王善輝

(江蘇省徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程系,江蘇徐州 221006)

鴨坦布蘇病毒病診斷方法及防治措施

王善輝

(江蘇省徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程系,江蘇徐州 221006)

鴨坦布蘇病毒病是一種以出血性卵巢炎為主要病變特點(diǎn)的新發(fā)、急性、烈性傳染病該病,給我國養(yǎng)鴨業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。論文就鴨坦布蘇病毒病臨床診斷方法、病毒分離鑒定、防治措施進(jìn)行綜述,以期為鴨坦布蘇病毒病的診斷與防控提供參考。

鴨坦布蘇病毒;傳染病;診斷;防治

自2010年春季開始，我國福建、浙江、上海、山東等主要鴨養(yǎng)殖密集區(qū)由南到北暴發(fā)了一種以出血性卵巢炎為主要病變特點(diǎn)的新發(fā)、急性、烈性傳染病，給我國養(yǎng)鴨業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。經(jīng)病原分離及基因測序，已確定其病原為鴨坦布蘇病毒（Duck tembusu virus，DTMUV）[1]。國內(nèi)外學(xué)者開展針對(duì)該病的病原學(xué)、診斷技術(shù)、疫苗等方面的相關(guān)研究工作。本文對(duì)DTMUVD診斷方法及防治措施作一綜述，以期為DTMUV防控提供參考。

1 臨床診斷

1.1 臨床癥狀

感染鴨主要表現(xiàn)為采食量突然下降，隨之產(chǎn)蛋率大幅度下降，群內(nèi)發(fā)病率達(dá)100%，病死率為0～12%。體溫升高，排綠色稀糞。感染后期，出現(xiàn)腿癱、轉(zhuǎn)圈等神經(jīng)癥狀[2]。

1.2 病理變化

病理剖檢主要表現(xiàn)為卵巢出血、變性、萎縮和破裂；卵泡嚴(yán)重出血、壞死；多數(shù)病鴨肝臟淤血、腫大、壞死；具有神經(jīng)癥狀的發(fā)病鴨可見腦膜出血，腦組織水腫。

2 實(shí)驗(yàn)室診斷

2.1 病毒的分離與鑒定

采集發(fā)病鴨的卵泡膜、肝臟、脾臟等組織，可分離到病毒。萬春和等[3]從病死種鴨的卵巢、肝臟等病變組織分離到DTMUV。

2.2 RT-PCR方法

RT-PCR技術(shù)具有快速、特異、簡便等優(yōu)點(diǎn)，是目前DTMUV準(zhǔn)確、簡單診斷的主要方法。張帥等[4]設(shè)計(jì)了一對(duì)特異性引物，建立了檢測DTMUV的一步法RT-PCR方法。

2.3 熒光定量RT-PCR方法

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)了PCR擴(kuò)增反應(yīng)的實(shí)時(shí)跟蹤和定量檢測，是當(dāng)前動(dòng)物疫病檢測技術(shù)中簡單、快速、敏感、特異的檢測技術(shù)。研究人員在E基因序列區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)了用于TaqMan熒光定量RT-PCR的一對(duì)特異性引物及TaqMan探針，分別建立了檢測DTMUV的熒光定量RT-PCR方法。

2.4 套式RT-PCR方法

套式PCR，是使用兩對(duì)PCR引物擴(kuò)增完整的片段。如果第一次擴(kuò)增產(chǎn)生了錯(cuò)誤片段，則第二次能在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行引物配對(duì)并擴(kuò)增的概率極低。因此，巢式PCR的擴(kuò)增非常特異。黃欣梅等[5]根據(jù)鵝黃病毒JS8O4株全基因序列，設(shè)計(jì)了2對(duì)特異性引物，分別建立了快速檢測DTMUV的半套式RT-CR方法及套式RT-PCR方法。

2.5 RT-LAMP方法

RT-LAMP即環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，因其具有無需PCR儀、操作簡便、反應(yīng)迅速靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，特別適合在現(xiàn)場和基層部門應(yīng)用。李兆龍等[6]根據(jù)禽新型黃病毒E蛋白基因序列，在保守區(qū)設(shè)計(jì)了6條特異性引物，分別建立了檢測MDTUV的RT-LAMP方法。

2.6 血清學(xué)檢測方法

國際上通用的黃病毒屬血清學(xué)檢測方法有ELISA、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)（AGP）、血凝抑制試驗(yàn)（HI）等。姬希文等[7]用純化的FX2010株作為包被抗原，建立了檢測DTMUV血清抗體的間接ELISA法。謝星星等[8]、傅秋玲等[9]也先后建立了關(guān)于E蛋白的間接ELISA方法并用于臨床檢測。

3 防治措施

3.1 預(yù)防

消滅傳播媒介，全場除草滅蚊。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，適當(dāng)補(bǔ)充營養(yǎng)藥。鴨群飼喂抗病毒中藥、干擾素進(jìn)行預(yù)防，發(fā)病鴨群同時(shí)喂給抗生素，預(yù)防繼發(fā)感染。2011年有鴨坦布蘇病毒病油乳劑滅活疫苗相關(guān)報(bào)道，推薦免疫程序?yàn)殚_產(chǎn)前2～3周免疫2次，間隔2周。2014年中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科研人員研制的“鴨坦布蘇病毒病活疫苗”，可較好地預(yù)防本病。

3.2 治療

該病目前沒有特效治療藥，只能采取對(duì)癥治療措施。發(fā)病期間，經(jīng)常對(duì)鴨場進(jìn)行徹底消毒，在鴨群的飲水中添加抗病毒藥物，同時(shí)使用清熱解毒的中草藥和增強(qiáng)鴨體免疫力的黃芪多糖，并添加多維和礦物質(zhì)。發(fā)病鴨群可適當(dāng)添加多維及中藥如清溫?cái)《旧ⅲ岣啉喨旱挚沽?。或飼料中單?dú)添加白術(shù)、水飛薊素、仙人掌、白花蛇舌草等對(duì)發(fā)病有所減輕。

[1] 滕巧泱，顏丕熙，張旭，等.一種新的黃病毒導(dǎo)致蛋鴨產(chǎn)蛋下降及死亡[J].中國動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)，2010，18（6）：1-4.

[2] 李玉峰，馬秀麗，于可響，等.一種從鴨新分離的黃病毒研究初報(bào)[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2011，42（6）：885-891.

[3] 萬春和，施少華，程龍飛，等.一種引起種（蛋）鴨產(chǎn)蛋驟降新病毒的分離與初步鑒定[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2010，25（6）：663-666.

[4] 張帥，云濤，葉偉成，等.鴨坦布蘇病毒一步法RT-PCR檢測方法的建立和應(yīng)用[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2012，24（1）：37-40.

[5] 黃欣梅，趙冬敏，劉宇卓，等.禽黃病毒套式RT-PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J].畜牧與獸醫(yī)，2012，44（6）：5-8.

[6] 李兆龍，陳仕龍，林鋒強(qiáng)，等.禽新型黃病毒RT-LAMP檢測方法的建立[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2012，43（4）：659-663.

[7] 姬希文，閏麗萍，顏丕熙，等.鴨坦布蘇病毒抗體間接ELISA檢測方法的建立[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2011，33（8）：630-634.

[8] 謝星星，李銀，李祥瑞，等.檢測坦布蘇病毒的雙抗體夾心ELISA方法建立及初步應(yīng)用[J].畜牧與獸醫(yī)，2014，46（5）：24-30.

[9] 傅秋玲，陳珍，施少華，等.鴨坦布蘇病毒E蛋白包被抗原間接ELISA方法的建立[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2015，30（1）：1-5.

王善輝（1977—），女，內(nèi)蒙古人，博士，講師，研究方向：分子病毒學(xué)與免疫學(xué)。

徐州市科技項(xiàng)目（XM13B120）；徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院科研課題（2013B03）。