王行龍 白學(xué)兵 孫欽波

（①山東省臨沂市臨港區(qū)朱蘆鎮(zhèn)獸醫(yī)站 276613 ②山東省莒南縣畜牧局）

瘦肉精是鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇等物質(zhì)的俗稱。曾被廣泛作為飼料添加劑使用，在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中帶來(lái)很大的效益。但是人食用了含鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺或沙丁胺醇?xì)埩舻膭?dòng)物性食品，殘留通過(guò)食物進(jìn)入人體，就使人體積蓄中毒。如果一次攝入量過(guò)大，就會(huì)產(chǎn)生異常生理反應(yīng)的中毒現(xiàn)象，均會(huì)對(duì)健康帶來(lái)危害。常規(guī)儀器檢測(cè)方法不能滿足實(shí)際生產(chǎn)中大批量檢測(cè)的需求。用快速檢測(cè)卡(尿樣)檢測(cè)這三種藥物，具有操作方便、快捷、靈敏高等特點(diǎn)，不需要其他儀器，適用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。筆者作為一名基層獸醫(yī)工作者，根據(jù)近幾年在實(shí)際工作中遇到的問題整理如下，僅供同行參考。

1 樣品的處理(第一步)

（1）尿樣必須新鮮無(wú)污染。（2）尿樣必須收集在潔凈、干燥、不含有任何防腐劑的塑料尿杯或玻璃容器里，如尿樣混濁，可在室溫4000r/min條件下離心5min處理后待檢。筆者在實(shí)際操作(產(chǎn)地檢疫時(shí)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè))曾遇到過(guò)因尿液太混濁，液面不走的現(xiàn)象。（3）不潔凈樣本，如含有漂白劑、明礬，可能在正確的分析操作方法下也會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤的結(jié)果。（4）若不能及時(shí)送檢，尿液樣本在2～8℃冷藏可保存24h，要注意避免造成失效或污染。長(zhǎng)期保存需冷凍于-20℃，忌反復(fù)凍融。（5）冷藏或冷凍尿樣需恢復(fù)至室溫即20±5℃后方可進(jìn)行檢測(cè)。

2 檢測(cè)卡的取用(第二步)

（1）從原包裝未開封的鋁箔袋中取出檢測(cè)卡，打開后請(qǐng)?jiān)谠?h內(nèi)盡快地使用。（2）檢測(cè)卡應(yīng)平放。筆者在現(xiàn)場(chǎng)檢疫時(shí)曾遇到過(guò)這樣的情況：檢測(cè)卡不平放(地面不平，有一定的坡度) 時(shí)，滴加尿樣后液面流動(dòng)過(guò)快，有時(shí)出現(xiàn)質(zhì)控線和檢測(cè)線都不顯色，但平放后顯色正常。所以在實(shí)際操作時(shí)一定注意檢測(cè)卡不能傾斜，否則影響結(jié)果判定。（3）使用過(guò)程中盡量不要觸摸檢測(cè)卡中央的白色面膜；避免陽(yáng)光直射和風(fēng)扇直吹。（4）點(diǎn)樣前，應(yīng)待檢測(cè)卡和樣本溫度恢復(fù)至室溫即20±5℃后，方可進(jìn)行檢測(cè)。筆者在某年的冬季，檢測(cè)一批發(fā)往杭州的生豬時(shí)，在室外點(diǎn)樣后幾個(gè)檢測(cè)卡竟質(zhì)控線和與檢測(cè)線都不顯色。后來(lái)在室內(nèi)檢測(cè)時(shí)各個(gè)檢測(cè)卡都顯色，這才知道是溫度的問題。（5）過(guò)期、破損、污染或無(wú)效的檢測(cè)卡切勿使用。（6）檢測(cè)卡為一次性產(chǎn)品，請(qǐng)勿重復(fù)使用。（7）一定注意未使用產(chǎn)品的防潮保護(hù)，確保封口的緊密度，否則會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤或者不確定的結(jié)果。（8）產(chǎn)品應(yīng)儲(chǔ)存于陰涼避光干燥處，4～30℃密封。忌冷凍。使用過(guò)程中請(qǐng)注意檢測(cè)卡有效期。該產(chǎn)品有效期為12個(gè)月。

3 滴加樣品(第三步)

（1）將檢測(cè)卡平置于干凈平坦的臺(tái)面上，用一次性塑料滴管垂直滴加2滴無(wú)空氣泡的尿液樣本至加樣孔中。（2）滴加、吸取尿樣時(shí)請(qǐng)使用本產(chǎn)品所帶滴管。（3）一次性塑料滴管不可重復(fù)使用，以免出現(xiàn)交叉污染。（4）樣本不能濺到或者直接滴到檢測(cè)卡中央的白色面膜，這樣會(huì)影響顯色效果。筆者實(shí)踐中不小心把樣本濺到檢測(cè)卡中央的白色面膜，結(jié)果無(wú)顯示。（5）尿樣加入過(guò)多或過(guò)少均會(huì)影響顯色效果，要嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。

4 觀察結(jié)果(第四步)

（1）加樣后開始計(jì)時(shí)，靜置反應(yīng)3～5min后，觀察顯色區(qū)，判斷結(jié)果，其它時(shí)間判斷無(wú)效。（2）自來(lái)水、蒸餾水、去離子水或其它液體不能作為陰性對(duì)照。（3）由于不同尿液樣本之間的差異，有的檢測(cè)線可能出現(xiàn)顏色偏淺或偏灰現(xiàn)象，但只要出現(xiàn)紅色條帶，即可判定為陰性。（4）出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，需用本卡復(fù)檢一次。（5）若遇見判定結(jié)果有爭(zhēng)議的樣品，請(qǐng)用儀器確證。（6）操作失誤，以及樣本中存在干擾物質(zhì)，有可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果，需查閱在特異性中列出的能引起陽(yáng)性結(jié)果的物質(zhì)。（7）當(dāng)實(shí)驗(yàn)操作環(huán)境溫度低時(shí)，會(huì)影響線條變淺，有可能出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，建議操作環(huán)境溫度最好不低于10℃。

5 結(jié)果判定

5.1 陰性 質(zhì)控線(C線)出現(xiàn)紅色條帶，檢測(cè)線(T線)也出現(xiàn)紅色條帶。無(wú)論顏色深淺均判為陰性。

5.2 陽(yáng)性 質(zhì)控線(C線)出現(xiàn)紅色條帶，而檢測(cè)線(T線)不出現(xiàn)紅色條帶。判為陽(yáng)性。

5.3 無(wú)效 質(zhì)控線(C線)與檢測(cè)線(T線)均無(wú)紅色條帶出現(xiàn)或者質(zhì)控線(C線)無(wú)紅色條帶出現(xiàn)但檢測(cè)線(T線)出現(xiàn)紅色條帶，說(shuō)明此檢測(cè)卡已失效、過(guò)期，或操作不當(dāng)，需另做一次測(cè)試。

6 結(jié)語(yǔ)

該檢測(cè)卡僅是一種定性篩查方法，不能定量克倫特羅、萊克多巴胺或者沙丁胺醇在樣本中的精確濃度。樣本若需復(fù)核確證，請(qǐng)參考中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(農(nóng)業(yè)部1063號(hào)公告-3-2008動(dòng)物尿液中11種β-受體激動(dòng)劑的檢測(cè)液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法)。