（通遼職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000）

摘 要：隨著鉛檢測中生物化學(xué)技術(shù)應(yīng)用技術(shù)的逐步推進(jìn)，目前針對此技術(shù)的研究成果也在不斷深入，而化學(xué)成分鉛的危害性較大，傳統(tǒng)的檢測技術(shù)逐漸難以滿足需求，而生物化學(xué)檢測技術(shù)的出現(xiàn)逐漸被獲得了越來越高的認(rèn)可。本文將以此為出發(fā)點(diǎn)，淺析鉛檢測中生物化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用。旨在為更多相關(guān)更為深入的研究提供些許的參考，共同為鉛檢測和生物化學(xué)領(lǐng)域技術(shù)的拓展應(yīng)用于發(fā)展做出些許貢獻(xiàn)。

關(guān)鍵詞：鉛檢測;生物化學(xué)技術(shù);檢測技術(shù);技術(shù)應(yīng)用

0 前言

在所有的環(huán)境污染物種類當(dāng)中，鉛是一種較為常見的元素，其不僅會對人體產(chǎn)生一定的毒害作用，更會直接危害到動植物的健康與生態(tài)環(huán)境的平衡。傳統(tǒng)的檢測方式則更是多種多樣，包括光譜檢測、電泳儀、液相色譜檢測法和雙硫腙對比法等等，盡管傳統(tǒng)的檢測方法依賴于精密化學(xué)儀器使得檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性較高，但其操作流程與檢測成本都難以滿足多元化的鉛檢測需求。因此專家們不斷致力于研發(fā)更加經(jīng)濟(jì)、便利、高效的檢測方法，生物化學(xué)檢測技術(shù)由此應(yīng)運(yùn)而生，并且依賴于諸多的優(yōu)勢，使其在當(dāng)前獲得了較為廣泛的應(yīng)用。在此背景下對鉛檢測中的生物化學(xué)技術(shù)應(yīng)用做進(jìn)一步的研討，有利于為促進(jìn)該技術(shù)研究的進(jìn)一步深入提供一定的參考。

1 核酸檢測技術(shù)

核酸檢測技術(shù)，全稱分子信標(biāo)核酸檢測技術(shù)，簡稱FRET。該技術(shù)原理是利用熒光能量共振轉(zhuǎn)移來進(jìn)行的化學(xué)成分檢測技術(shù)，通過此方式來獲得寡核苷酸探針，使之與特定的核酸相互補(bǔ)充，在靶分子雜交的生物作用下，形成熒光反應(yīng)，根據(jù)熒光反應(yīng)的強(qiáng)弱程度來為定量與定性研究的進(jìn)行提供參照依據(jù)。在Pb2+（鉛離子）檢測中，分子信標(biāo)核酸技術(shù)的應(yīng)用亦是通過上述原理，在常溫下，能夠?qū)崿F(xiàn)Pb2+的快速檢測，有利于削弱溫度對探針反應(yīng)的作用力，同時限制條件的影響也被弱化。相關(guān)研究顯示，Pb2+的濃度決定了檢測的熒光強(qiáng)度，使用該方式能夠檢測出的Pb2+的濃度下限為1.7×10mol/L。另有學(xué)者專門將該技術(shù)的研究建立在以脫氧核酶的催化水解特性基礎(chǔ)之上，并以此為依據(jù)對該技術(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)化的研究，將其應(yīng)用在了Pb2+的檢測之中，得出了比較喜人的結(jié)果[1]。另外，還有的研究中采用雙淬滅熒光探針進(jìn)行檢測，主要方式為以8-17DNAzyme的底物鏈與酶鏈作為反應(yīng)基，用熒光基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)對此進(jìn)行標(biāo)記，得出雙淬滅熒光探針，促使金屬離子如Zn2+、Mg2+、Fe2+等相互作用，通過反應(yīng)來輔助酶與底物之間以及酶內(nèi)部的熒光能量共振轉(zhuǎn)移效應(yīng)來實(shí)現(xiàn)Pb2+的檢測。

2 免疫檢測技術(shù)

免疫檢測技術(shù)主要是基于抗體與抗原之間的特異性反應(yīng)基礎(chǔ)上構(gòu)建的生物化學(xué)檢測法，其優(yōu)勢在于靈敏度較高并且特異性較強(qiáng)。鑒于抗體具有著不同的種類，因此免疫檢測亦分為單克隆抗體與多克隆抗體兩種，當(dāng)前常用的檢測方式主要有酶聯(lián)免疫法與熒光偏振免疫法。其中酶聯(lián)免疫法屬于單克隆抗體檢測法，通過合成Pb2+抗原用來免疫小鼠。要想獲得Pb2+的有效抗體，則需要先獲得Pb2+。通過功能的雙螯合，獲得反應(yīng)原性，之后再結(jié)合螯合劑與載體蛋白促使其獲得免疫原性，在小鼠體內(nèi)注射之后分離出抗原，進(jìn)而進(jìn)行鉛檢測。很多研究顯示，Pb（II）.CHXDTPA復(fù)合體同摻入Pb2+之后的2Cl2的親和力明顯提升，大約達(dá)到25倍，并且實(shí)驗(yàn)證明，Pb2+也是唯一能夠提升兩者親和力的金屬離子[2]。

而熒光偏振免疫法的原理主要是依靠樣品中的Pb2+同過量螯合劑的溶液反應(yīng)，通過免疫復(fù)合物之間的競爭，獲得多克隆抗體當(dāng)中的特異性，最后用熒光偏振儀進(jìn)行測定，得出的數(shù)據(jù)對比標(biāo)準(zhǔn)曲線，則能夠得出Pb2+濃度。此檢測方式應(yīng)用的便利性已經(jīng)被很多研究證實(shí)，比如有的研究采用螯合物制備的多克隆抗體在熒光偏振儀當(dāng)中測出了138個土壤樣品當(dāng)中的Pb2+含量，熒光偏振免疫同火焰原子吸收光譜法與電感耦合等離子體所測得的與結(jié)果相關(guān)的系數(shù)取值分別為0.95與0.92，可見檢測的范圍較廣，并且交叉反應(yīng)率極低，在確保能夠在室內(nèi)順利檢測的同時，還能夠?qū)崿F(xiàn)室外檢測。并且相比之下，具有著低成本、高速率等優(yōu)勢，應(yīng)用價值較高。目前，在生物化學(xué)技術(shù)的推動下，Pb2+檢測的免疫檢測水平逐漸升高，雖然優(yōu)勢作用明顯，但弊端也依然存在，最主要的就是體現(xiàn)在抗體數(shù)量有限方面，同時，檢測過程如何實(shí)現(xiàn)從實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)移到現(xiàn)實(shí)生活當(dāng)中亦是一個需要進(jìn)一步解決的問題，還需要避免金屬離子之間的交叉反應(yīng)影響過大等問題[3]。

3 超分子Pb2+生物化學(xué)傳感檢測技術(shù)

在超分子化學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展的推動作用下，用于檢測Pb2+的多種檢測技術(shù)已被研發(fā)生成。此方式檢測技術(shù)主要是通過超分子生物化學(xué)傳感儀來實(shí)現(xiàn)，原理是在離子誘導(dǎo)的作用下使超分子熒光信號產(chǎn)生相應(yīng)的變化。已有研究采用在PVC膜上固定乙醇介質(zhì)的熒光傳感器用來檢測Pb2+，優(yōu)勢特點(diǎn)表現(xiàn)為具有著極強(qiáng)的敏感性與選擇性，反應(yīng)快速而及時;另外還有研究采用一種新型熒光肽金屬離子傳感器形成新的螯合物，該傳感器的特點(diǎn)是含有酰胺與色氨酸，在與金屬離子作用后，用于檢測，能夠通過熒光的響應(yīng)來識別。

4 結(jié)論

綜上所述，隨著相關(guān)技術(shù)的不斷發(fā)展，目前此領(lǐng)域技術(shù)亦在進(jìn)行著不斷深入的研究，應(yīng)用也越來越廣泛。加之現(xiàn)代社會對生態(tài)環(huán)境和諧的要求越來越高，因此鉛離子的檢測也將朝向高精度、高效率、低成本方向發(fā)展。尤其是Pb2+檢測的方式與技術(shù)，更是會被不斷賦予著更高的重視，技術(shù)水平的發(fā)展亦永不止步。

參考文獻(xiàn)：

[1]戢太云，張春華，周培.生物化學(xué)技術(shù)在鉛檢測中的研究進(jìn)展[J].上海農(nóng)業(yè)學(xué)報，2013（01）：120-123.

[2]趙靜，孫海娟，馮敘橋.食品中重金屬鉛污染狀況及其檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2014（09）：122-127。

作者簡介：王彥輝（1970-），女，蒙古族，內(nèi)蒙古通遼人，學(xué)歷：碩士研究生，內(nèi)蒙古民族大學(xué)化學(xué)學(xué)院有機(jī)化學(xué)專業(yè)碩士研究生畢業(yè)，講師，研究方向：有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)相關(guān)技術(shù)。