摘要：血清蛋白電泳是臨床蛋白檢測(cè)最常用的一項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目，目前多采用自動(dòng)化電泳分析系統(tǒng)進(jìn)行快速檢測(cè)，血漿蛋白異?？杀憩F(xiàn)為水腫、貧血、蛋白尿、骨關(guān)節(jié)障礙、易感染性、血沉增速等。對(duì)營(yíng)養(yǎng)障礙、腎病綜合征、慢性肝病、骨髓瘤、急性和慢性炎癥、自身免疫性疾病、結(jié)締組織病、淋巴增殖性疾病的診斷和評(píng)價(jià)有重要意義。

關(guān)鍵詞：血清蛋白電泳；方法；臨床意義

【中圖分類(lèi)號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1672-8602（2015）03-0006-02

血清蛋白電泳是臨床蛋白檢測(cè)最常用的一項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目，目前多采用自動(dòng)化電泳分析系統(tǒng)進(jìn)行快速檢測(cè)，使用醋酸纖維素薄膜片或瓊脂糖凝膠片，電泳能產(chǎn)生5條或6條區(qū)帶，即前白蛋白、白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白。由于醋酸纖維素薄膜電泳可達(dá)到全自動(dòng)化程度，且價(jià)格便宜，所以在國(guó)內(nèi)臨床更為常用。

1 血清蛋白電泳（SPEP）原理

血清是數(shù)種蛋白質(zhì)的混合液，都有它特有的等電點(diǎn)。蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)呈電中性狀態(tài)，它的分子所帶正負(fù)電荷量相等[1]。如將蛋白質(zhì)置于比其等電點(diǎn)較高的緩沖液中，它們都游離成帶負(fù)電荷的質(zhì)點(diǎn)，在電場(chǎng)中均會(huì)向正極泳動(dòng)。

2 血清蛋白電泳（SPEP）

2.1 測(cè)定方法 乙酸纖維素膜法或瓊脂糖凝膠膜法。應(yīng)同時(shí)測(cè)定總蛋白（化學(xué)法）計(jì)算絕對(duì)值，血液稀釋或濃縮時(shí)絕對(duì)值相應(yīng)變化，相對(duì)值不變。

2.2 標(biāo)本準(zhǔn)備 靜脈血3ml，不抗凝或用紅帽真空管、黃帽真空管或橘帽真空管采血3ml或5ml，或同血清總蛋白測(cè)定共用一份標(biāo)本。

2.3 操作 打開(kāi)電源。將點(diǎn)樣器置于平整實(shí)驗(yàn)桌表面，孔號(hào)位于加樣孔上方按序排列，每孔加10μl樣品，把點(diǎn)樣器放于濕盒內(nèi)，齒梳向上放置，讓樣品于齒梳中擴(kuò)散5min，開(kāi)電泳蓋，并升起電極和點(diǎn)樣支架。.菜單上選擇【protein】電泳程序。取出含緩沖液的海綿條帶，并將條帶塑料襯墊物的背緊貼電極掛置。取出凝膠，用1張薄濾紙輕輕地吸去凝膠表面多余的液體，然后快速移去濾紙。加120～200μl蒸溜水或去離子水于電泳儀的平臺(tái)框面的下1/3處。將凝膠片底邊緊靠框架底邊，凝膠片背對(duì)框架。彎曲凝膠片將其置于電泳框面上，確定凝膠背面的氣泡被完全趕走。放下2個(gè)支架。這時(shí)，含緩沖液的條帶沒(méi)有接觸凝膠。不要強(qiáng)迫支架完全下降。從濕盒中取出點(diǎn)樣器。去除齒梳下的保護(hù)支架。7和15個(gè)樣品分析的點(diǎn)樣器置于支架6號(hào)位。30個(gè)樣品分析的點(diǎn)樣器則可分別置于3號(hào)和9號(hào)。蓋上電泳蓋。按鍵盤(pán)左側(cè)【start】鍵開(kāi)始。打開(kāi)電泳蓋，取出點(diǎn)樣板并丟棄，升起2個(gè)支架，移去緩沖條帶并丟棄。取出已烘干的膠片作進(jìn)一步處理。用濕紙巾擦拭電極。打開(kāi)凝膠支架，將膠片面向操作者置于支架上，確定膠片被完好地固定于支架上。將支架置于染色空間。選擇【protein】染色程序并按右側(cè)鍵盤(pán)【start】鍵開(kāi)始。在染色、脫色和烘干過(guò)程中，染色空間始終被鎖定。取出凝膠支架，打開(kāi)支架并取出烘干的膠片。用光密度儀在570nm處或黃色濾光片進(jìn)行掃描。

3 臨床意義

3.1 白蛋白 白蛋白僅由肝細(xì)胞制造，體內(nèi)40%的白蛋白存在于體液中，其分布于組織內(nèi)和組織液內(nèi)。血管內(nèi)外白蛋白經(jīng)常交換而處于動(dòng)態(tài)平衡中，正常人每天由肝細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)制造的白蛋白為120～200mg/kg，相當(dāng)11～15g/d。肝合成白蛋白屬限速性，僅在體內(nèi)過(guò)量白蛋白丟失或破壞情況下，合成速率才會(huì)增加。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成白蛋白，由肝細(xì)胞分泌入肝竇而入血。肝細(xì)胞損傷可發(fā)生白蛋白合成、細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸和釋放障礙，引起血中白蛋白減少[2]。肝臟也能分解白蛋白，肝損傷時(shí)分解代謝受影響較少，即使嚴(yán)重肝功能障礙分解代謝速率仍能保持相對(duì)恒定。故若蛋白質(zhì)攝入和吸收正常、尿和其它方面無(wú)異常丟失，血清白蛋白降低應(yīng)視為肝損傷合成減少所致。急性肝壞死時(shí)，肝臟合成白蛋白能力喪失或明顯降低，由于t1/2約為30天，故血清白蛋白降低常于1～2周后才能逐漸顯現(xiàn)出來(lái)。急性輕型肝炎患者白蛋白降低較少，最多為中度減少，但病程長(zhǎng)的較重的肝炎白蛋白可明顯降低，且減少程度與疾病嚴(yán)重性成正比。故白蛋白濃度可做為判定肝炎嚴(yán)重程度的依據(jù)。所以急性肝炎時(shí)白蛋白持續(xù)下降或不恢復(fù)是病情惡化的指征。白蛋白減少是肝硬化的特征，在代謝良好者即使已出現(xiàn)高γ-球蛋白血癥，白蛋白減少也往往較輕；當(dāng)肝硬化已失代償血清白蛋白則顯著減少。血清白蛋白濃度是肝硬化是否已失代償?shù)闹笜?biāo)。當(dāng)肝硬化患者血清白蛋白減少到30g/L以下時(shí)，大多數(shù)出現(xiàn)或?qū)⒊霈F(xiàn)腹水，此時(shí)給予患者合理內(nèi)科治療，白蛋白回升，提示患者短期預(yù)后尚好；如不能回升，或進(jìn)一步減至20g/L以下時(shí)，、則預(yù)后極險(xiǎn)。有報(bào)告肝硬化患者白蛋白在45%以下時(shí)，其3年生存率不到45%以上者的半數(shù)。由此可見(jiàn)，測(cè)定血清白蛋白濃度，可作為慢性肝病患者預(yù)后的良好指標(biāo)。

3.2 α1球蛋白 在肝臟炎癥性病變時(shí)，α1球蛋白增加，和白蛋白呈負(fù)相關(guān)，但在肝細(xì)胞破壞極為嚴(yán)重的肝壞死和肝硬化時(shí)則減少，與白蛋白呈正相關(guān)。在致命的肝功能衰竭時(shí)，α1球蛋白可降到很低水平。肝病時(shí)如al球蛋白增加提示病情較輕，α2球蛋白減少常標(biāo)志病情重篤。因此，測(cè)定α1球蛋白對(duì)判斷肝炎患者的嚴(yán)重和預(yù)后有參考價(jià)值。此外，在肝癌時(shí)α1球蛋白顯著上升。

3.3 α2球蛋白：與α1球蛋白一樣也可以反映肝炎病變的嚴(yán)重程度。在病毒性肝炎初期（起病后1周以內(nèi)），多數(shù)保持正常值，以后逐漸增加。在亞急性肝炎和急性肝壞死時(shí)常減少。有人認(rèn)為在重癥肝炎時(shí)，如α2球蛋白減少至4g/L以下，提示患者將要或已經(jīng)出現(xiàn)肝昏迷。急性血吸蟲(chóng)病、肝膿腫等炎癥性疾患和肝癌時(shí)，α2球蛋白往往增加。α2球蛋白含脂蛋白，膽汁郁積時(shí)，特別是慢性病例，血脂質(zhì)增加時(shí)，α2球蛋白升高。失代償期肝硬化時(shí)，α2球蛋白多半降低。

3.4 β球蛋白：β球蛋白也含有脂蛋白，故在膽汁郁積性肝病時(shí)多增高。且與α2球蛋白升高相平行，這有助于鑒別膽汁性和非膽汁性肝硬化。在肝細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p害時(shí)，由于肝臟合成減少，β球蛋白降低，個(gè)別可降到6%以下，這對(duì)預(yù)后判斷可有幫助。重癥肝炎頻死期經(jīng)治療轉(zhuǎn)為壞死后性肝硬化者，α1、β球蛋白的上升往往比白蛋白增加為快。

3.5 γ球蛋白 幾乎在所有肝膽疾患時(shí)都增高。急性血吸蟲(chóng)病時(shí)γ球蛋白升高的陽(yáng)性率為100%，系與網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)反應(yīng)有關(guān)。病毒性肝炎時(shí)γ球蛋白中度增高，在連續(xù)追蹤檢查中，如γ球蛋白趨向正常，常預(yù)示病情好轉(zhuǎn)，一般在2～3個(gè)月內(nèi)可望恢復(fù)；如果γ球蛋白持續(xù)增高而無(wú)其他原因可解釋時(shí)，往往意味著病情轉(zhuǎn)歸不良，已轉(zhuǎn)為慢性肝炎和肝硬化。重癥肝炎時(shí)γ球蛋白可明顯升高，甚至可高達(dá)2.5g/L～30g/L。如γ球蛋白增至正常的2倍以上，轉(zhuǎn)氨酶在正常5倍以上，持續(xù)10周無(wú)改善者，幾可肯定為亞急性肝炎。如不治療，預(yù)后險(xiǎn)惡[3]。慢性肝炎時(shí)，γ球蛋白的平均值隨病情而異。據(jù)報(bào)導(dǎo)，在慢性活動(dòng)性肝炎平均為26.4g/L，慢性遷延性肝炎為21.4g/L，兩者之間有顯著性差異。肝硬化者γ球蛋白普遍增高，尤其在晚期或進(jìn)行性失代償性肝硬化，γ球蛋白可極度增高。故血清γ球蛋白的增加除提示肝臟病患者病情沉重外，對(duì)病人的預(yù)后判斷尚有指導(dǎo)意義。

參考文獻(xiàn)

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