摘要：目的：對金銀花和山銀花的鑒別方法進行建立，并對鑒別結(jié)果進行分析探討。方法：以灰氈毛忍冬皂苷乙為觀察指標(biāo)，建立高效液相色譜法對金銀花和山銀花進行鑒別，填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為乙腈-0.4%醋酸梯度洗脫。流速為1.0ml/min，檢測器為蒸發(fā)光散射器。結(jié)果：經(jīng)上述建立高效液相色譜法在金銀花以及制劑中均未檢出灰氈毛忍冬皂苷乙，而山銀花及其制劑中均檢出了灰氈毛忍冬皂苷乙。結(jié)論：采取上述建立的高效液相色譜法對金銀花和山銀花進行鑒別的效果理想，值得關(guān)注并推廣使用。

關(guān)鍵詞：金銀花山銀花鑒別高效液相色譜法灰氈毛忍冬皂苷乙

【中圖分類號】R282.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1672-8602（2015）03-0478-02

山銀花與金銀花均屬于忍冬科植物，形狀、特征等方面兩者存在較大的相似之處，由于山銀花在售價上相對較低，在制備金銀花制劑的過程中不少不法商販以山銀花替代，對藥品質(zhì)量造成了嚴(yán)重的影響[1]。本次研究中出于對金銀花和山銀花的鑒別方法進行建立，并對鑒別結(jié)果進行分析探討的目的，建立了高效液相色譜法，現(xiàn)匯報結(jié)果如下。

1儀器與試藥

1.1實驗儀器

所需儀器為高效液相色譜儀，電子天平。

1.2實驗試藥

實驗中所需試藥包括：灰氈毛忍冬皂苷乙（購自成都普思生物科技有限公司，批號為PS13020703），實驗樣品包括金銀花、山銀花藥材及其制劑；實驗試劑包括：乙腈、甲醇均為色譜純，其他試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件

所用色譜柱為：C18柱，規(guī)格為4.6mm×250mm，5um，流動相為：乙腈（A）-0.4%醋酸溶液（B）梯度洗脫。0-15min時，流動相A5%-20%，流動相B95%-80%，15-30min，流動相A20%-30%，流動相B80%-70%，30-40min，流動相A30%，流動相B70%。進樣量為20ul，流速為1.0ml/min，檢測器為蒸發(fā)光散射器。

2.2對照品溶液制備

精密稱定灰氈毛忍冬皂苷乙對照品5.82mg，經(jīng)濃度為50%的甲醇溶解后定容至50ml，搖勻后備用。

2.3供試品溶液制備

2.3.1藥材供試品溶液制備

取金銀花、山銀花藥材粉末0.5g左右，精密稱定后放置在50ml的容量瓶中，經(jīng)濃度為50%的甲醇溶解，超聲處理30min后放冷，加甲醇定容至50ml，搖勻后過濾，所得濾液即為藥材供試品溶液，備用。

2.3.2提取物供試品溶液制備

取提取物0.1g左右，精密稱定后放置在100ml容量瓶中，經(jīng)濃度為50%的甲醇溶解，超聲處理30min后放冷，經(jīng)甲醇定容至100ml，搖勻后過濾，所得濾液即為提取物供試品溶液，備用。

2.4方法學(xué)考察

2.4.1精密度實驗

取2.2項下配置的對照品溶液，在2.1所示色譜條件下連續(xù)進樣6次，對峰面積進行測量，取對數(shù)，對RSD值進行計算，結(jié)果得RSD值為0.36%，證實儀器的精密度良好。

2.4.2保留時間的穩(wěn)定性

取2.3項下所配置的供試品溶液，在2.1所示色譜條件下每4小時進樣一次，對36小時內(nèi)色譜保留時間進行測定，計算RSD值，結(jié)果得RSD值為0.17%，證實供試品溶液保留時間穩(wěn)定性良好。

2.4.3專屬性考察

分別取2.2項下所配置的對照品溶液、山銀花提取物投料的銀黃片、金銀花提取物投料的銀黃片溶液，在2.1所示色譜條件下進樣檢測，結(jié)果詳見圖1。

上述結(jié)果證實，建立的檢測方法可以對銀黃片樣品的金銀花、山銀花的投料情況進行鑒別。

2.5藥材樣品的檢測

實驗中共收集了2個批次的金銀花對照藥材，11個不同產(chǎn)地的金銀花藥材，4個不同產(chǎn)地的山銀花藥材，2個批次的細(xì)氈毛忍冬藥材，在2.3項下方法進行溶液配制，而后在2.1項下所示的色譜條件進行檢測，結(jié)果詳見下圖。

金銀花、山銀花、細(xì)氈毛忍冬的檢測結(jié)果

2.6提取物測定

對兩批的金銀花提取物和山銀花提取物在2.1項下所示色譜條件下進樣檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，金銀花提取物中并未檢出灰氈毛忍冬皂苷乙，山銀花提取中檢出了灰氈毛忍冬皂苷乙。

2.7樣品測定

對3個廠家不同批號的銀黃片中灰氈毛忍冬皂苷乙進行了檢測，結(jié)果詳見表1。

3討論

金銀花與山銀花的成分十分的相似，功效也存在雷同，然而兩種藥材的功效偏重卻存在很大的差異，因此我們在用藥過程中應(yīng)揚長避短，對兩種藥物的治療優(yōu)勢充分發(fā)揮[2]。通過本次研究發(fā)現(xiàn)，金銀花與山銀花可通過高效液相色譜法檢測是否存在灰氈毛忍冬皂苷乙來進行鑒別，檢出者為山銀花，未檢出者為金銀花，這對于臨床藥品質(zhì)量檢查和控制具有重要意義，值得關(guān)注并推廣。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉雪蓮，陳少珍，許友毅，等.如何鑒別金銀花與山銀花[J].首都醫(yī)藥，2012，4（10）：54-55.

[2] 林永強，王淑華，徐麗華，等.金銀花與山銀花的鑒別方法研究[J].藥學(xué)研究，2013，32（02）：69-71.