黃漢英，黃基榮，何光倫

(武警北京總隊(duì)第三醫(yī)院，北京 100141)

截敏祛風(fēng)2號方對變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜組胺影響的實(shí)驗(yàn)研究*

黃漢英，黃基榮，何光倫

(武警北京總隊(duì)第三醫(yī)院，北京 100141)

目的:探討截敏祛風(fēng)2號方對變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜組胺的影響，以期為臨床治療提供有效依據(jù)。方法:按隨機(jī)數(shù)字表法選取40只大鼠作為研究對象，每組10只，先采用經(jīng)卵清蛋白致敏制備動物模型，成功后分別灌注截敏祛風(fēng)2號方、截敏祛風(fēng)1號方、西替利嗪和生理鹽水。采用酶聯(lián)法檢測造模，稱出鼻黏膜組胺含量。結(jié)果:在臨床癥狀體征積分和嗜酸性細(xì)胞陽性率以及組胺含量上均以生理鹽水最高，而截敏祛風(fēng)2號方在噴嚏、流涕和嗜酸性細(xì)胞陽性率在截敏祛風(fēng)1號方、西替利嗪比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而組胺含量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:截敏祛風(fēng)2號方能降低變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜組胺含量，可有效改善變應(yīng)性鼻炎臨床癥狀。

變應(yīng)性鼻炎;截敏祛風(fēng)2號方;大鼠;鼻黏膜組胺

變應(yīng)性鼻炎是特應(yīng)性個體接觸致敏源后導(dǎo)致包含IgE炎癥介質(zhì)釋放和多種免疫活性細(xì)胞，而細(xì)胞因子參與鼻黏膜慢性炎癥反應(yīng)的疾病。臨床上以噴嚏、鼻癢、鼻塞、流大量清涕為主要特征。研究［1］稱，該疾病近些年有升高趨勢，全球發(fā)病率為10%～20%，在發(fā)達(dá)國家患病率每30年增加1倍。該疾病嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，給患者帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)和心理負(fù)擔(dān)。在治療上目前仍無特異性方法，而中醫(yī)藥治療該病具有較好的效果，現(xiàn)總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取40只大鼠為研究對象，每組10只。近交系，均為雄性，平均體質(zhì)量(210±20)g，均由湖北試驗(yàn)動物中心提供。備好相關(guān)的試劑，如卵清蛋白、氫氧化鋁、大鼠組胺試劑、2%戊巴比妥鈉、10%甲醛、蘇木素-伊紅染液、磷酸緩沖劑和丙酮等。實(shí)驗(yàn)儀器有電子天平、手持式勻漿機(jī)、低溫高速離心沉淀機(jī)、酶標(biāo)儀、微量加樣器、解剖顯微鏡等。

1.2 方法

對所有大鼠進(jìn)行變應(yīng)性鼻炎動物造模，先用卵清蛋白0.3 mg作抗原，氫氧化鋁粉末30 mg作為佐劑，加生理鹽水1 ml形成混合液后進(jìn)行腹腔注射，隔日1次，連續(xù)注射1周。在進(jìn)行強(qiáng)化致敏、腹腔注射完成后，每只大鼠以0.25%卵清蛋白生理鹽水2 ml霧化吸入，每日1次，連續(xù)使用5 d。激發(fā)則為末次霧化后間歇3 d后，以1%卵蛋白用微量加樣器滴入大鼠雙側(cè)鼻腔中，每次約20單位，每日1次，連續(xù)使用7 d。每次滴鼻后觀察大鼠噴嚏、搔抓、流涕等鼻部癥狀，均觀察30 min。觀察大鼠行為學(xué)得分，總分為5分。鼻分泌物可見大量嗜酸性粒細(xì)胞表示造模成功，然后根據(jù)每組試驗(yàn)要求分別給予不同藥物。截敏祛風(fēng)2號方藥物組成:茜草10 g，防風(fēng)6 g，蟬衣6 g，地龍10 g;截敏祛風(fēng)1號方組成:茜草10 g，蟬衣6 g，地龍10 g，紫草10 g，徐長卿10 g，烏梅10 g，防風(fēng)6 g，以上均煎汁10 ml灌胃;西替利嗪(深圳致君制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20000386)10 mg灌胃，生理鹽水10 ml灌胃。以上均灌胃1周，每日早晚各1次。然后采用Loren氏法對大鼠造模完成時和取材時各做1次，在光鏡下觀察嗜酸性粒細(xì)胞情況。

然后在末次滴鼻30 min后用2%戊巴比妥鈉麻醉下斷頭處死，剝離上頜骨骨部皮膚后將其從顱骨中游離出來，沿鼻中線切開后暴露鼻中隔和雙側(cè)鼻腔，取下鼻甲和鼻中隔黏膜組織50 mg后置于液氮中冷凍，先進(jìn)行組織粉碎勻漿，經(jīng)離心后取上清液，再用相關(guān)檢測方法檢組胺含量。

1.3 評定標(biāo)準(zhǔn)

從第1次給藥后觀察大鼠在噴嚏、抓鼻和流涕癥狀變化情況，參照中華醫(yī)學(xué)會變應(yīng)性鼻炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，采用計(jì)分法觀察癥狀且記錄。輕度:計(jì)為1分，噴嚏為1～3次，流涕為流至前鼻孔，鼻癢搔鼻為輕擦鼻幾次;中度:噴嚏4～10分，流涕超過前鼻孔，鼻癢搔鼻為抓鼻面不止;重度:3分，噴嚏超過11分，流涕滿面到處摩擦抓癢［2］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，將調(diào)查統(tǒng)計(jì)的內(nèi)容作為變量，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組鼻部癥狀體征比較

表1顯示，所有患者動物造模成功，評分均在5分以上，各組大鼠健康活潑，反應(yīng)敏捷，食欲正常，體質(zhì)量逐漸加大，無死亡情況出現(xiàn)。對各組的鼻部癥狀體征進(jìn)行比較，A組、B組、C組和D組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而A組和B組在所有癥狀和A組、B組和C組在抓鼻次數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但A組和B組、C組在噴嚏、鼻分泌物比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 4組鼻部癥狀體征比較(±s，分)

表1 4組鼻部癥狀體征比較(±s，分)

注:A、B、C、D組分別代表截敏祛風(fēng)2號方、截敏祛風(fēng)1號方、西替利嗪和生理鹽水(下同)

臨 床 癥 狀 例數(shù) A組 B組 C組 D組噴 嚏 (個) 10 0.89±0.23 0.94±0.52 0.71±0.20 2.43±0.53 10 1.94±1.00 2.05±0.88 3.89±1.35 10.46±3.15抓 鼻 (次) 10 5.02±0.94 4.72±1.20 4.62±1.20 13.57±3.56鼻分泌物(分)

2.2 鼻分泌物中嗜酸性細(xì)胞陽性率比較

表2顯示，對鼻分泌物中嗜酸性細(xì)胞陽性率進(jìn)行比較，以D組最高為60%，A、B、C 3組組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表2 鼻分泌物中嗜酸性細(xì)胞陽性率比較(%)

2.3 4組組胺含量比較

表3顯示，對組胺含量進(jìn)行比較，A組和B組、C組、D組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而B、C、D 3組組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表3 4組組胺含量比較(±s，ng/mL)

表3 4組組胺含量比較(±s，ng/mL)

組胺含量 例數(shù) A組 B組 C組 D組10 26.5355±10.367430.4647±5.6756 35.3575±6.0367 39.2374±13.4675

3 討論

變應(yīng)性鼻炎指的是臨床上多種炎癥介質(zhì)、細(xì)胞因子和免疫細(xì)胞共同參與形成的黏膜局部血供和神經(jīng)、腺體功能紊亂的疾病，在臨床上常稱為級鏈反應(yīng)。中醫(yī)學(xué)上稱之為鼻鼽，其發(fā)病病機(jī)主要是衛(wèi)表不固、風(fēng)寒濕乘虛而入侵犯鼻腔的氣虛證，由于津液停聚、鼻塞雍滯，致使出現(xiàn)鼻腔部的流清涕等癥狀。而其病因中就有內(nèi)外因，屬于本虛標(biāo)實(shí)證，本在脾腎，標(biāo)在肺，而在治療上則需急治標(biāo)、緩治本［3-4］。

在本研究中采用的是截敏祛風(fēng)2號方，由茜草、蟬衣、防風(fēng)、地龍等4味中藥組成，其中茜草涼血活血，可起到治風(fēng)先治血、血行風(fēng)自滅作用;防風(fēng)可通竅止涕、祛風(fēng)脫敏;地龍祛風(fēng)止癢通絡(luò)［5］，總之具有宣竅止涕、祛風(fēng)脫敏的作用。從現(xiàn)代藥理學(xué)上看，茜草、防風(fēng)具有抑制病原菌生長、抗氧化、抗過敏和免疫調(diào)節(jié)作用，其中茜草還具有抑制氧化物、對抗過氧化氫的脂質(zhì)代謝、減輕谷胱甘肽含量等作用。研究［6］稱，防風(fēng)可抑制大鼠的免疫作用，能抑制離體氣管等過敏性收縮，對外源性或內(nèi)源性組胺藥物瘙癢模型有顯著止癢效果。報(bào)道認(rèn)為，防風(fēng)還能有效增強(qiáng)機(jī)體免疫力，提高吞噬細(xì)胞吞噬功能和NK細(xì)胞殺傷活性;地龍則能對抗組胺毛細(xì)血管通透性，抑制嗜酸性粒細(xì)胞的增加，阻止該細(xì)胞在全身中的激活情況;蟬衣則能很好地提高機(jī)體免疫力［8］。

采用截敏祛風(fēng)2號方治療變應(yīng)性鼻炎后鼻部臨床癥狀體征有明顯好轉(zhuǎn)跡象，但在嗜酸性細(xì)胞陽性率上則僅為20%，說明該藥物吞噬細(xì)胞有很好作用，特別是在組胺上變化顯著。研究認(rèn)為，組胺是臨床上最常見的炎性介導(dǎo)物質(zhì)，其指標(biāo)越低說明變態(tài)反應(yīng)越強(qiáng)［9］。

結(jié)果顯示，該藥物能很好地抑制組胺含量，并在嗜酸性細(xì)胞和相關(guān)積分上比較也顯著不同，說明該方法臨床效果是滿意的。其結(jié)果顯示，目前采用中醫(yī)藥治療疾病具有安全性高、費(fèi)用低廉等優(yōu)勢，受影響因素較低［10］。而通過本研究為臨床采用截敏祛風(fēng)2號治療應(yīng)性鼻炎提供了有效依據(jù)，且臨床效果滿意。但西醫(yī)臨床治療變應(yīng)性鼻炎后發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)藥較為混亂，有待臨床上進(jìn)一步深入探討。

［1］楊軍，鄧秋，周蕓，等.實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性鼻炎中鼻黏膜組胺的測定［J］.首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，27(1):109-112.

［2］袁穎，郭忻.鼻炎噴劑對變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜形態(tài)及組胺含量的影響［J］.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，22(4):72-74.

［3］Li Jing，Huang Ying，Lin Xiaoping.Influence of degree of specific allergic sensitivity on severity of rhinitis and asthma in Chinese allergic patients［J］.Respiratory Research，2011，12(1):36-39.

［4］袁穎，符勝光，郭忻，等.鼻炎噴劑對變應(yīng)性鼻炎模型大鼠鼻黏膜病理改變及組胺含量的影響［C］.中華中醫(yī)藥學(xué)會2008臨床中藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集，2013，8(4):258-261.

［5］燕志強(qiáng)，張俊，李得本，等.變應(yīng)性鼻炎患者鼻黏膜中組胺H4受體的差異性表達(dá)［J］.臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2010，24(20):928-930.

［6］Said Said A，Mchembe Mabula D，Chalya Phillipo L.Allergic rhinitis and its associated co-morbidities at Bugando Medical Centre in Northwestern Tanzania;A prospective review of 190 cases.BMC Ear［J］.Nose and Throat Disorders，2013，12(1): 68-71.

［7］王素敏，鄭宏良，章如新，等.變應(yīng)性鼻炎豚鼠鼻黏膜組織中一氧化氮含量與組胺含量的相關(guān)研究［J］.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，28(6):670-671.

［8］燕志強(qiáng)，高盛宏，李得本，等.變應(yīng)性鼻炎患者組胺受體表達(dá)及與嗜酸性粒細(xì)胞浸潤相關(guān)性分析［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉科雜志，2011，19(4):223-225.

［9］S Arshi，R Zarrinfard，S.M Fereshtehnejad等.Determination of the Prevalence of Allergy to Autumn Pollens in Allergic Rhinitis Patients Referred to the Immunology-Allergy Clinic of Hazrat Rasool-e-Akram Hospital in Tehran during 2005-06［J］.Razi Journal of Medical Sciences，2012，17(75):671-674.

［10］余亞斌.“截敏祛風(fēng)2號方”治療變應(yīng)性鼻炎的實(shí)驗(yàn)和臨床研究［D］.上海中醫(yī)藥大學(xué)，2011，5(12):64-66.

R765.21

B

1006-3250(2015)06-0675-02

2015-03-04

北京市衛(wèi)生局重點(diǎn)扶持計(jì)劃(BW-2012BNO.029)

黃漢英，女，主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)本科，從事耳鼻喉疾病的臨床與研究。