李揚(yáng)海 任 欣 孫園園 曾小海 陳南喬

廣東省第二人民醫(yī)院 生殖醫(yī)學(xué)中心，廣東 廣州 510317

135例不育男性體內(nèi)精液指標(biāo)與頂體酶表達(dá)水平的研究

李揚(yáng)海 任 欣 孫園園 曾小海 陳南喬

廣東省第二人民醫(yī)院 生殖醫(yī)學(xué)中心，廣東 廣州 510317

目的：觀察不育男性體內(nèi)精液指標(biāo)與頂體酶表達(dá)水平。方法：收集135例不育男性作為研究組，對(duì)照組為進(jìn)行婚檢的健康者，共135例。對(duì)比研究組和對(duì)照組精子頂體酶、精尾部腫脹率及活動(dòng)精子率以及生化指標(biāo)中精漿ZN 、酸性磷酸酶。結(jié)果：研究組精子頂體酶及活動(dòng)精子率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。研究組精漿ZN 、中性 a-糖苷酶低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：本次研究認(rèn)為頂體酶以及精漿ZN 、中性 a-糖苷酶是影響男性不孕的主要因素，精液分析為不育男性提供另一種檢測(cè)手段，為評(píng)估生育能力提供客觀依據(jù)。

不育 ；頂體酶 ；精液指標(biāo)

目前隨著社會(huì)節(jié)奏的加快，生活壓力的增大，患不育癥的男性比例逐年增多。精液分析是檢測(cè)男性生育能力的首要檢測(cè)手段，精液分析可以評(píng)估精子和精漿特征，其中精子的頂體酶活性是代表男性精液質(zhì)量的主要參考標(biāo)準(zhǔn)之一[1]。筆者采集135例不育男性的精液標(biāo)本，分析此類(lèi)患者精液的各項(xiàng)指標(biāo),研究精液質(zhì)量與頂體酶的關(guān)聯(lián)。具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院不孕不育科2013年3月至2014年8月共計(jì)135例不育男性作為研究對(duì)象，定義為研究組，平均年齡(36.8±8.9)歲。進(jìn)行婚檢，精液常規(guī)都達(dá)標(biāo)的健康者作為對(duì)照組，患者禁止性生活時(shí)間3～7d，共135例，平均年齡(35.1±10.2)歲。兩組一 般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) ①就診時(shí)臨床資料完整;②婚后同房大于1年、且不采取避孕手段而未育;③正常精液標(biāo)本為精液量≥2ml，每毫升精液中的精子數(shù)≥20×106/ml，精子中呈直線迅速向前運(yùn)動(dòng)者≥50%。④每個(gè)研究對(duì)象能配合護(hù)理人員，自愿參與本次研究。

1.3 排除指標(biāo) ①入院有各種急性、慢性感染, 或通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢查如血常規(guī)、內(nèi)毒素、體液培養(yǎng)以及腹部 B 超、CT 等實(shí)驗(yàn)室檢查診斷為感染者；②嚴(yán)重肝、腎功能不全,惡性腫瘤,自身免疫性疾病者，有藥物過(guò)敏、惡性心律失常者；③女方既往有卵巢、子宮炎，或有多次流產(chǎn)史，或醫(yī)院檢查診斷不能生育者。

1.4 精液采集方法 研究對(duì)象在采集精液前禁止性生活15d,在醫(yī)生的陪同下，對(duì)生殖器消毒，采取手淫法留取精液標(biāo)本,量約1～8ml，放在專(zhuān)用試管中，集中保存進(jìn)行檢測(cè)。

1.5 主要儀器及試劑 儀器：彩色JZF-I型精子質(zhì)量分析儀、美國(guó)Bio-Rad 550型酶標(biāo)儀、UV9600可見(jiàn)紫外分光光度計(jì)。試劑：精子頂體酶，精漿ZN 、酸性磷酸酶試劑盒。

1.6 檢測(cè)方法 ①采用彩色JZF-I型精子質(zhì)量分析儀作精子分析,記錄分析結(jié)果;②采用改良Kennedy法測(cè)定頂體酶活性;③參照文獻(xiàn)[2]，測(cè)定精子尾部腫脹率;④檢測(cè)精液的生化指標(biāo)：精漿ZN 、酸性磷酸酶。

1.7 評(píng)價(jià)方法 對(duì)比研究組和對(duì)照組精子頂體酶、精尾部腫脹率及活動(dòng)精子率以及生化指標(biāo)中精漿ZN 、酸性磷酸酶。

2 結(jié)果

2.1 研究組和對(duì)照組精子頂體酶及活動(dòng)精子率比較 研究組精子頂體酶及活動(dòng)精子率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 研究組和對(duì)照組精子頂體酶、精尾部腫脹率及活動(dòng)精子率比較±s)

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。

2.2 研究組和對(duì)照組精漿ZN 、中性α-糖苷酶比較 研究組精漿ZN、中性 a-糖苷酶低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 研究組和對(duì)照組精漿ZN 、中性α-糖苷酶比較±s)

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。

3 討論

精液分析是評(píng)價(jià)男性生育的重要手段,精液分析各指標(biāo)中精子頂體酶活性最能反映男性生育能力。精子頂體酶存在于精子頂體內(nèi)膜及赤道部膜上。研究[3-5]發(fā)現(xiàn)頂體酶類(lèi)似于胰蛋白酶，在進(jìn)入卵透明帶時(shí)，需要起到將卵透明帶水解的作用，使精子穿過(guò)卵丘再穿過(guò)透明帶，進(jìn)一步使精子與卵子結(jié)合。本次結(jié)果顯示研究組精子頂體酶明顯低于對(duì)照組，很好的反應(yīng)了精子質(zhì)量與精子頂體酶的相關(guān)性。此外，國(guó)外也有研究[6]報(bào)道精子頂體酶與精子密度、活動(dòng)精子率也有相關(guān)性。精子頂體酶活性降低的精液中,精子密度明顯降低, 活動(dòng)精子率下降。

精子生化成分與精子質(zhì)量、頂體酶也有一定關(guān)系。精液中精漿ZN 是保證精子活力的重要因素,精子進(jìn)入宮頸后,宮頸中精漿ZN 結(jié)合蛋白受體與精漿ZN 結(jié)合，激活頂體酶,使精子順利完成受精過(guò)程。本次研究發(fā)現(xiàn)研究組中精漿ZN 含量極低，使得頂體酶不能被有效激活，因此降低了受孕的幾率。不育男性精子由于精子少、活動(dòng)力弱，能量缺乏，導(dǎo)致精子尾部的精子膜在低滲透壓條件出現(xiàn)腫脹的幾率非常低。精子尾部低滲腫脹試驗(yàn)可以預(yù)測(cè)精子潛在的受精能量，特別是對(duì)不育者具有很高的臨床診斷意義。但是上述實(shí)驗(yàn)由于本院實(shí)驗(yàn)室無(wú)此設(shè)備，因此實(shí)驗(yàn)結(jié)果有待下次研究探討。

綜上所述，本次研究認(rèn)為頂體酶以及精漿ZN 、中性α-糖苷酶是影響男性不育的主要因素。精液分析為不育男性提供另一種檢測(cè)手段，為評(píng)估生育能力提供了客觀依據(jù)。

[1]黃宇烽,許瑞吉主編.男科診斷學(xué)[M ].上海:第二軍醫(yī)大學(xué)出版社,2013：125-158.

[2]CuiYH, Zhao RL, WangQ,etal. Determination of sperm acro-sin activity for evaluation ofmale fertility [J]. Asian J Andro,2013, 2(3): 229-232.

[3]馬遠(yuǎn)方,王玉蘭,白慧玲,等.精子膜功能完整性與精液各參數(shù)關(guān)系的研究[J].中華男科學(xué), 2012, 8(2): 103-105.

[4]王志平主編.泌尿男科腎臟疾病實(shí)驗(yàn)診斷與研究方法[M ].北京:人民軍醫(yī)出版社, 2014：183-189.

[5]白文俊,朱積川.生殖道感染與男性不育[J].中華男科學(xué),2011, 7(2): 105-108.

[6]黃永漢,鄧天勤,李穎娥,等.精子形態(tài)與頂體酶活性關(guān)系分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,6(9):677.

李揚(yáng)海(1984-)，男，初級(jí)檢驗(yàn)師，本科學(xué)歷，研究方向：男性精液常規(guī)檢驗(yàn)與不育。

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1007-8517(2015)09-0137-02

2015.03.30)