nèi)并依法履行有關(guān)審批手續(xù)；要經(jīng)國(guó)務(wù)院科技主管部門、環(huán)境保護(hù)主管部門審查同意；實(shí)驗(yàn)室建成后要通過認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理部門確定的認(rèn)可機(jī)構(gòu)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可；實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛿M從事的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)要通過國(guó)務(wù)院衛(wèi)生主管部門審查。因此從事結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)均在BSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行并不現(xiàn)實(shí)。根據(jù)上述情況，結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室需要加強(qiáng)生物安全防護(hù)而又無法在BSL-3實(shí)驗(yàn)室工作情況下，以世界衛(wèi)生組織《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)(第三版)》[5]中生物防護(hù)三級(jí)實(shí)驗(yàn)室為參考模板，建立符合中國(guó)國(guó)情的負(fù)壓結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)BSL-2實(shí)驗(yàn)室是解決結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的有效方法。

實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)建議

一、負(fù)壓結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)BSL-2實(shí)驗(yàn)室建筑與布局要求

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與同一建筑內(nèi)自由活動(dòng)區(qū)域分隔開，具體可將實(shí)驗(yàn)室置于走廊的盲端，或設(shè)隔離區(qū)和隔離門。實(shí)驗(yàn)室宜設(shè)立雙緩沖間(即雙門通過間)，緩沖間和鄰近空間應(yīng)保持壓差，緩沖間的門可自動(dòng)關(guān)閉且互鎖，配備有能擊碎的面板供緊急撤離時(shí)使用，窗戶應(yīng)關(guān)閉、密封、防碎。在每個(gè)出口附近安裝不需用手控制的洗手池或手消毒裝置，生物安全柜的安裝位置應(yīng)遠(yuǎn)離人員活動(dòng)區(qū)，且避開門和通風(fēng)系統(tǒng)的交叉區(qū)，負(fù)壓結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室平面布局見圖2。

圖2 負(fù)壓結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)BSL-2實(shí)驗(yàn)室示意圖(圖片來源于世界衛(wèi)生組織《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)(第三版)》[5])

二、負(fù)壓結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)BSL-2實(shí)驗(yàn)室設(shè)施要求

防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)配置用于污染廢棄物消毒的高壓滅菌器，如果感染性廢棄物需運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室處理，則必須根據(jù)國(guó)家或國(guó)際的相應(yīng)規(guī)定，密封于不易破裂的、防滲漏的容器中；供水管必須安裝防逆流裝置；真空管道應(yīng)采用裝有液體消毒劑的防氣閥和高效空氣過濾器(high efficiency particulate air filter，HEPA)或相當(dāng)產(chǎn)品進(jìn)行保護(hù)；備用真空泵也應(yīng)用防氣閥和過濾器進(jìn)行適當(dāng)保護(hù)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)密封；需建造空氣管道通風(fēng)系統(tǒng)以進(jìn)行氣體消毒；可視傳遞窗應(yīng)設(shè)計(jì)為單向開啟且有滅菌設(shè)備(如紫外燈等)，進(jìn)入物品直接由傳遞窗進(jìn)入，經(jīng)過處理后的廢棄物由傳遞窗傳出并按規(guī)定處理；靠近走廊一側(cè)或入口應(yīng)設(shè)置為可視窗以方便實(shí)驗(yàn)室外人員觀察實(shí)驗(yàn)室動(dòng)態(tài)和安全情況或外來人員參觀。

三、負(fù)壓結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)BSL-2實(shí)驗(yàn)室空調(diào)凈化系統(tǒng)基本要求

負(fù)壓結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室須建立可使空氣定向流動(dòng)的可控通風(fēng)系統(tǒng)，以確保實(shí)驗(yàn)室內(nèi)氣流由緩沖間向核心工作區(qū)域定向流動(dòng)。在構(gòu)建通風(fēng)系統(tǒng)時(shí)，應(yīng)保證從生物安全實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所排出的空氣不會(huì)逆流至該建筑物內(nèi)的其他區(qū)域，空氣經(jīng)HEPA過濾后排出建筑以外。應(yīng)安裝直觀的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，以便工作人員可以隨時(shí)確保實(shí)驗(yàn)室內(nèi)維持正確的定向氣流，該監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可帶也可不帶警報(bào)系統(tǒng)。可以安裝取暖、通風(fēng)和空調(diào)(Heating, ventilation and air conditioning，HVAC)控制系統(tǒng)來防止實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)持續(xù)正壓，應(yīng)考慮安裝視聽警報(bào)器，向工作人員發(fā)出HVAC系統(tǒng)故障信號(hào)。

四、負(fù)壓結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室安全柜選擇與安裝要求

1. 不涉及揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)的安全柜選擇：在實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容中不涉及揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)時(shí)選擇外排風(fēng)式A2 型Ⅱ級(jí)生物安全柜，安全柜的設(shè)計(jì)使用“套管(thimble)”或“傘形罩(canopyhood)”連接。套管安裝在安全柜的排風(fēng)管上，將安全柜中需要排出的空氣應(yīng)通過獨(dú)立于建筑物其他公共通風(fēng)系統(tǒng)的管道排出。在套管和安全柜排風(fēng)管之間保留一個(gè)直徑差通常為2.5 cm 的小開口，以便讓房間的空氣也可以吸入到獨(dú)立排風(fēng)系統(tǒng)中，這種安全柜的開啟或關(guān)閉不影響室內(nèi)壓力，節(jié)約能源且易于安裝。

2. 涉及揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)的安全柜選擇：在實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容中涉及揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)時(shí)選擇Ⅱ級(jí)B2 型安全柜，也稱為全排放型安全柜，可用于操作少量揮發(fā)性化學(xué)品和放射性核素。如果選擇Ⅱ級(jí)B2 型生物安全柜，必須是連接到專門的排風(fēng)系統(tǒng)，建筑物排風(fēng)系統(tǒng)的排風(fēng)量和靜壓必須與生產(chǎn)商所指定的要求完全一致。

結(jié) 論

由于結(jié)核分枝桿菌的特殊性，主要以空氣傳播、氣溶膠感染為主，生物安全防護(hù)問題相對(duì)于其他病原微生物顯得更為重要。目前國(guó)內(nèi)大部分結(jié)核病?？漆t(yī)院、結(jié)核病防治所、疾病預(yù)防控制中心等的研究實(shí)驗(yàn)室多為BSL-2實(shí)驗(yàn)室，條件雖然有很大的改善，但離三級(jí)防護(hù)還有一定差距，因結(jié)核病患者或者含結(jié)核分枝桿菌活菌的標(biāo)本較為集中，空氣中結(jié)核分枝桿菌的含量也可能高于其他正常區(qū)域，存在發(fā)生醫(yī)院內(nèi)或者實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染的風(fēng)險(xiǎn)，加之近年來越來越嚴(yán)重的耐藥結(jié)核分枝桿菌的檢出，大多數(shù)處于一線基層的實(shí)驗(yàn)人員感染結(jié)核分枝桿菌的風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)高于普通人群，對(duì)自身安全問題構(gòu)成了嚴(yán)重的挑戰(zhàn)。隨著結(jié)核病患者的耐藥率逐年升高，相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)、設(shè)施的要求、人員的防護(hù)等一系列生物安全問題就應(yīng)該成為首要問題。

考慮到BSL-3實(shí)驗(yàn)室從實(shí)驗(yàn)室選址、總體設(shè)計(jì)、設(shè)施要求甚至到水電氣設(shè)施要求等都有明確的規(guī)定，要求極高，成本大大增加，鑒于中國(guó)的實(shí)際國(guó)情，需要將所有結(jié)核分枝桿菌細(xì)菌學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室都按BSL-3實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)是不切實(shí)際的，目前有效的措施應(yīng)該是對(duì)現(xiàn)有的BSL-2實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與設(shè)施進(jìn)行改造，建立符合中國(guó)國(guó)情的結(jié)核分枝桿菌BSL-2實(shí)驗(yàn)室。建立這樣的負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室也需要花費(fèi)不少人力、財(cái)力等，經(jīng)費(fèi)問題是首要問題。為了醫(yī)務(wù)工作者和結(jié)核病相關(guān)研究人員的健康，更為了整個(gè)醫(yī)療事業(yè)的穩(wěn)步發(fā)展，希望我國(guó)政府相關(guān)部門能夠給予一定的經(jīng)費(fèi)支持，建議國(guó)家主管部門制定相關(guān)的補(bǔ)充規(guī)定，保證相關(guān)工作能夠得到順利實(shí)施。

[1] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部. 人間傳染的病原微生物名錄. 北京：中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部辦公廳，2006：21-28.

[2] 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì). 實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求(GB19489-2008). 北京：中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)，2008: 6-10.

[3] 中華人民共和國(guó)住房和城鄉(xiāng)建設(shè)部，中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局. 生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范. 北京：中國(guó)建筑工業(yè)出版社，2011: 5-10.

[4] 中國(guó)防癆協(xié)會(huì)基礎(chǔ)專業(yè)委員會(huì). 結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程. 北京：中國(guó)教育文化出版社, 2006: 1-7.

[5] World Health Organization. Laboratory biosafety manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization, 2004: 14-21.

[6] 中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院. 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例. 2004-11-12.

[7] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部. 全國(guó)結(jié)核病耐藥性基線調(diào)查報(bào)告(2007—2008年). 北京:人民衛(wèi)生出版社, 2009：1-10.

[8] 何廣學(xué), 熊勇超, 侯月云, 等. 國(guó)內(nèi)外結(jié)核感染控制現(xiàn)狀與對(duì)策. 結(jié)核病與肺部健康雜志, 2012, 1(1): 52-54.

[9] 韓超楠, 肖和平. 醫(yī)院潛伏性結(jié)核分枝桿菌感染. 結(jié)核病與肺部健康雜志, 2012，1(1): 66-69.

[10] 周乙華, 莊輝. 實(shí)驗(yàn)室感染與生物安全. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志, 2005，39(3): 215-217.

[11] 陸兵, 劉秋煥, 王榮, 等. 結(jié)核分枝桿菌實(shí)驗(yàn)室獲得性感染事件分析. 中國(guó)防癆雜志, 2012，34(5): 333-335.

(本文編輯：郭萌)

Discussion on the setup requirements of Mtb laboratory

DENG Hai-qing, YANG Lei, CHEN Cheng, WANG Guo-zhi, CHEN Guo-qing.

Division of Tuberculosis Vaccines, National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050, China

CHEN Guo-qing, Email: chengq@nicpbp.org.cn

According to the provisions of “Laboratories-GeneralRequirementsforBiosafety” for the biosafety laboratory and “TheTestProceduresofTuberculosisDiagnosticLaboratory” for theMycobacteriumtuberculosis(Mtb) bacteriology testing laboratories, in this paper we explore the basic requirements and shortcomings of the biosafety level Ⅱ(BSL-2) laboratory to offer some suggestions for the biosafety of Mtb bacteriology testing laboratory which can conduct Mtb isolating, culturing, drug susceptibility testing and genotyping and so on. It might contribute to similar settings and peers.

Mycobacteriumtuberculosis; Bacteriological techniques; Laboratories; Security measures

10.3969/j.issn.1000-6621.2015.02.001

國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局研究課題資助課題(M201405)

100050 北京，中國(guó)食品藥品檢定研究院結(jié)核疫苗室(鄧海清、楊蕾、陳成、王國(guó)治、陳國(guó)慶)；溫州醫(yī)科大學(xué)環(huán)境與公共衛(wèi)生學(xué)院(鄧海清、陳成)

陳國(guó)慶，Email：chengq@nicpbp.org.cn

2014-11-20)