陳爭躍， 余雄偉， 聶振禹 ， 趙 宇， 步世忠， 包蓓艷△

(1寧波大學(xué) 糖尿病研究中心，潤良糖尿病研究室，浙江 寧波 315211； 2寧波市泌尿腎病醫(yī)院腎內(nèi)科，浙江 寧波 315192)

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羅格列酮對人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1、VEGF-A及COX-2表達(dá)的影響*

陳爭躍1， 余雄偉1， 聶振禹2， 趙 宇2， 步世忠1， 包蓓艷2△

(1寧波大學(xué) 糖尿病研究中心，潤良糖尿病研究室，浙江 寧波 315211；2寧波市泌尿腎病醫(yī)院腎內(nèi)科，浙江 寧波 315192)

目的： 探討羅格列酮對人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞水孔蛋白1 (AQP1)、血管內(nèi)皮生長因子A (VEGF-A) 及環(huán)氧合酶2 (COX-2)蛋白的影響。方法: (1) 體外培養(yǎng)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞并分為4組；用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；(2) Western blotting 檢測細(xì)胞AQP1、VEGF-A和COX-2蛋白的表達(dá)；(3)real-time PCR檢測細(xì)胞AQP1、VEGF-A及COX-2 mRNA 的表達(dá)。結(jié)果: 羅格列酮可促進(jìn)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，上調(diào)AQP1蛋白及基因的表達(dá)(P<0.05)，下調(diào)VEGF-A和COX-2蛋白和mRNA的表達(dá)，過氧化物酶體增殖物激活受體γ (PPAR-γ)拮抗劑GW9662可部分抑制羅格列酮上調(diào)的AQP1表達(dá)(P<0.05)，但對VEGF-A及COX-2表達(dá)無明顯影響(P>0.05)。結(jié)論: 羅格列酮能夠上調(diào)腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1的表達(dá)，下調(diào)VEGF-A 及COX-2的表達(dá)，這可能與羅格列酮增加腹膜水轉(zhuǎn)運(yùn)、減輕腹膜纖維化有關(guān)。

腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞； 水孔蛋白1； 血管內(nèi)皮生長因子； 環(huán)氧合酶2； 過氧化物酶體增殖物激活受體γ

腹膜透析是臨床上治療終末期腎衰竭的一種替代方法，而腹膜透析相關(guān)性腹膜纖維化是連續(xù)性非臥床腹透患者最嚴(yán)重的并發(fā)癥，也是影響腹透病人長期生存和預(yù)后的重要因素。腹膜透析相關(guān)性腹膜纖維化的發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的病理發(fā)展過程，機(jī)制不完全明了，慢性腹膜炎癥及高糖透析液對腹膜的損傷是目前已知的導(dǎo)致腹膜纖維化的2個(gè)重要原因，主要表現(xiàn)為腹膜對小分子溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)增加，超濾減少，而腹膜恰恰主要通過小孔和水孔蛋白1(aquaporin-1，AQP1)達(dá)到清除水的目的。過氧化物酶體增殖物激活受體γ (peroxisome proliferator activated receptor γ，PPAR-γ)是近年來備受關(guān)注的核內(nèi)受體轉(zhuǎn)錄因子超家族成員之一，目前，PPAR-γ在抗器官纖維化方面的作用已成為新的研究熱點(diǎn)[1]，而胰島素增敏劑噻唑烷二酮類藥羅格列酮 (rosiglitazone，RSG)是PPAR-γ的特異性激活劑，其能抑制轉(zhuǎn)化生長因子β (transforming growth factor-β，TGF-β)、膠原蛋白和纖連蛋白的表達(dá)，該抑制作用能被PPAR-γ拮抗劑GW9662所抵抗。我們在前期的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，RGZ可以上調(diào)尿毒癥腹膜透析大鼠腹透的超濾量，而這種上調(diào)作用可以部分被PPAR-γ拮抗劑GW9662所拮抗[2]。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF) 能直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，增加血管通透性，研究發(fā)現(xiàn)，RGZ可通過抑制腎臟VEGF表達(dá)，延緩糖尿病腎病的發(fā)生，然而RGZ對人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)VEGF的影響未見報(bào)道。環(huán)氧合酶(cyclooxygenase，COX)又稱前列腺素過氧化物合成酶，目前對COX-2的研究多集中于腫瘤，幾乎未見COX-2與腹膜血管組織的相關(guān)報(bào)道，COX-2能夠通過誘導(dǎo)以VEGF為代表的促血管生長因子的表達(dá)，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)腫瘤血管的增殖。為了探討上述因子在腹膜血管內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)及RGZ對其表達(dá)的影響，進(jìn)一步研究腹膜纖維化的發(fā)生機(jī)制，我們就羅格列酮對人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1、VEGF-A和COX-2表達(dá)的影響展開研究。

材 料 和 方 法

1 主要試劑

改良型RPMI-1640培養(yǎng)基(Hyclone)；無酚紅RPMI-1640培養(yǎng)基、0.25%EDTA-胰蛋白酶和胎牛血清(Gibco)； CCK-8檢測試劑盒(日本同仁化學(xué)研究所)；羅格列酮和GW9662原粉(Cayman)；兔抗人Ⅷ因子相關(guān)抗原抗體、兔抗人血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子(CD31)抗體、兔抗人結(jié)蛋白(desmin)抗體和兔抗人細(xì)胞角蛋白8抗體(北京博奧森公司)；HRP標(biāo)記的驢抗兔Ⅱ抗、FITC標(biāo)記的羊抗兔熒光Ⅱ抗和DAB顯色試劑盒(武漢博士德)；GoTaq 兩步法RT-qPCR系統(tǒng)、 GoScript 逆轉(zhuǎn)錄酶系統(tǒng)和GoTaq? qPCR Master Mix(Promega)；TRIzol 試劑(Ambion)；兔抗人AQP1抗體、兔抗人VEGF-A抗體和兔抗人COX-2抗體(Santa Cruz)；熒光標(biāo)記的羊抗兔Ⅱ抗(LICOR)；BCA法蛋白定量試劑盒(上海捷瑞)；原代人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞株HUM-CELL-0116 (PriCells)。

2 試驗(yàn)方法

2.1 細(xì)胞培養(yǎng) 將原代人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞株接種在1%明膠包被的25 cm2培養(yǎng)瓶中，置于37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24～36 h后第1次換液，以后每2～3 d換1次液。當(dāng)細(xì)胞生長融合至80%～90%時(shí)，用0.25% EDTA-胰蛋白酶消化，以1∶3傳代培養(yǎng)，取第3、4代用于實(shí)驗(yàn)。

2.2 細(xì)胞鑒定 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察并用免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定其中CD31、Ⅷ因子相關(guān)抗原、desmin和細(xì)胞角蛋白8的表達(dá)。

2.3 實(shí)驗(yàn)分組 將細(xì)胞分成4組:正常(normal，N)組用含葡萄糖的無酚紅RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)；羅格列酮(RGZ)組用含10 μmol/L RGZ的無酚紅RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)；GW9662(GW)組用含20μmol/L PPAR-γ拮抗劑GW9662的無酚紅RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)；GW+RGZ組用含PPAR-γ拮抗劑GW9662的無酚紅RPMI-1640培養(yǎng)基提前作用細(xì)胞1 h后，加入含10 μmol/L RGZ的無酚紅RPMI-1640培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

2.4 CCK-8比色法檢測RGZ對細(xì)胞增殖的影響 將細(xì)胞以5×107/L密度接種于96孔板，每孔加0.1 mL培養(yǎng)基，置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，按照分組情況分別處理細(xì)胞24 h、48 h和72 h(設(shè)置8個(gè)復(fù)孔)。棄培養(yǎng)基，每孔加入90 μL無酚紅RPMI-1640培養(yǎng)基和10 μL CCK-8液體，置于培養(yǎng)箱中孵育2 h，采用酶聯(lián)免疫檢測儀測定各孔450 nm處吸光度(A450)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2.5 滲透壓的測量 4組細(xì)胞用無酚紅培養(yǎng)基同步培養(yǎng)24 h后，采用滲透壓檢測儀檢測各組培養(yǎng)液的滲透壓，4組滲透壓分別為301(N組)、310(RGZ組)、313(GW組)和315(GW+RGZ組) mOsm/kg。

2.6 Real-time PCR 檢測AQP1、VEGF-A和COX-2 mRNA表達(dá) 當(dāng)細(xì)胞生長融合至90%～95%時(shí)，按上述分組要求同步培養(yǎng)細(xì)胞24 h，采用TRIzol一步法抽提細(xì)胞總RNA，用GoScript 逆轉(zhuǎn)錄酶系統(tǒng)試劑盒合成cDNA，產(chǎn)物用GoTaq兩步法RT-qPCR 系統(tǒng)試劑盒進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

PCR反應(yīng)條件：95 ℃ 10 s；95 ℃ 30 s，60 ℃ 60 s，72 ℃ 60 s，共40個(gè)循環(huán)；采用2-ΔΔCt法分析real-time PCR結(jié)果數(shù)據(jù)。

2.7 Western blotting 檢測AQP1、VEGF-A和COX-2蛋白表達(dá) 當(dāng)細(xì)胞生長融合至90%～95%時(shí)，按上述分組要求同步培養(yǎng)細(xì)胞24 h，提取細(xì)胞總蛋白，采用BCA法測定蛋白濃度，配置5%的濃縮膠和12%的分離膠，取50 μg變性蛋白進(jìn)行SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，并用0.22 μm的硝酸纖維素濾膜進(jìn)行蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜，考馬斯亮藍(lán)染膠、麗春紅S染液染膜以觀察蛋白質(zhì)是否轉(zhuǎn)移完全。用含5%牛血清白蛋白的封閉液進(jìn)行封閉，Ⅰ抗(1∶500) 4 ℃孵育過夜，隨后熒光標(biāo)記的羊抗兔Ⅱ抗(1∶10 000)室溫避光孵育1 h，Licor Odyssey紅色紅外成像系統(tǒng)掃描實(shí)驗(yàn)結(jié)果，最后分析各目的蛋白條帶與β-actin蛋白條帶灰度值。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用最小顯著性差異法(LSD法)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 細(xì)胞鑒定結(jié)果

細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察：倒置相差顯微鏡下觀察到細(xì)胞呈多邊形、星形，呈鋪路石樣生長。免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定：CD31和Ⅷ因子相關(guān)抗原表達(dá)陽性，細(xì)胞漿染色呈棕黃色，desmin和細(xì)胞角蛋白8表達(dá)陰性，證實(shí)是血管內(nèi)皮細(xì)胞，見圖1。

Figure 1.Human peritoneal microvascular endothelial cells were identified at 48 h by immunocytochemistry (×200). A: anti-factor VIII; B: anti-cytokeratin 8; C: anti-CD31; D: anti-desmin.

2 RGZ對人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響

我們選擇5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L 3個(gè)不同的RGZ濃度，real-time PCR 檢測AQP1 mRNA表達(dá)，發(fā)現(xiàn)AQP1表達(dá)量在10 μmol/L顯著增加，與10 μmol/L相比，20 μmol/L增加幅度較小，故本實(shí)驗(yàn)RGZ濃度定為10 μmol/L。我們的研究結(jié)果顯示：與對照組相比，RGZ在各時(shí)點(diǎn)均對人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有明顯的促進(jìn)增殖的作用(P<0.05)；同時(shí)發(fā)現(xiàn)，RGZ+GW組在實(shí)驗(yàn)的48 h和72 h時(shí)點(diǎn)上，均有不同程度的促進(jìn)增殖作用(P<0.05)，但該組細(xì)胞增殖較RZG組低，見圖2。

Figure 2.Effect of RGZ on the cell proliferation. Mean±SD. n=8. *P<0.05 vs N group.

3 Real-time PCR 檢測AQP1、VEGF-A和COX-2 mRNA表達(dá)結(jié)果

我們選擇1、12、24、48 h共4個(gè)時(shí)點(diǎn)，real-time PCR 檢測AQP1 mRNA表達(dá)，發(fā)現(xiàn)AQP1表達(dá)量在24 h顯著增加，故本實(shí)驗(yàn)時(shí)間定為24 h。與對照組相比，RGZ可以上調(diào)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1 mRNA的表達(dá)，而該上調(diào)作用能部分被GW9662所拮抗(P<0.05)；RGZ下調(diào)VEGF-A和COX-2 mRNA的表達(dá)(P<0.05)，但GW9662對VEGF-A及COX-2 mRNA表達(dá)無明顯影響(P>0.05)，見圖3。

Figure 3.Effect of RGZ on the mRNA expression of AQR1,VEGF-A and COX-2. Mean±SD. n=3. *P<0.05 vs N group.

4 Western blotting 檢測AQP1、VEGF-A和COX-2蛋白表達(dá)結(jié)果

用兔抗人AQP-1多克隆抗體進(jìn)行蛋白印跡,可在28 kD處檢測到一條帶，證實(shí)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)AQP1。對人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1表達(dá)水平的半定量分析結(jié)果顯示：RGZ可以上調(diào)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1蛋白的表達(dá)，而該上調(diào)作用能部分被GW9662所拮抗(P<0.05)，見圖4。相反的，RGZ下調(diào)該細(xì)胞VEGF-A及COX-2蛋白表達(dá)(P<0.05)，但GW9662對VEGF-A及COX-2蛋白表達(dá)無明顯影響(P>0.05)，見圖5。

討 論

一直以來，腎臟水轉(zhuǎn)運(yùn)通道蛋白靶向蛋白質(zhì)組學(xué)被用于確定腎臟水鈉重吸收的潛在調(diào)節(jié)位點(diǎn)。以往的一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)RGZ上調(diào)腎臟Na+-K+-ATP酶含量，而布美他尼能夠抑制Na+-K+-2Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、Na+/H+交換體3和水通道蛋白2、3的活性，由此可以斷定RGZ誘導(dǎo)的鈉潴留致使腎小管轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白增加及腎小球?yàn)V過率下降[3]。目前有研究提出TZDs誘導(dǎo)一部分病人液體潴留、水腫，但對其誘導(dǎo)液體潴留的機(jī)制存在爭議。大部分研究表明，該效應(yīng)是通過腎小管鈉和水的重吸收，但具體涉及的腎單位部分和鈉運(yùn)載體的作用尚不明確。有研究提出血管通透性增加可能是PPARγ激動(dòng)劑造成組織水腫的原因：一項(xiàng)臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)TZDs治療50例2型糖尿病患者16周后，血紅蛋白和血細(xì)胞比容減少[4]，證實(shí)PPARγ激動(dòng)劑可能會(huì)增加血管通透性。

Figure 4.Effect of RGZ on the protein expression of AQP1 in the cells. Mean±SD. n=3. *P<0.05 vs N group.

Figure 5.Effect of RGZ on the protein expression of VEGF-A and COX-2 in the cells. Mean±SD. n=3. *P<0.05 vs N group.

AQP1位于各組織的無孔毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞基底膜，包括腹膜，并且AQP1能夠促進(jìn)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞水份的滲透運(yùn)輸。本研究中我們發(fā)現(xiàn)RGZ可以促進(jìn)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，而在RGZ+GW組人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞與正常對照組相比仍有一定程度的增殖，提示我們PPAR-γ拮抗劑GW9662可能部分抑制細(xì)胞增殖作用，RGZ還可能通過其它途徑促進(jìn)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖。以往的研究發(fā)現(xiàn)RGZ對不同的細(xì)胞作用不同，例如RGZ可通過激活p38 絲裂原活化蛋白激酶通路引發(fā)人肝癌HepG2細(xì)胞周期阻滯；并能抑制干細(xì)胞因子誘導(dǎo)的人肥大細(xì)胞-1(HMC-1)細(xì)胞遷移和纖維連接蛋白誘導(dǎo)的HMC-1細(xì)胞黏附，而RGZ對HMC-1細(xì)胞的這種作用可以被GW9662所阻斷[5]。本研究還發(fā)現(xiàn)RGZ可以上調(diào)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1 mRNA及蛋白的表達(dá)，而這種上調(diào)作用可以部分被PPAR-γ拮抗劑GW9662所拮抗。一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，糖皮質(zhì)激素也能夠上調(diào)腹膜微血管AQP1的表達(dá)，導(dǎo)致自由水運(yùn)輸顯著增加，而RGZ對AQP1的這一作用機(jī)制尚不明確。Zhang等[6]通過研究非洲爪蟾蜍卵母細(xì)胞表達(dá)的野生型AQP1通道，首次提出蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)的激活顯著增加AQP1依賴的透水性，該AQP1新途徑獨(dú)立于環(huán)核苷酸途徑，并可能有助于PKC激活后調(diào)控AQP1改變，從而調(diào)控如內(nèi)皮滲透性，血管生成，尿液濃縮等過程。

已知PPAR-γ在血管內(nèi)皮細(xì)胞上高表達(dá)，激活的PPAR-γ可以抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和血管新生，最近的研究發(fā)現(xiàn)TGZ誘導(dǎo)OP9脂肪細(xì)胞VEGF的表達(dá)，而GW9662抑制TGZ誘導(dǎo)的VEGF表達(dá)[7]。在本研究中，我們得到同樣的結(jié)果：RGZ可抑制人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF-A和COX-2表達(dá)，real-time PCR分析結(jié)果表明，經(jīng)RGZ處理后的24h腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)VEGF-A和COX-2 mRNA下降，提示RGZ抑制VEGF-A和COX-2的表達(dá)，有可能參與抑制腹膜微血管發(fā)育。而對于RGZ影響VEGF-A和COX-2表達(dá)可能涉及不同的機(jī)制或信號通路：最近的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)PPAR-γ活化后可能會(huì)使細(xì)胞變形及大分子漏出，致內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能紊亂[8]。和AQP1相似，Scoditti等[9]對人內(nèi)皮細(xì)胞血管新生的研究發(fā)現(xiàn)，VEGF可通過PKC依賴途徑不完全性誘導(dǎo)細(xì)胞cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白介導(dǎo)的COX-2表達(dá)，而RGZ可通過調(diào)控VEGF的表達(dá)來部分干預(yù)COX-2的表達(dá)。另一研究發(fā)現(xiàn)15-甲基前列腺素F2和RGZ作用于人子宮內(nèi)膜細(xì)胞，激活的PPAR-γ與VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)域的應(yīng)答元件即PPRE序列結(jié)合，能夠抑制VEGF基因表達(dá)和VEGF分泌[10]。另外，體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)RGZ減少VEGF分泌的同時(shí)，抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)的增殖、遷移和血管新生，表明RGZ可能通過減少HUVECs分泌VEGF從而實(shí)現(xiàn)對HUVECs血管生成的抑制作用。

綜上所述，本研究通過體外實(shí)驗(yàn)觀察了RGZ對人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1、VEGF-A和COX-2表達(dá)的影響,發(fā)現(xiàn)RGZ可促進(jìn)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，上調(diào)AQP1的表達(dá)，下調(diào)VEGF-A及COX-2的表達(dá)，而PPAR-γ拮抗劑可部分抑制羅格列酮上調(diào)的AQP1表達(dá)改變，但對VEGF-A 及COX-2表達(dá)無明顯影響。RGZ對人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞的具體調(diào)控機(jī)制較為復(fù)雜，且RGZ是否通過AQP1、VEGF-A和COX-2影響腹膜功能還有待更進(jìn)一步的研究證實(shí)，是否可以指導(dǎo)臨床實(shí)踐而應(yīng)用于腹透超濾衰竭的患者更需進(jìn)一步的臨床研究。

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Effect of rosiglitazone on expression of AQP1, VEGF-A and COX-2 in human peritoneal microvascular endothelial cells

CHEN Zheng-yue1, YU Xiong-wei1, NIE Zhen-yu2, ZHAO Yu2, BU Shi-zhong1, BAO Bei-yan2

(1DiabetesCenterofNingboUniversity,RunLiangDiabetesResearchLaboratory,NingboUniversity,Ningbo315211,China;2DepartmentofNeurology,NingboUrologyandNephrologyHospital,Ningbo315192,China.E-mail:baobeiyan2007@sina.com)

AIM: To investigate the effect of rosiglitazone on the expression of aquaporin-1 (AQP1), vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in human peritoneal microvascular endothelial cells.METHODS: Cultured peritoneal microvascular endothelial cells were divided into 4 groups. The morphological changes of the cells were observed under inverted microscope. The protein expression of AQP1, VEGF-A and COX-2 in human peritoneal microvascular endothelial cells was determined by Western blotting. The mRNA expression of AQP1, VEGF-A and COX-2 in the cells was measured by real-time PCR. RESULTS: Rosiglitazone stimulated the proliferation of the cells. Rosiglitazone up-regulated the expression of AQP1, and down-regulated the expression of VEGF-2 and COX-2 at mRNA and protein levels in the cells. The PPAR-γ antagonist GW9662 partly inhibited the up-regulation of AQP1 expression by rosiglitazone (P<0.05), but had no obvious effect on the expression of VEGF-A and COX-2 (P>0.05). CONCLUSION: Rosiglitazone up-regulates the expression of AQP1 and down-regulates the expression of VEGF-A and COX-2 in human peritoneal microvascular endothelial cells, thus promoting water transportation and attenuating peritoneal fibrosis during peritoneal dialysis.

Peritoneal microvascular endothelial cells; Aquaporin-1; Vascular endothelial growth factor; Cyclooxygenase-2; Peroxisome proliferator-activated receptor γ

1000- 4718(2015)01- 0044- 05

2014- 08- 06

2014- 10- 23

浙江省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No. Y13H050021)； 寧波市衛(wèi)生局項(xiàng)目(No.2010A18)

△通訊作者 Tel: 0574-83039290; E-mail: baobeiyan2007@sina.com

R363； R329.2+1

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2015.01.009