劉成明，王 麗，寧俞媛

(昆明圣火藥業(yè)集團(tuán)有限公司，云南 昆明 650217)

?

三七粉對小鼠免疫調(diào)節(jié)功能的影響

劉成明，王 麗，寧俞媛

(昆明圣火藥業(yè)集團(tuán)有限公司，云南 昆明 650217)

目的：考察三七粉對機(jī)體免疫功能的作用。方法：用碳粒廓清實驗法、2,4-二硝基氯苯致小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)和雞紅細(xì)胞致小鼠血清溶血素生成法，觀察三七粉對小鼠免疫功能的影響。結(jié)果：三七粉1.34g/kg劑量可使吞噬指數(shù)K值及吞噬系數(shù)a明顯增加(P<0.05)；三七粉0.34、0.67、1.34g/kg劑量能明顯增強(qiáng)小鼠的遲發(fā)型超敏反應(yīng)(P<0.01)且能明顯提高小鼠的血清溶血素生成水平(P<0.05)。結(jié)論：三七粉具有增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)功能的作用。

三七粉；免疫功能；碳粒廓清；遲發(fā)型超敏；血清溶血素

三七粉具有多種功能，如免疫調(diào)節(jié)、抗衰老、改善記憶、抗疲勞等作用。三七粉可雙向調(diào)節(jié)人體機(jī)能，增強(qiáng)機(jī)體的應(yīng)激能力和提高機(jī)體的免疫能力，是療補(bǔ)功能兼?zhèn)涞乃幨惩粗参锼?。本試驗擬從小鼠非特異性免疫、體液免疫和細(xì)胞免疫等方面觀察三七粉對小鼠免疫功能的影響，旨在探討三七粉對免疫功能的作用，為其進(jìn)一步開發(fā)研究提供藥效學(xué)實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物

三七粉，昆明圣火藥業(yè)(集團(tuán))有限公司, 批號20110524；貞芪扶正顆粒，甘肅扶正藥業(yè)股份有限公司，批號110505；醋酸潑尼松片，5mg/片，浙江仙居制藥有限公司，批號110437。

1.2 動物

昆明種小鼠，18～22g，昆明醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號：SCXK(滇)2005-0008。

1.3 試劑

一得閣墨汁，北京一得閣墨業(yè)有限責(zé)任公司；2,4-二硝基氯苯(DNCB)，分析純，天津市軒昂科工貿(mào)有限公司，批號20110525；丙酮，分析純，重慶川東化工(集團(tuán))有限公司化學(xué)試劑廠；無水碳酸鈉，分析純，上海虹光化工廠。

1.4 儀器

TU-1901雙光束紫外可見分光光度計，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；L600型離心機(jī)，湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司；YLS-Q4耳腫打耳器，安徽省淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司。

1.5 方法

1.5.1 小鼠碳粒廓清實驗[1]雄性小鼠60只，隨機(jī)分為6組，分組情況見表1。各組動物每日按20mL/kg灌胃給藥1次，連續(xù)30天，對照組灌服純水，醋酸潑尼松組和給藥組在第21、23、25、27、29天灌胃醋酸潑尼松(每日灌胃4h后，再次灌胃醋酸潑尼松10mg/kg)。末次給藥后30min，鼠尾靜脈注射20%墨汁0.1mL/10g，于注射后2min(t1)和12min(t2)時，分別于眼眶靜脈取血20μL置于4mL 0.1%NaCO3溶液中混勻，用紫外可見分光光度計在680nm波長處測定光密度(OD)。按下式計算吞噬指數(shù)K和吞噬系數(shù)a。

1.5.2 小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)實驗[2]18～22g雄性小鼠60只，隨機(jī)分為6組，分組情況見表2。各組動物每日按20mL/kg灌胃給藥1次，連續(xù)30天，對照組灌服純水，醋酸潑尼松組和給藥組在第21、23、25、27、29天灌胃醋酸潑尼松(給藥4h后，再灌胃醋酸潑尼松10mg/kg)。各組動物第21天給藥后1h腹部均勻涂抹1% DNCB丙酮油混合液100μL/只，于第2天加強(qiáng)1次。給藥第29天，各鼠右耳兩面均勻涂抹1% DNCB混合液100μL /只，左耳涂等量丙酮油混合液。24h后處死動物，剪下左右兩耳，用打耳器于同部位切下耳片稱重，計算左右耳片重量之差。

1.5.3 小鼠血清溶血素生成實驗[3]雄性小鼠60只，隨機(jī)分為6組，分組情況見表2。各組動物每日按20mL/kg灌胃給藥1次，連續(xù)30天，對照組灌服純水，醋酸潑尼松組和各給藥組在第21、23、25、27、29天灌胃醋酸潑尼松(給藥4h后，再灌胃醋酸潑尼松10mg/kg)。各組動物第23天給藥后1h，腹腔注射5%雞紅細(xì)胞生理鹽水懸液0.2mL進(jìn)行免疫，末次給藥后30min，眼眶靜脈取血，4 000rpm離心10min，血清用生理鹽水稀釋100倍。將血清稀釋液2mL、5%雞紅細(xì)胞懸液1mL、10%補(bǔ)體1mL依次加入試管中，混合后37℃恒溫30min，置0～4℃冰箱終止反應(yīng)，離心，取上清液用紫外可見分光光度計于540nm波長處測定OD值作為小鼠血清溶血素的指標(biāo)。

2 結(jié)果

2.1 三七粉對小鼠碳粒廓清的影響

由表1可見，與空白對照組比較，醋酸潑尼松能明顯抑制小鼠的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能，吞噬指數(shù)K值明顯減小(P<0.01)，吞噬系數(shù)a值明顯減小(P<0.05)，說明造模成功；與模型組比較，三七粉1.34g/kg劑量可使吞噬指數(shù)K或吞噬系數(shù)a明顯增加(P<0.05)。

2.2 三七粉對小鼠遲發(fā)超敏反應(yīng)的影響

由表2可見，醋酸潑尼松能明顯抑制小鼠的耳腫脹度(P<0.01)，說明造模成功；與模型組比較，三七粉0.34、0.67、1.34 g/kg劑量對免疫功能低下小鼠的遲發(fā)性超敏反應(yīng)均有明顯增強(qiáng)作用(P<0.01)。

表1 三七粉對小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能的影響 (±s)

注：與空白對照組比較，#P<0.05，##P<0.01；與醋酸潑尼松組比較，*P<0.05。

2.3 三七粉對小鼠血清溶血素生成的影響

由表2可見，醋酸潑尼松能明顯降低小鼠的血清溶血素水平(P<0.01)，說明造模成功；與模型組比較，三七粉0.34、0.67、1.34g/kg劑量對免疫功能低下小鼠的血清溶血素生成均有提高作用(P<0.05)。

表2 三七粉對小鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)和血清溶血素生成的影響 (±s)

注：與空白對照組比較，#P<0.05，##P<0.01；與醋酸潑尼松組比較，*P<0.05，**P<0.01。

3 討論

人體自身的免疫防御機(jī)制用于人體識別和消滅外來侵入的任何異物(病毒、細(xì)菌等)，處理衰老、損傷、死亡、變性的自身細(xì)胞以及識別和處理體內(nèi)突變細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞。免疫力低下最直接的表現(xiàn)即容易生病，長此以往會導(dǎo)致身體和智力發(fā)育不良，還易誘發(fā)重大疾病。因此，提高機(jī)體免疫力，開發(fā)相關(guān)藥物顯得尤為重要。

本研究表明，三七粉可明顯增強(qiáng)免疫功能低下小鼠的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能，明顯增強(qiáng)免疫功能低下小鼠的遲發(fā)性超敏反應(yīng)，顯著提高免疫功能低下小鼠血清溶血素的生成。表明三七粉具有明顯增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用，為其進(jìn)一步開發(fā)研究提供了實驗基礎(chǔ)。

[1] 覃筱燕,黎榮昌,云妙英,等.藏藥旺拉水煎劑對小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用[J].山東中醫(yī)雜志，2007，26(12)：842.

[2] 肖波，陳康桂,勞光生.貞芪扶正顆粒聯(lián)合金水寶膠囊對免疫低下小鼠免疫功能的影響[J].中國中醫(yī)藥科技，2010，17(4)：308-309.

[3] 覃筱燕，黎榮昌,唐麗,等.紅藥提取物對小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用[J].遼寧中醫(yī)雜志，2008，35(6)：932

(責(zé)任編輯：魏 曉)

2015-07-22

劉成明(1981-)，女，昆明圣火藥業(yè)集團(tuán)有限公司工程師，研究方向為中藥藥理與應(yīng)用。

R285.5

A

1673-2197(2015)23-0007-02

10.11954/ytctyy.201523003