東 敏，劉建華，阮正一

(上海交通大學(xué)附屬第九人民醫(yī)院婦科，上海 200010)

ODC和CD105在良性、癌前和惡性外陰腫瘤中的表達(dá)及意義

東 敏，劉建華，阮正一

(上海交通大學(xué)附屬第九人民醫(yī)院婦科，上海 200010)

目的探討鳥氨酸脫梭酶(Ornithine decarboxylase，ODC)和CD105蛋白(Cluster of differentiation 105，CD105)在外陰癌變中的作用。方法選取30例外陰鱗癌、30例外陰上皮內(nèi)瘤變和30例外陰正常表皮，采用免疫組化的方法進(jìn)行研究。分析ODC和CD105表達(dá)與外陰鱗癌的臨床病理特征。結(jié)果ODC和CD105在正常外陰組織中的陽性率明顯低于外陰上皮內(nèi)瘤變組織和外陰鱗癌組織，而于外陰上皮內(nèi)瘤變組織中的陽性率明顯低于外陰鱗癌組織，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，ODC與細(xì)胞分化程度密切相關(guān)(P＜0.05)，CD105與臨床分期和淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P＜0.05)。結(jié)論ODC和CD105在外陰鱗癌發(fā)生和發(fā)展中具有重要的意義。

鳥氨酸脫羧酶；CD105蛋白；外陰鱗癌；外陰上皮內(nèi)瘤變

外陰癌(Vulvar carcinoma)占女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的3%～5%，其中外陰鱗癌最為常見，占外陰癌的80%～90%[1]。外陰癌的患病率僅次于宮頸癌、卵巢癌和宮體癌，是女性惡性腫瘤發(fā)生的第4位的惡性腫瘤。近年來，隨著性傳播疾病的發(fā)病率的增高，外陰癌的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年增加的趨勢，嚴(yán)重危害婦女的身心健康。外陰癌的發(fā)生是一個(gè)逐年的過程，但是良性癌前如何發(fā)展為外陰癌的機(jī)制還不是很清楚[2]。本研究通過免疫組化的方法，檢測鳥氨酸脫梭酶(ODC)和CD105蛋白(CD105)在外陰正常組織、外陰上皮內(nèi)非瘤樣病變、外陰上皮內(nèi)瘤樣病變及外陰鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)，旨在探討ODC和CD105在外陰癌形成中的機(jī)制，為臨床預(yù)防外陰癌的發(fā)生提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月至2014年6月間我院病理科存檔的外陰鱗癌組織30例，外陰上皮內(nèi)瘤變組織30例和正常外陰組織30例進(jìn)行研究。外陰鱗癌按組織分化程度分為：高分化22例，中分化20例，低分化18例；按有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分為有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移24例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移36例。

1.2 方法 所有石蠟切片脫蠟至水后，在3% H2O2去離子水30ml中孵育10min；在修復(fù)后分別滴加一抗，在4℃的溫度下過夜，第二天磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗3次；滴加生物素標(biāo)記的二抗工作液，37℃孵育30min，PBS沖洗3次；滴加辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素，37℃孵育30min，PBS再次沖洗3次；二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色；自來水充分沖洗、蘇木復(fù)染、脫水透明、常規(guī)封片。用PBS代替一抗做陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定 ODC陽性反應(yīng)定位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜上，無陽性細(xì)胞為0分，＜10%為1分，10%～50%為2分，≥50%為3分，無著色為0分，輕度著色為1分，中度著色為2分，重度著色為3分，＜3分為陰性(-)，≥3分為陽性(+)。而CD105表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞質(zhì),判斷標(biāo)準(zhǔn)參照Weidener的方法進(jìn)行[3]進(jìn)行。凡單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞群呈現(xiàn)棕色或者黃色染色，認(rèn)為是一個(gè)可計(jì)數(shù)的微血管，在微血管最多的區(qū)域，數(shù)3個(gè)不同高倍視野下微血管數(shù)，如果微血管數(shù)平均值≥3個(gè)，則為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 ODC和CD105在良性、癌前和惡性外陰腫瘤中的表達(dá) ODC和CD105在正常外陰組織中的陽性率明顯低于外陰上皮內(nèi)瘤變組織和外陰鱗癌組織，于外陰上皮內(nèi)瘤變組織中的陽性率明顯低于外陰鱗癌組織，而明顯高于正常外陰組織，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見表1。

表1 ODC和CD105在良性、癌前和惡性外陰腫瘤中的表達(dá)(例)

表2 ODC在外陰鱗癌患者不同臨床病理特征中表達(dá)的比較(例)

2.3 CD105在外陰鱗癌患者不同臨床病理特征中表達(dá)的比較 經(jīng)過觀察，CD105與臨床分期和淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P＜0.05)，而與患者的年齡和細(xì)胞分化程度無關(guān)(P＞0.05)，見表3。

2.2 ODC在外陰鱗癌患者不同臨床病理特征中表達(dá)的比較 經(jīng)過觀察，ODC與細(xì)胞分化程度密切相關(guān)(P＜0.05)，而與患者的年齡、臨床分期、淋巴轉(zhuǎn)移無關(guān)(P＞0.05)，見表2。

表3 CD105在外陰鱗癌患者不同臨床病理特征中表達(dá)的比較(例)

3 討 論

ODC是多胺生物合成的第一個(gè)關(guān)鍵酶，其人體內(nèi)表達(dá)受嚴(yán)格的控制，在正常組織中表達(dá)水平較低，但在惡性腫瘤等快速增長的組織中ODC的水平明顯增加，ODC是細(xì)胞生長、分化的調(diào)控所必須的酶[4-5]。目前的研究顯示ODC在多種惡性腫瘤中均發(fā)揮調(diào)控作用，與腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移和及血管生成均密切相關(guān)。國外的一項(xiàng)研究對(duì)47例大腸癌、5例腺瘤和4例正常大腸黏膜中ODC的水平進(jìn)行研究分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)大腸癌和腺癌的活性顯著高于正常黏膜組織，并發(fā)現(xiàn)具有高ODC水平高的患者長期生存率較低[6]。Zell等[7]研究了大腸癌患者生存率與ODC多態(tài)性的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ODC基因rs2302615與大腸癌患者生存率呈現(xiàn)明顯的相關(guān)性。Xu等[8]研究顯示胃癌組織中ODC水平明顯升高，并且ODC水平與腫瘤惡性程度呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)性。以往的研究結(jié)果顯示ODC的調(diào)節(jié)通路中多種致癌因素可引起ODC的調(diào)節(jié)異常，從而導(dǎo)致細(xì)胞癌變，本研究結(jié)果顯示ODC在正常外陰組織中的陽性率明顯低于外陰上皮內(nèi)瘤變組織和外陰鱗癌組織，并且ODC與外陰鱗癌組織細(xì)胞分化程度密切相關(guān)。這一結(jié)果說明ODC在外陰鱗癌發(fā)病過程中同樣發(fā)揮重要作用。

近年來，血管生成相關(guān)因素已經(jīng)成為腫瘤研究的熱點(diǎn)內(nèi)容。CD105作為一種新近發(fā)現(xiàn)的血管內(nèi)皮標(biāo)記的新成員，目前已經(jīng)成為臨床研究的熱點(diǎn)。CD105是一種調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化生長因子受體復(fù)合物。在機(jī)體患有非腫瘤病變中，例如慢性疼痛、心肌損傷和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎組織中，CD105可以發(fā)揮修復(fù)病變組織的功能[9-11]。而在惡性病變中，CD105與腫瘤增生和腫瘤轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)，在腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移過程中與其血管生成密切相關(guān)[12]。Schmming等[13]研究顯示CD105在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)明顯高于鄰近的正常黏膜，并與鱗狀細(xì)胞癌的分期和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Pang等[14]研究顯示乳腺癌組織中CD105的mRNA含量要明顯高于乳腺癌周組織的含量。本研究結(jié)果顯示CD105在正常外陰組織中的陽性率明顯低于外陰上皮內(nèi)瘤變組織和外陰鱗癌組織，并且CD105與外陰鱗癌組織的臨床分期和淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，這說明CD105不但與外陰鱗癌組織發(fā)生密切相關(guān)，而且與外陰鱗癌組織浸潤和淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可能是在外陰鱗癌癌細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移過程中產(chǎn)生新生血管有關(guān)。

綜上所述，ODC和CD105表達(dá)與外陰鱗癌發(fā)病密切相關(guān)，并且CD105在外陰鱗癌浸潤和淋巴轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。因此，筆者認(rèn)為ODC和CD105可能成為外陰鱗癌治療的靶器官，但是本研究存在樣本含量較小、未對(duì)患者進(jìn)行長期隨訪的局限性，今后將進(jìn)一步擴(kuò)大樣本含量并對(duì)患者進(jìn)行長期隨訪，以研究ODC和CD105與外陰鱗癌預(yù)后的相關(guān)性。

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Expression and significance of ODC and CD105in benign,precancerous and malignant vulvar tumors.

DONG Min,LIU Jian-hua,RUAN Zheng-yi.Department of Gynaecology,the Ninth People's Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200010,CHINA

ObjectiveTo discuss the role of ornithine decarboxylase(ODC)and cluster of differentiation 105(CD105)in vulvar tumor.MethodsThirty cases of malignant vulvar tumors,30 cases of vulvar intraepithelial neoplasia,and 30 cases of normal vulvar tissue were studied by immunohistochemistry.ODC and CD105expression and clinical pathological features of vulvar squamous carcinoma were further analyzed.ResultsThe positive expression rate of ODC and CD105in normal vulvar tissues was significantly lower than that in the genital intraepithelial neoplasia and squamous cell carcinoma of the vulva,and the positive rate in vulvar intraepithelial neoplasia was significantly lower than that in vulvar squamous cell carcinoma tissue,with statistically significant difference(P＜0.01).ODC was closely related to the degree of cell differentiation(P＜0.05),and CD105was closely related to clinical stage and lymph node metastasis(P＜0.05).ConclusionODC and CD105had vital significance in the development of vulvar squamous carcinoma(HCC).

Ornithine decarboxylase(ODC);Cluster of differentiation 105(CD105);Vulvar squamous carcinoma;Vulvar intraepithelial neoplasia

R737.35

A

1003—6350（2015）04—0481—03

2014-09-09)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.04.0176

上海高校青年教師培養(yǎng)資助計(jì)劃[編號(hào)：滬教委人(2011)87號(hào)文公布]

劉建華。E-mail：fl81955664715@163.com