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        雌雄FMMU白化豚鼠基礎(chǔ)生理生化指標(biāo)的差異分析

        2015-05-13 02:44:39張曉玉張修彥陳偉盛詹純列
        關(guān)鍵詞:差異實(shí)驗(yàn)

        張曉玉,張修彥,陳偉盛,梁 寧,詹純列

        (廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,廣州 510010)

        雌雄FMMU白化豚鼠基礎(chǔ)生理生化指標(biāo)的差異分析

        張曉玉,張修彥,陳偉盛,梁 寧,詹純列

        (廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,廣州 510010)

        目的測(cè)定與比較雌、雄普通級(jí)FMMU白化豚鼠血液指標(biāo)、心率、頸總動(dòng)脈壓及心室壓、臟器參數(shù)。方法取250~350g普通級(jí)FMMU白化豚鼠30只,雌雄各半,飼養(yǎng)一周后,心臟采血測(cè)定血液生理生化及血?dú)庵笜?biāo);頸總動(dòng)脈插管測(cè)定動(dòng)脈壓,呼吸支持情況下開(kāi)胸進(jìn)行心室壓測(cè)定;解剖并精確稱(chēng)量各臟器重量。結(jié)果雄性與雌性豚鼠比較:血液指標(biāo)中,血小板計(jì)數(shù)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、乳酸的差異有顯著性意義(P<0.05或P<0.01);頸總動(dòng)脈舒張壓、平均壓以及左心室收縮壓、平均壓的差異有顯著性意義(P<0.05或P<0.01);各主要的臟器重量及臟器系數(shù)均無(wú)顯著性差異。結(jié)論普通級(jí)雌雄FMMU白化豚鼠血液生理生化、血?dú)饧靶难芄δ苤笜?biāo)存在差異。

        普通級(jí)FMMU豚鼠;血液指標(biāo);頸總動(dòng)脈壓;心室壓;臟器參數(shù)

        FMMU白化豚鼠具有獨(dú)特的免疫學(xué)特性,體液免疫及非特異性免疫功能較低[1],心電圖波形與人很相似,更適合用于制作感染性疾病的動(dòng)物模型和心肌缺血等實(shí)驗(yàn)[2-3],脂質(zhì)代謝特點(diǎn)更符合臨床高脂血癥研究[4]。目前,國(guó)內(nèi)外有關(guān)FMMU白化豚鼠臟器參數(shù)、血液生理生化、血壓及心室壓測(cè)定及性別間差異的研究不多,以往的資料較為陳舊,不同文獻(xiàn)中數(shù)據(jù)差異較大,給研究者造成困擾。本文較全面地測(cè)定和比較了雌雄FMMU白化豚鼠的基礎(chǔ)生理生化指標(biāo),為其在免疫學(xué)、心臟疾病及心血管功能研究等方面的應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

        1 材料和方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

        普通級(jí)豚鼠250~350g,雌雄各15只,購(gòu)于廣州花東信華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)【SCXK(粵)2014-0023】,飼養(yǎng)于廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心普通環(huán)境【SYXK(粵)2014-0100】,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后用于實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)前禁食12h,禁水1h。

        1.2 主要儀器及試劑

        德國(guó)賽多利斯BSA124S型電子天平(0.1mg~120g)、日本光電MEK-7222型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、美國(guó)IL GEM premier 3000型全自動(dòng)血?dú)夥治鰞x、日本日立7020型全自動(dòng)生化分析儀、上海奧爾科特ALC-V8型小動(dòng)物呼吸機(jī)、北京微信斯達(dá)Pclab-430C型生物醫(yī)學(xué)信號(hào)采集處理系統(tǒng)及PY-2型血壓傳感器、BD-24G靜脈留置針、體積分?jǐn)?shù)2%戊巴比妥鈉注射液、500U/mL肝素鈉生理鹽水注射液。

        1.3 實(shí)驗(yàn)方法

        1.3.1 血液樣品檢測(cè)

        取普通級(jí)豚鼠雌雄各15只,固定后心臟采血約4mL,分別注入EDTA-2K+抗凝管、肝素抗凝管、普通采血管,用于檢測(cè)血常規(guī)指標(biāo)、血?dú)庵笜?biāo)及血生化指標(biāo)。

        1.3.2 心率及頸總動(dòng)脈血壓測(cè)定

        采血后,為避免心臟采血操作對(duì)血壓、心室壓測(cè)定的影響,上述雌雄各15只普通級(jí)豚鼠,需觀察飼養(yǎng)一周待狀態(tài)恢復(fù)良好后,稱(chēng)量體重,腹腔注射戊巴比妥鈉(2mL/kg),待麻醉后固定,分離頸總動(dòng)脈后,結(jié)扎遠(yuǎn)心端,動(dòng)脈夾固定近心端。靜脈留置針與生理信號(hào)采集系統(tǒng)相連接,進(jìn)行動(dòng)脈穿刺,成功后抽回針頭將軟管送入,注入肝素(1000U/kg),觀察顯示器中血壓波形穩(wěn)定后,記錄數(shù)值。

        1.3.3 左右心室壓測(cè)定

        結(jié)扎頸總動(dòng)脈后,鈍性剝離氣管,使用小動(dòng)物呼吸機(jī)進(jìn)行插管輔助呼吸。開(kāi)胸進(jìn)入胸腔,打開(kāi)心包膜,將留置針針尖插入心尖處立即收回,并將套管部分繼續(xù)插入左心室內(nèi),觀察泵出血液顏色鮮紅,節(jié)奏有力,顯示數(shù)值穩(wěn)定后記錄左心室壓。后繼續(xù)將留置針穿過(guò)心室隔到達(dá)右心室,泵出血液顏色深紅,觀察并記錄右心室壓。

        1.3.4 臟器重量的測(cè)定

        上述測(cè)定完成后,對(duì)豚鼠實(shí)施安樂(lè)死,并立即剖取腦、腦垂體、甲狀腺、胸腺、心、肺、肝、胃、脾、腎、腎上腺、睪丸/子宮、附睪/卵巢,濾紙吸干組織表面水分后,稱(chēng)重記數(shù),計(jì)算臟器系數(shù)=[(臟器重量/體質(zhì)量)×100%]。

        1.4 統(tǒng)計(jì)方法

        數(shù)據(jù)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行,性別間比較采用t檢驗(yàn),數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 血常規(guī)

        實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:普通級(jí)雌、雄豚鼠僅PLT 1項(xiàng)指標(biāo)差異顯著(表1)。

        表1 雄性與雌性普通級(jí)FMMU白化豚鼠血常規(guī)測(cè)定及比較Tab.1 Comparison of blood cell analysis between male and female FMMU albino guinea-pig

        2.2 血液生化

        實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,普通級(jí)雌、雄豚鼠ALT、TBIL 2項(xiàng)指標(biāo)差異顯著(表2)。

        2.3 血?dú)夥治?/p>

        實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,普通級(jí)雌、雄豚鼠Lac指標(biāo)差異顯著(表3)。

        2.4 心率、頸總動(dòng)脈壓、心室壓

        實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,普通級(jí)雌、雄豚鼠的頸總動(dòng)脈舒張壓、頸總動(dòng)脈平均壓以及LVMP 3項(xiàng)指標(biāo)差異顯著,LVSP差異極顯著(表4)。

        2.5 主要臟器參數(shù)

        實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,普通級(jí)FMMU白化豚鼠雌、雄之間臟器重量和臟器系數(shù)無(wú)顯著性差異(表5)。

        表2 雄性與雌性普通級(jí)FMMU白化豚鼠血液生化Tab.2 Comparison of blood biochemistry between male and female FMMU albino guinea-pig

        表3 雄性與雌性普通級(jí)FMMU白化豚鼠血?dú)夥治鯰ab.3 Comparison of blood gas analysis between male and female FMMU albino guinea-pig

        表4 雄性與雌性普通級(jí)FMMU白化豚鼠心率、頸總動(dòng)脈壓、心室壓Tab.4 Comparison of heart rate,carotid artery pressure and ventricular pressure between male and female FMMU albino guinea-pig

        表5 雄性與雌性普通級(jí)FMMU白化豚鼠主要臟器參數(shù)Tab.5 Comparison of main organ weights between male and female FMMU albino guinea-pig

        3 討論

        本文針對(duì)毒理藥理等實(shí)驗(yàn)中常用的250~350g體重范圍內(nèi)白化豚鼠的生理生化特征進(jìn)行測(cè)定,供相關(guān)領(lǐng)域的研究人員參考使用。在相近體重范圍內(nèi),雌性與雄性普通級(jí)FMMU白化豚鼠各主要臟器重量及臟器系數(shù)差異不顯著,測(cè)定數(shù)據(jù)較之前文獻(xiàn)報(bào)道[5]而言,更準(zhǔn)確地說(shuō)明性別對(duì)臟器參數(shù)沒(méi)有影響。血液檢測(cè)結(jié)果顯示,在22項(xiàng)血常規(guī)、22項(xiàng)血生化及23項(xiàng)血?dú)庵笜?biāo)中,除血小板計(jì)數(shù)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、乳酸4項(xiàng)指標(biāo)外不存在性別間差異,與顧為望[6]等關(guān)于雌雄間血生理生化差異顯著的報(bào)道不一致。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)主要存在于肝臟、心臟和骨骼肌中,肝臟發(fā)生炎癥病變可使血清ALT增高。外周血ALT水平與缺血性腦卒中患者預(yù)后獨(dú)立相關(guān),外周血ALT升高可降低谷氨酸鹽對(duì)腦細(xì)胞的損害[7]。研究表明高脂血癥豚鼠血清ALT顯著增加[4],而總膽紅素(TBIL)主要用來(lái)診斷是否有肝臟疾病或膽道是否發(fā)生異常[8]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,雄性豚鼠ALT、TBIL顯著高于雌性,因此,在使用白化豚鼠開(kāi)展相關(guān)研究時(shí)應(yīng)注意可能存在的性別差異。此外,在血液生理生化以往研究的基礎(chǔ)上[4,9-10],本實(shí)驗(yàn)補(bǔ)充了豚鼠血?dú)夥治龅臏y(cè)定結(jié)果。

        豚鼠心功能觀察通常采用測(cè)定心率、冠脈流量[3]、心電圖[2]等方法,而少見(jiàn)報(bào)道豚鼠頸總動(dòng)脈壓及心室壓的測(cè)定值,而血壓及心室壓是評(píng)估心血管功能的重要指標(biāo)[11-12]。目前,國(guó)內(nèi)外測(cè)定豚鼠無(wú)創(chuàng)血壓的儀器較少,耗材昂貴,使用者少,可供查閱的數(shù)據(jù)不足。本文采用有創(chuàng)血壓測(cè)定的結(jié)果可供使用白化豚鼠開(kāi)展心血管方面實(shí)驗(yàn)的研究者參考。

        [1]顧為望,曲莉芝,王萬(wàn)山,等.FMMU白化豚鼠免疫學(xué)特性研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào),2002,10(2):105-107.

        [2]張嘉寧,顧為望,王洪濤.FMMU白化豚鼠心電圖分析[J].上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué),1999,19(1):35-37.

        [3]王燕,趙美瞇,閔冬雨,等.不同缺血時(shí)間對(duì)豚鼠離體心臟缺血/再灌注損傷的影響[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2013,29(1):73-78.

        [4]羅漪.豚鼠與SD大鼠高脂血癥模型的比較研究[D].昆明:昆明醫(yī)學(xué)院,2009.

        [5]詹純列,王洪濤,李建軍,等.封閉群FMMU白化豚鼠主要臟器重量及臟器系數(shù)的測(cè)定[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào),1997,5(1):33-36.

        [6]顧為望,王洪濤,張嘉寧,等.封閉群FMMU白化豚鼠與短毛三色豚鼠血液成分比較[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào),1997,5(1):23-28.

        [7]劉佳樂(lè),王雪梅,曹婧,等.谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平與急性期缺血性腦卒中患者短期預(yù)后的關(guān)系[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2015,35(4):935-937.

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        [9]張琨,孫淑華,仉慧敏,等.無(wú)菌豚鼠與普通豚鼠血液學(xué)參數(shù)的比較[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào),2010,18(2):176-180.

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        [11]侯翠紅,李亞輝,王文,等.自發(fā)性高血壓大鼠右心室壓、肺動(dòng)脈壓變化的觀察[J].中國(guó)分子心臟病學(xué)雜志,2007,7(1):37-38.

        [12]胡高頻,李旭楠,姜東炬.心臟磁共振成像評(píng)價(jià)肺動(dòng)脈高壓患者右心室功能的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2014,20(19):3585-3587.

        The measurement and comparison of basic physiological and biochemical index of male and female FMMU albimo guinea-pig

        ZHANG Xiao-yu,ZHANG Xiu-yan,CHEN Wei-sheng,LIANG Ning,ZHAN Chun-lie
        (Animal experiment center,Guangzhou General Hospital of Guangzhou Military Command of PLA,Guangzhou 510010,China)

        ObjectiveTo determine and compare the parameters of blood,heart rate,carotid artery pressure,ventricular pressure and organ indexes of male and female FMMU albino guinea-pig.MethodsA total of 30 guinea-pig about 250~350 g weight were fed for a week,then blood physiological and biochemical index,blood gas and carotid artery pressure were determined,ventricular pressure were measured by arterial catheterization and heart rate were measured on the respiratory support condition.Finally,weight of guinea-pig body and main organ were weighed.ResultThe difference of platelet count,glutamic-pyruvic transaminase,total bilirubin and lactic acid were significant(P<0.05 or P<0.01).The difference of carotid diastolic blood pressure and mean blood pressure,left ventricular systolic pressure and mean pressure were totally significant(P<0.05 or P<0.01).And there were no significant differences in weight and organ coefficient of main organs.ConclusionThere were differences in blood physiology and biochemistry,blood gas,carotid artery pressure and ventricular pressure in different gender of the ordinary grade FMMU albino guinea-pig.

        FMMU albino guinea-pig;Blood parameter;Carotid artery pressure;Ventricular pressure;Organ parameter

        R-332

        A

        1671-7856(2015)11-0037-05

        10.3969.j.issn.1671-7856.2015.11.009

        廣東省科技計(jì)劃基礎(chǔ)條件建設(shè)項(xiàng)目(2012B060300022)。

        張曉玉(1989-),女,研究方向:人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的開(kāi)發(fā)利用,E-mail:zhxiaoyu11@163.com。

        詹純列(1963-),男,研究方向:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人類(lèi)疾病動(dòng)物模型,E-mail:1513508151@qq.com。

        ﹞2015-09-08

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