徐曉波 王寶維葛文華 張名愛(ài) 解 超（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)質(zhì)水禽研究所，國(guó)家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系營(yíng)養(yǎng)與飼料功能研究室，青島266109）

鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶對(duì)肥胖模型大鼠體重、脂肪沉積及脂質(zhì)代謝的影響

徐曉波 王寶維?葛文華 張名愛(ài) 解 超
（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)質(zhì)水禽研究所，國(guó)家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系營(yíng)養(yǎng)與飼料功能研究室，青島266109）

摘 要:本試驗(yàn)旨在研究鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶對(duì)肥胖大鼠體重、脂肪沉積及脂質(zhì)代謝影響。隨機(jī)選取雄性大鼠108只，體重220～240 g，適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d。分為對(duì)照組（Ⅰ組）、高脂組（Ⅱ組）和高脂模型組；高脂模型組造模成功后，將其按體重隨機(jī)分為7組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4只；各組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0（Ⅲ組）、0.01%（Ⅳ組）、0.05%（Ⅴ組）、0.1%（Ⅵ組）、0.2%（Ⅶ組）、0.4%（Ⅷ組）、0.8%（Ⅸ組）的果膠酶。試驗(yàn)期8周。結(jié)果表明:1）鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶能夠有效抑制肥胖模型大鼠體重的增長(zhǎng)，降低Lee’s指數(shù)，控制體型發(fā)育。2）鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶能夠降低肥胖模型大鼠機(jī)體脂肪沉積量。3）鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶能夠有效地對(duì)肥胖模型大鼠由于攝入高脂飼糧引起的脂肪肝進(jìn)行干預(yù)，使其恢復(fù)到正常水平。4）鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶能夠降低肥胖模型大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇、游離脂肪酸含量，提高血清高密度脂蛋白膽固醇含量。5）鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶能夠降低肥胖模型大鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性，提高血清脂蛋白酯酶和肝酯酶活性。由此可見(jiàn)，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶對(duì)肥胖模型大鼠脂肪沉積和脂質(zhì)代謝具有顯著干預(yù)修復(fù)作用，降脂效果明顯。

關(guān)鍵詞:鵝源草酸青霉果膠酶；肥胖大鼠；脂肪沉積；脂質(zhì)代謝

果膠酶是能夠催化果膠物質(zhì)降解的一組酶的總稱(chēng)。果膠物質(zhì)通常存在于高等植物中，如蔬菜、水果、玉米、大豆等，是非淀粉多糖的成分之一［1］。隨著我國(guó)工業(yè)的迅速崛起和農(nóng)業(yè)的迅速發(fā)展，果膠酶的市場(chǎng)需求量也越來(lái)越大，應(yīng)用方向越來(lái)越廣泛［2］。為此，開(kāi)展果膠酶新型利用方向的研究，對(duì)于開(kāi)發(fā)新型酶制劑具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)意義。Osei等［3］研究表明，在肉雞飼糧中添加一定量的果膠酶制劑，可以提高42日齡的肉雞屠宰率。Tahir等［4］研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加果膠酶與纖維素酶，可以顯著提高肉雞的屠宰率和胸肌率。雷廷等［5］研究表明，在餅粕類(lèi)飼糧中添加果膠酶能夠提高雞的代謝能和氨基酸消化率。許毅［6］研究表明，在肉雞飼糧中添加果膠酶有改善肉雞生長(zhǎng)性能的趨勢(shì)，全期日增重和料重比均有不同程度改善。王春林等［7］研究表明，在玉米－豆粕飼糧中添加果膠酶制劑，能夠顯著提高21日齡肉仔雞的平均日增重和平均日采食量，并且提高飼料轉(zhuǎn)化率，與添加金霉素有相當(dāng)?shù)拇偕L(zhǎng)作用。姜曉霞等［8］研究表明，在肉雞飼糧中添加一定量的果膠酶可以提高肉雞的腿肌率，降低腹脂率。梅寧安等［9］研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加飼料級(jí)果膠酶可顯著提高肉仔雞的生長(zhǎng)性能。由此可見(jiàn)，果膠酶對(duì)家禽生長(zhǎng)性能和飼料轉(zhuǎn)化率的影響已經(jīng)進(jìn)行了初步探索，但對(duì)機(jī)體脂肪沉積規(guī)律、脂質(zhì)代謝機(jī)理、改變機(jī)體營(yíng)養(yǎng)再分配和降脂減肥效果等領(lǐng)域尚未見(jiàn)系統(tǒng)報(bào)道。為此，本試驗(yàn)以大鼠作為研究對(duì)象，在肥胖模型大鼠飼糧中添加不同水平鵝源草酸青霉果膠酶，研究其對(duì)試驗(yàn)肥胖模型大鼠體重、脂肪沉積量和脂質(zhì)代謝指標(biāo)的影響，探索果膠酶對(duì)機(jī)體脂肪沉積規(guī)律和代謝機(jī)理，為進(jìn)一步探明果膠酶功能提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與材料

雄性Wistar大鼠由青島派特福德白鼠養(yǎng)殖專(zhuān)業(yè)合作社提供，試驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào):SCXK（魯）20090007，編號(hào)0008362；基礎(chǔ)對(duì)照飼糧和高脂飼糧由南通特洛菲飼糧科技有限公司提供；果膠酶由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)質(zhì)水禽研究所提供，通過(guò)鵝源草酸青霉發(fā)酵獲得（酶活460 U/g）。酶活定義1 g酶粉或1 mL酶液在50℃，pH 3.5的條件下，1 h分解果膠產(chǎn)生1 mg半乳糖醛酸為1個(gè)酶活單位。

表1　飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of diets（air?dry basis）　%

1.2 主要儀器與試劑

自動(dòng)生化分析儀（日立7600?020型）；低溫高速離心機(jī)（Sigma公司）；超低溫冰箱（日本三洋公司）；MAPADA UV－1100型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海美譜達(dá)儀器有限公司）；XS－204電子分析天平（梅特勒－托利多集團(tuán)）；微型移液器（德國(guó)Ep?pendorf公司）；DKB－501A型超級(jí)恒溫水槽（上海精宏試驗(yàn)設(shè)備有限公司）；WH－2微型旋渦混合儀（上海滬西分析儀器有限公司）等。

總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（total triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high?density lipoprotein cholesterol，HDL?C）、低密度脂蛋白膽固醇（low?density lipoprotein cholester?ol，LDL?C）、脂蛋白酯酶（lipoprotein lipase，LPL）、肝酯酶（hepaticendothelaillipase，HL）、游離脂肪酸（nonesterified fatty acid，NEFA）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（as?partate transaminase，AST）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所。

1.3 試驗(yàn)方法

選取108只體重為（220±20）g健康雄性Wistar大鼠，適應(yīng)性為3 d。試驗(yàn)分如下2個(gè)階段進(jìn)行。

造模試驗(yàn):1～2周齡，按體重隨機(jī)分為對(duì)照組（Ⅰ組）、高脂組（Ⅱ組）、高脂模型組，其中對(duì)照組和高脂組各12只，高脂模型組84只；對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，高脂組和高脂模型組飼喂60%高脂飼糧。

果膠酶飼養(yǎng)效果試驗(yàn):3～8周齡，高脂造模成功后，將高脂模型組84只大鼠按體重隨機(jī)分為7組（Ⅲ～Ⅸ組），每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4只；每個(gè)組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0（Ⅲ組）、0.01%（Ⅳ組）、0.05%（Ⅴ組）、0.1%（Ⅵ組）、0.2%（Ⅶ組）、0.4%（Ⅷ組）、0.8%（Ⅸ組）的果膠酶。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，高脂組飼喂高脂飼糧，高脂模型組（Ⅲ～Ⅸ組）喂飼添加相應(yīng)比例的果膠酶飼糧。各組均自由采食和飲水。8周后，測(cè)定大鼠的生長(zhǎng)指標(biāo)、脂肪沉積情況和脂質(zhì)代謝指標(biāo)。

1.4 飼養(yǎng)管理

適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d使大鼠適應(yīng)環(huán)境，適應(yīng)期間飼喂基礎(chǔ)對(duì)照飼糧；造模期間，依次按照一定比例遞增給予高脂飼糧。整個(gè)試驗(yàn)期間，大鼠自由攝食、飲水，每天觀(guān)察大鼠的采食、飲水情況；每天觀(guān)察大鼠的精神狀態(tài)、健康狀況和活動(dòng)情況，每周稱(chēng)量1次體重。

室內(nèi)溫度（22±2）℃，相對(duì)濕度55%±5%，室內(nèi)通風(fēng)良好，保持飼養(yǎng)室及周?chē)h(huán)境的安靜。每3 d更換1次墊料，每周用適宜濃度的84消毒液進(jìn)行消毒，保持鼠籠清潔衛(wèi)生，12 h光照周期。

1.5 測(cè)試指標(biāo)及檢測(cè)方法

體重:每周用電子天平稱(chēng)重，記錄試驗(yàn)大鼠體重變化。

Lee’s指數(shù):測(cè)量大鼠體長(zhǎng)（從鼻至肛門(mén)的長(zhǎng)度），計(jì)算其Lee’s指數(shù)。

Lee’s指數(shù)＝（體重×103）1/3/體長(zhǎng)。體脂比:將大鼠腎周脂肪、睪周脂肪、腸系膜脂肪取出，于電子天平稱(chēng)重。

體脂比（%）＝（脂肪總重/體重）×100。

血脂測(cè)定:TC、TG、HDL?C、LDL?C、NEFA含量及LPL、HL、AST、ALT活性均經(jīng)南京建成生物工程研究所所購(gòu)試劑盒測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)利用SPSS 17.0軟件包中的平衡試驗(yàn)設(shè)計(jì)方差分析過(guò)程（ANOVA）進(jìn)行，均值的多重比較采用Duncan氏法進(jìn)行。

2　結(jié)果與分析

2.1 高脂飼糧誘導(dǎo)肥胖大鼠模型的建立

由表2可以看出，飼喂60%高脂飼糧的高脂模型組大鼠在第2周時(shí)，體重開(kāi)始高于飼喂基礎(chǔ)對(duì)照飼糧的對(duì)照組20%以上，并持續(xù)增重，表明高脂飼糧誘導(dǎo)肥胖大鼠模型建模成功。

表2　高脂飼糧對(duì)建模期大鼠體重的影響Table 3 Effects of high?fat diet on body weight of rats during model?establishment period　g

2.2 試驗(yàn)大鼠體重變化

由表3可以看出，各組間大鼠初重?zé)o顯著差異（P＞0.05）。造模結(jié)束后，各組造模后體重顯著高于Ⅰ組（P＜0.05）。試驗(yàn)結(jié)束后，與Ⅰ組相比，Ⅱ組、Ⅲ組大鼠末重極顯著提高（P＜0.01），Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠末重顯著提高（P＜0.05），Ⅵ組、Ⅶ組大鼠末重?zé)o顯差異（P＞0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅳ組大鼠末重顯著降低（P＜0.05），Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠末重極顯著降低（P＜0.01）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組大鼠末重?zé)o顯著差異（P＞0.05），Ⅴ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠末重顯著降低（P＜0.05），Ⅵ組、Ⅶ組大鼠末重極顯著降低（P＜0.01）。

結(jié)果表明，向大鼠飼糧中添加一定量的鵝源草酸產(chǎn)果膠酶，能夠顯著抑制肥胖模型大鼠體重的增加。

2.3 大鼠Lee’s指數(shù)與體脂比

由表4可以看出，與Ⅰ組相比，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組大鼠Lee’s指數(shù)極顯著提高（P＜0.01），Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠Lee’s指數(shù)均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅳ組大鼠Lee’s指數(shù)顯著降低（P＜0.05），Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠Lee’s指數(shù)均極顯著降低（P＜0.01）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組大鼠Lee’s指數(shù)無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅴ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠Lee’s指數(shù)顯著降低（P＜0.05），Ⅵ組和Ⅶ組大鼠Lee’s指數(shù)均極顯著降低（P＜0.01）。

與Ⅰ組相比，Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠體脂比無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組大鼠體脂比顯著提高（P＜0.05），Ⅱ組大鼠體脂比極顯著提高（P＜0.01）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組大鼠體脂比顯著降低（P＜0.05），Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠體脂比極顯著降低（P＜0.01）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組大鼠體脂比無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅷ組、Ⅸ組大鼠體脂比顯著降低（P＜0.05），Ⅶ組大鼠體脂比極顯著降低（P＜0.01）。其中Ⅶ組大鼠體脂比較Ⅲ組降低48.10%。

結(jié)果表明，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶能夠有效降低肥胖模型大鼠Lee’s指數(shù)，控制體型發(fā)育；并能夠降低肥胖模型大鼠機(jī)體脂肪沉積量，具有明顯的降脂作用，從而改變了機(jī)體組織成分的構(gòu)成。

表3　鵝源草酸青霉果膠酶對(duì)大鼠體重的影響Table 3 Effects of pectinase produced by Penicillium oxalicum Currie＆Thom on body weight of rats

表4　鵝源草酸青霉果膠酶對(duì)大鼠Lee’s指數(shù)和體脂比的影響Table 4 Effects of pectinase produced by Penicillium oxalicum Currie＆Thom on Lee’s index and body fat ratio of rats

2.4 大鼠臟體指數(shù)

由表5可以看出，與Ⅰ組相比，其他組大鼠心體指數(shù)、脾體指數(shù)、胃體指數(shù)、腎體指數(shù)和生殖體指數(shù)均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。肝體指數(shù)有所差異，與Ⅰ組相比，Ⅱ組大鼠肝體指數(shù)極顯著提高（P＜0.01），Ⅲ組、Ⅳ組大鼠肝體指數(shù)顯著提高（P＜0.05），Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠肝體指數(shù)無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅳ組大鼠肝體指數(shù)無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅴ組大鼠肝體指數(shù)顯著降低（P＜0.05），Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠肝體指數(shù)極顯著降低（P＜0.01）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組大鼠肝體指數(shù)無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠肝體指數(shù)顯著降低（P＜0.05）。

結(jié)果表明，肥胖模型大鼠由于攝入高脂飼糧，形成了脂肪肝，并引起肝重的增加；鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶能夠?qū)ζ溆行У剡M(jìn)行干預(yù)，使其恢復(fù)到正常水平。

表5　鵝源草酸青霉果膠酶對(duì)大鼠臟體指數(shù)的影響Table 5 Effects of pectinase produced by Penicillium oxalicum Currie＆Thom on organ index of rats　%

2.5 大鼠血脂代謝

由表6可以看出，與Ⅰ組相比，Ⅲ組大鼠血清TC含量顯著提高（P＜0.05），Ⅱ組大鼠血清TC含量極顯著提高（P＜0.01），Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅴ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清TC含量顯著降低（P＜0.05），Ⅵ組和Ⅶ組大鼠血清TC含量極顯著降低（P＜0.01），Ⅳ組大鼠血清TC含量無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清TC含量均無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅵ組和Ⅶ組大鼠血清TC含量顯著降低（P＜0.05）。

與Ⅰ組相比，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清TG含量極顯著提高（P＜0.01），Ⅳ組大鼠血清TG含量顯著提高（P＜0.05），Ⅴ組、Ⅵ組和Ⅶ組均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清TG含量顯著降低（P＜0.05），Ⅴ組、Ⅵ組和Ⅶ組大鼠血清TG含量極顯著降低（P＜0.01）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清TG含量均無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅴ組大鼠血清TG含量顯著降低（P＜0.05），Ⅵ組和Ⅶ組大鼠血清TG含量極顯著降低（P＜0.01）。

與Ⅰ組相比，Ⅱ組大鼠血清HDL?C含量顯著降低（P＜0.05），Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清HDL?C含量均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清HDL?C含量顯著提高（P＜0.05），Ⅵ組大鼠血清HDL?C含量極顯著提高（P＜0.01），Ⅲ組大鼠血清HDL?C含量無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清HDL?C含量均無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅵ組大鼠血清HDL?C含量顯著提高（P＜0.05）。

與Ⅰ組相比，Ⅱ組大鼠血清LDL?C含量顯著提高（P＜0.05），Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清LDL?C含量均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清LDL?C含量均顯著降低（P＜0.05）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清LDL?C含量均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

與Ⅰ組相比，Ⅱ組、Ⅳ組、Ⅴ組大鼠血清NEFA含量極顯著提高（P＜0.01），Ⅲ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清NEFA含量顯著提高（P＜0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清NEFA含量極顯著降低（P＜0.01），Ⅳ組、Ⅴ組大鼠血清NEFA含量顯著降低（P＜0.05）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組大鼠血清NEFA含量顯著提高（P＜0.05），Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組和Ⅸ組大鼠血清NEFA含量無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

結(jié)果表明，在大鼠飼糧中添加一定量的鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶能夠顯著降低大鼠血清中TC、TG、NEFA含量，并能提高HDL?C含量。

表6　鵝源草酸青霉果膠酶對(duì)大鼠血清脂類(lèi)代謝的影響Table 6 Effects of pectinase produced by Penicillium oxalicum Currie＆Thom on serum lipid metabolism of rats

2.6 大鼠肝臟指標(biāo)

由表7可以看出，與Ⅰ組相比，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組大鼠血清ALT活性極顯著提高（P＜0.01），Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅸ組大鼠血清ALT活性顯著提高（P＜0.05），Ⅷ組大鼠血清ALT活性無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組大鼠血清ALT活性顯著降低（P＜0.05），Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠血清ALT活性極顯著降低（P＜0.01）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組大鼠血清ALT活性無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅶ組、Ⅸ組大鼠血清ALT活性顯著降低（P＜0.05），Ⅷ組大鼠血清ALT活性極顯著降低（P＜0.01）。

與Ⅰ組相比，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組大鼠血清AST活性極顯著提高（P＜0.01），Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠血清AST活性顯著提高（P＜0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組大鼠血清AST活性顯著降低（P＜0.05），Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠血清AST活性極顯著降低（P＜0.01）；與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組大鼠血清AST活性無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠血清AST活性顯著降低（P＜0.05）。

與Ⅰ組相比，Ⅱ組大鼠血清LPL活性顯著降低（P＜0.05），Ⅲ組和Ⅳ組大鼠血清LPL活性無(wú)顯著差異（P＞0.05），Ⅴ組、Ⅵ組大鼠血清LPL活性顯著提高（P＜0.05），Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠血清LPL活性極顯著提高（P＜0.01）。與Ⅱ組相比，Ⅲ組和Ⅳ組大鼠血清LPL活性顯著提高（P＜0.05），Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠血清LPL活性極顯著提高（P＜0.01）；與Ⅲ組相比，Ⅴ組、Ⅵ組大鼠血清LPL活性顯著提高（P＜0.05），Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠血清LPL活性極顯著提高（P＜0.01），Ⅳ組大鼠血清LPL活性無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

與Ⅰ組相比，Ⅱ組大鼠血清HL活性極顯著降低（P＜0.01），Ⅲ組大鼠血清HL活性顯著降低（P＜0.05），Ⅵ組大鼠血清HL活性極顯著提高（P＜0.01），Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠血清HL活性無(wú)顯著差異（P＞0.05）；與Ⅱ組相比，Ⅲ組大鼠血清HL活性顯著提高（P＜0.05），Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅷ組、Ⅸ組大鼠血清HL活性極顯著提高（P＜0.01）。與Ⅲ組相比，Ⅳ組、Ⅴ組、Ⅷ組大鼠血清HL活性顯著提高（P＜0.05），Ⅵ組、Ⅶ組、Ⅸ組大鼠血清HL活性極顯著提高（P＜0.01）。

結(jié)果表明，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶能夠降低大鼠血清ALT和AST活性，并能在一定程度上提高大鼠血清LPL和HL活性。

3　討 論

3.1 高脂飼糧誘導(dǎo)肥胖大鼠模型的建立

昝玉璽等［11］研究表明，高脂飼糧能夠引起大鼠產(chǎn)生肥胖，并且同時(shí)伴有高脂血癥；王根輩等［12］研究表明，應(yīng)用限制喂養(yǎng)的方法便于造成營(yíng)養(yǎng)性的大鼠肥胖模型，并引起動(dòng)物高脂血癥，以上研究都與本試驗(yàn)的原理和結(jié)果基本相同。本試驗(yàn)選?。?20±20）g的健康雄性Wistar大鼠，飼喂60%高脂飼糧的肥胖模型組大鼠在第2周時(shí)，體重開(kāi)始高于飼喂基礎(chǔ)對(duì)照飼糧的Ⅰ組20%以上，表明60%高脂飼糧誘導(dǎo)肥胖大鼠模型建立成功。

表7　鵝源草酸青霉果膠酶對(duì)大鼠肝臟脂類(lèi)代謝酶活性的影響Table 7 Effects of pectinase produced by Penicillium oxalicum Currie＆Thom on liver lipid metabolism enzyme activity of rats

3.2 鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶對(duì)肥胖大鼠Lee’s指數(shù)和體脂比的影響

姜曉霞等［8］研究表明，在肉雞的飼糧中添加0.25%的果膠酶對(duì)肉雞的生長(zhǎng)發(fā)育影響顯著，并可以顯著提高胸肌和腿肌率，降低腹脂率。何明等［13］的研究表明，Lee’s指數(shù)用于評(píng)價(jià)成年大鼠肥胖程度方面具有可行性和準(zhǔn)確性，因此可以用Lee’s指數(shù)來(lái)作為評(píng)價(jià)成年肥胖模型大鼠肥胖程度的指標(biāo)。黃宗銹等［14］研究表明，在人的食物中添加左旋肉堿可以使肥胖受試者的體重下降0.7 kg，體脂總量減少0.6 kg。本試驗(yàn)研究表明，與Ⅱ組相比，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶組的Lee’s指數(shù)和體脂比顯著或極顯著降低；與Ⅲ組相比，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶組能降低大鼠的Lee’s指數(shù)和體脂比。結(jié)果表明，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶可以有效抑制脂肪的沉積，從而起到降低內(nèi)臟脂肪，達(dá)到體重降低的目的。

3.3 鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶對(duì)肥胖大鼠血脂變化的影響

肥胖與飲食含量，環(huán)境因素有著密切的關(guān)系，高熱量高油脂的飲食會(huì)引發(fā)多種新陳代謝疾?。?5］。陳文岳等［16］研究表明，應(yīng)用烏龍茶治療肥胖癥可以明顯減輕體重，減少腹部皮下脂肪和TG 及TC含量。王慧銘等［17］研究表明，昆布多糖能夠降低TG和TC含量，改善血清HDL?C含量，作用于洛伐他汀無(wú)異。劉慶陽(yáng)等［18］研究表明，在飼糧中每天添加100 mg/kg的大黃酸可以降低肥胖大鼠NEFA含量。李瀟等［19］研究表明，對(duì)肥胖大鼠每天按照100 mg/kg灌胃石榴花多酚可以顯著降低血清中的NEFA含量。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與Ⅱ組相比，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶組的TC、TG、LDL?C、NEFA含量顯著降低，HDL?C含量顯著提高；與Ⅲ組相比，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶組的LDL?C和NEFA含量無(wú)顯著差異，TC、TG含量或顯著性降低。結(jié)果表明，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶可以有效降低肥胖大鼠的TC、TG含量，并能提高HDL?C含量。

3.4 鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶對(duì)肥胖大鼠肝臟脂類(lèi)代謝酶活性的影響

ALT和AST是肝功能檢測(cè)中2個(gè)重要指標(biāo)，其高低標(biāo)志著肝細(xì)胞實(shí)質(zhì)損害的程度。當(dāng)肝組織損傷時(shí)，細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)氨酶可進(jìn)入血中，引起血ALT含量升高。AST存在于肝細(xì)胞漿內(nèi)，并分布于線(xiàn)粒體內(nèi)，當(dāng)肝細(xì)胞損害嚴(yán)重時(shí)，線(xiàn)粒體內(nèi)AST釋放入血液中，使血清AST含量升高。陳麗等［20］研究發(fā)現(xiàn)，將柿葉總黃酮喂食飲食性高脂血癥大鼠可使試驗(yàn)組大鼠血清AST和ALT活性降低。范婷婷［21］研究發(fā)現(xiàn)，將荷葉生物堿給予高脂血癥大鼠，血清中的ALT和AST活性均有顯著降低，效果接近于降脂藥物辛伐他汀。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，添加果膠酶試驗(yàn)組與Ⅱ組和對(duì)照組相比，大鼠血清ALT和AST活性顯著或極顯著降低。結(jié)果表明，添加果膠酶能夠降低肥胖模型大鼠血清ALT和AST活性，對(duì)肥胖造成的肝損傷有明顯修復(fù)作用。

LPL和HL是脂質(zhì)代謝中的關(guān)鍵酶，能夠降低血漿脂蛋白和TG含量；LPL和HL高表達(dá)量可以有效抑制血清中的膽固醇和TG活性，并能提高高密度脂蛋白含量，有效避免高脂血癥和脂肪肝的發(fā)生。曹阿芳等［22］研究表明，將車(chē)前子多糖中高劑量添加到飼糧中，大鼠的血清的LPL活性較正常模型組顯著升高。徐新穎等［23］研究表明，將海帶粉加入到大鼠飼糧中，動(dòng)物血清和肝組織中的LPL和HL活性均高于模型對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加果膠酶能夠明顯提高肥胖模型大鼠血液中LPL和HL活性，從而加強(qiáng)脂類(lèi)代謝，達(dá)到減少機(jī)體脂肪沉積的作用。有關(guān)果膠酶降血脂分子調(diào)控機(jī)制還有待于研究。

4　結(jié) 論

綜上試驗(yàn)結(jié)果表明，鵝源草酸青霉產(chǎn)果膠酶對(duì)肥胖模型大鼠具有如下修復(fù)作用:

①能夠有效抑制肥胖模型大鼠體重的增長(zhǎng)，降低Lee’s指數(shù)，控制體型發(fā)育。

②能夠降低肥胖模型大鼠機(jī)體脂肪沉積量，具有明顯的降脂作用。

③能夠有效地對(duì)肥胖模型大鼠由于攝入高脂飼糧引起的脂肪肝進(jìn)行干預(yù)，使其恢復(fù)到正常水平。

④能夠降低肥胖模型大鼠血清TC、TG、LDL?C、NEFA含量，提高血清HDL－C含量。

⑤能夠降低肥胖模型大鼠血清ALT和AST活性，提高血清LPL和HL活性。

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（責(zé)任編輯 武海龍）

Effects of Pectinase Produced by Penicillium oxalicum Currie＆Thom on Body Weight，Lipid Deposition and Lipid Metabolism of Obese Model Rats

XU Xiaobo WANG Baowei?GE Wenhua ZHANG Mingai XIE Chao
（Nutrition and Feed Laboratory of China Agriculture Research System，Institute of High Quality Waterfowl，Qingdao Agricultural University，Qingdao 266109，China）

Abstract:This experiment was conducted to study the effects of pectinase produced by Penicillium oxalicum Currie＆Thom on body weight，lipid deposition and lipid metabolism of obese model rats.A total of 108 male rats with body weight of 220 to 240 g，adapted feeding 3 days.The rats were divided into control group （groupⅠ），hyperlipidemia group（groupⅡ）and other hyperlipidemia model groups.After successful mod?eling，the rats were randomly divided into 7 groups with 3 replicates per group and 4 rats per replicate.Rats in the 7 groups were fed the basal diets supplemented with 0（groupⅢ），0.01%（groupⅣ），0.05%（groupⅤ），0.1%（groupⅥ），0.2%（groupⅦ），0.4%（groupⅧ）and 0.8%（groupⅨ）pectinase，respectively.The experiment last for 8 weeks.The results showed as follows:1）the pectinase produced by Penicillium oxa?licum Currie＆Thom could restrain the increasing weight，decreased the Lee’s index and control portion size of obese model rats.2）The pectinase could significantly reduce the amount of lipid deposition of obese model rats.3）The pectinase could restore the fatty liver disease of obese model rats to the normal level due to intake of high?fat diet.4）The pectinase could reduce the content of total cholesterol，total triglyceride，low?density lipoprotein cholesterol and nonesterified fatty acid in serum of obese model rats，and increase the serum high?density lipoprotein cholesterol content.5）It also could reduce the activity of aspartate transaminase and alanine aminotransferase in serum of obese model rats，and increase the activity of serum lipoprotein lipase and hepati?cendothelaillipase in serum.In conclusion，the pectinase produced by Penicillium oxalicum Currie＆Thom has significant effect on reducing the deposition and serum lipid of obese model rats.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（5）:1650?1658］

Key words:pectinase produced by Penicillium oxalicum Currie＆Thom；obese rats；lipid deposition；lipid metabolism

Corresponding author?，professor，E?mail:wangbw＠qau.edu.cn

通信作者:?王寶維，教授，研究生導(dǎo)師，E?mail:wangbw＠qau.edu.cn

基金項(xiàng)目:國(guó)家農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項(xiàng)目（2013G B2C 620543）；山東省農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項(xiàng)目（魯科農(nóng)字2012?65）

作者簡(jiǎn)介:徐曉波（1989—），男，山東濰坊人，碩士研究生，研究方向?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)與保健。E?mail:xiaobo45697＠126.com

收稿日期:2014－11－01

doi:10.3969/j.issn.1006?267x.2015.05.038

中圖分類(lèi)號(hào):S816.7

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào):1006?267X（2015）05?1650?09