李存梅

（青海省大通縣斜溝鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，810100）

酸棗仁為鼠李科植物酸棗的干燥成熟種子[1]，在我國藥用歷史悠久?，F(xiàn)代醫(yī)學研究表明，其藥用價值主要體現(xiàn)在安神鎮(zhèn)靜和免疫殺菌等方面，起主要作用的是酸棗仁中的黃酮、皂苷、揮發(fā)油等成份。酸棗仁中總皂苷能增加禽類體內(nèi)嗜中性淋巴細胞的數(shù)量，提高非特異性免疫力，對雞毒支原體病和家禽大腸桿菌病有良好的治療和預防效果。李樹梅等的研究顯示[4]，烏梅酸棗仁提取物的治人工感染雞大腸桿菌病效果明顯[4]；王玉珍等對烏梅和酸棗仁提取物抗雞霉體形感染的研究表明，酸棗仁提取物能顯著降低雞的毒霉形體病、減少氣囊的損傷[5]。

雞的呼吸道疾病是以呼吸困難、氣喘、鼻塞、打噴嚏等為特征的一種常見傳染病，該病發(fā)病率和死亡率很高，目前主要以抗生素為臨床防治藥物。因抗生素的長期濫用，使得藥物敏感性降低，用藥量增大，藥物殘留增加，嚴重阻礙了養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，威脅動物性食品安全。本文研究了純中藥酸棗仁提取物對人工誘發(fā)雞呼吸道疾病的治療效果，以期使酸棗仁為天然無危害中藥，用于治療雞的呼吸道疾病。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 20日齡珍珠雞130只，由青海綠杰特種養(yǎng)殖有限公司提供，用于支原體感染。

1.2 菌株 雞支原體S6（MGS6） 強毒菌株，由中國獸藥監(jiān)察所提供。

1.3 試劑 NaCI，KCI，MgSO4.7H2O,NA2HPO4，12H2O,KH2PO4均為國產(chǎn)分析純；水解乳蛋白，北京嘉康源科技有限公司；酵母浸出液，武威新天地農(nóng)業(yè)科技有限公司；瓊脂粉，湖南奧馳生物科技有限公司；青霉素，四川通達動物保健科技有限公司；豬血清，自制；葡萄糖，甘肅武威新天馬制藥有限公司。

1.4 實驗藥物 酸棗仁提取物，陜西浩洋生物科技有限公司；諾氟沙星水溶性粉劑，四川通達動物保健科技有限公司。

1.5 方法

1.5.1 FM-4培養(yǎng)基配置 分別取2.5gNACI、0.5gKCI、0.1gMgSO4·7H2O、 0.8gNa2HPO4·12H2O、 0.05gKH2PO4、5.0g葡萄糖和2.5g水解乳蛋白加入500ml的蒸餾水中，配制成FM-4基礎(chǔ)液，高壓滅菌后按體積分別取390m lFM-4基礎(chǔ)液，60m l健康豬血清，50m l酵母浸出液，10ml醋酸鉈（1.25%），0.5m l青霉素（100萬IU/ml），1ml酚紅（1%），最后加入1.2%的瓊脂，調(diào)節(jié)PH值為7.5～7.8,4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5.2 細菌培養(yǎng) 將支原體S6強毒株于FM-4培養(yǎng)基上接種，連續(xù)傳代培養(yǎng)3次，確定接種支原體液。

1.5.3 攻毒劑量測定 將40只試驗雞隨機分成4組，每組10只，4組試驗雞分別按0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5m l經(jīng)左右氣囊接種接種支原體液，接種后觀察各組雞的發(fā)病率。

1.5.4 實驗分組與處理 取90只試驗雞隨機分成6組，每組15只。除空白對照組外，其余各組雞經(jīng)左右氣囊接種1.5.3項測定的支原體液攻毒劑量，攻毒后給藥5天，停藥后觀察5天，按表1進行分組處理。

1.6 療效評價 在整個試驗期間每天觀察并記錄各組雞的臨床癥狀，試驗完成后統(tǒng)計存活數(shù)量、死亡數(shù)量，并計算有效率和死亡率。試驗前后對各試驗雞分別稱重，計算平均增重和相對增重率。

表1 試驗動物分組及處理

表2 酸棗仁提取物對雞呼吸道疾病的治療效果

存活率（%） =用藥后存活雞數(shù)/組總雞數(shù)×100%

平均增重=（平均末體重-平均初體重） /平均初體重×100%。

相對增重率（%） =試驗組平均增重率/空白對照組平均增重率×100%

1.7 數(shù)據(jù)分析 試驗結(jié)果用Spss（19.0） 軟件統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 攻毒劑量 強毒支原體S6傳代培養(yǎng)后，按顏色變化確定單位為109CCU/m l的支原體液用作接種。經(jīng)毒力測定，確定0.5ml/只為攻毒劑量。

2.2 臨床病例觀察 攻毒感染后24小時，各試驗雞只開始表現(xiàn)出不同程度的臨床癥狀，如呼吸困難、氣喘、有啰音、流淚和打噴嚏，其中感染對照組最為嚴重，在94小時出現(xiàn)了死亡現(xiàn)象。剖檢后發(fā)現(xiàn)氣囊混濁，氣囊壁和肺部腫大，內(nèi)有干酪狀滲出物。5個治療組中雞只的精神狀態(tài)食欲明顯好于感染對照組，其中酸棗仁提取物中劑量組和諾氟沙星組雞的精神狀態(tài)和食欲較趨近于空白對照組。

2.3 治療效果 由表2可看出，酸棗仁提取物高、中、低劑量組和諾氟沙星組的發(fā)病率均明顯低于感染對照組發(fā)病率，差異顯著（P<0.05），其中中劑量組和諾氟沙星組的發(fā)病率（20%） 均比其他治療組低。存活率方面，酸棗仁提取物高、中、低劑量組和諾氟沙星組都高于感染對照組，中劑量組和諾氟沙星組的存活率（93.3%、86.6%） 與感染對照組（53.3%） 相比差異極顯著（P<0.01）。從相對增重率來看，酸棗仁提取物高（83.2%）、中（88.7%）、低劑量（82%） 組和諾氟沙星組（81.6%） 與感染對照組（69%） 相比差異顯著（P<0.05）。

3 小結(jié)

從實驗結(jié)果來看，酸棗仁高、中、低劑量組和諾氟沙星組對人工誘發(fā)的雞的呼吸道感染具有良好的治療效果，其中，酸棗仁中劑量組較其他治療組效果顯著，且對機體增重無影響。根據(jù)試驗結(jié)果，酸棗仁提取物按每日200mg/kg拌料投喂，連續(xù)7天對呼吸道疾病治療療效果最佳。

[1]高劍鋒、徐萬玉，酸棗仁皂苷的研究綜述[J]，中國藥師，2008,11（11） 1376～1378

[2]進杰，劉萍，馬百平，酸棗仁化學成分及其鎮(zhèn)靜催眠作用研究進展[J]。國際藥學研究雜志，2011,38（3）：206-211

[3]潘龍，程建波，卜登攀等，酸棗仁提取物的生物學作用及其在畜牧生產(chǎn)中的應用[J]，中國畜牧獸醫(yī)，2013，40（4）：105～109

[4]李樹梅，張發(fā)明，何誠等，烏梅酸棗仁提取物對人工感染雞大腸桿菌病的防治效果[J]，中國比較醫(yī)學雜志，2010,20（6）：49～53

[5]王玉珍，烏梅和酸棗仁提取物抗雞毒霉形體感染的研究[D]，武漢：華中農(nóng)業(yè)大學碩士論文，2009