梁彩云 王渝薇 王金升

(寧夏吳忠市紅寺堡區(qū)農(nóng)牧和科學(xué)技術(shù)局,寧夏吳忠751900)

雞馬立克氏病的檢疫和防制對(duì)策

梁彩云 王渝薇 王金升

(寧夏吳忠市紅寺堡區(qū)農(nóng)牧和科學(xué)技術(shù)局,寧夏吳忠751900)

雞馬立克氏病是雞常見(jiàn)的一種淋巴組織增生性疾病,以外周神經(jīng)、性腺、虹膜、各種臟器、肌肉及皮膚的單核細(xì)胞浸潤(rùn)和腫瘤的形成為特征,因此它又有多發(fā)性神經(jīng)炎、內(nèi)臟型淋巴瘤及皮膚白血病等名稱(chēng)。它是由皰疹病毒科的B亞群皰疹病毒引起的,具有高度的傳染性。病雞常呈現(xiàn)消瘦和肢體麻痹等癥狀。本病具有高度的病死率,并造成機(jī)體高度的免疫抑制,對(duì)養(yǎng)雞業(yè)的危害很大。

雞馬立克氏病;診斷;防制對(duì)策

1 現(xiàn)場(chǎng)診斷

（1）流行特點(diǎn)：雞是本病的主要宿主，其他禽類(lèi)很少發(fā)病。病雞和帶毒雞是本病的主要傳染源。帶毒雞能持續(xù)排毒76周；病雞脫落的皮屑、羽毛是主要的傳染物。易感雞與傳染源間主要通過(guò)氣源、性途徑傳播病毒。本病在雞群中廣泛傳播，雞于性成熟時(shí)幾乎都被感染，但發(fā)病率與雞群的狀況、感染病毒的毒力等因素有關(guān)。自然感染的病例通常爆發(fā)于3～4周齡，但大部分嚴(yán)重的病例則出現(xiàn)在2～5月齡。幼齡雞比成年雞易感，母雞的易感性比公雞高。本病的死亡率與發(fā)病率基本相當(dāng)。

（2）臨診癥狀和病理變化：根據(jù)臨診癥狀和病變發(fā)生的主要部位不同，本病可分為四種類(lèi)型：神經(jīng)型（古典型）、內(nèi)臟型（急性型）、眼型和皮膚型。但有時(shí)可以混合發(fā)生。

神經(jīng)型：主要侵害外周神經(jīng)，如坐骨神經(jīng)、臂神經(jīng)、迷走神經(jīng)、頸部神經(jīng)、腹神經(jīng)等，一般都是單側(cè)受害或一側(cè)輕一側(cè)重。由于侵害神經(jīng)不同，臨診癥狀也各異，如侵害坐骨神經(jīng)者，出現(xiàn)步態(tài)不穩(wěn)及一肢前伸一肢后伸的特征性劈叉姿勢(shì)；侵害臂神經(jīng)者，則出現(xiàn)被侵害一側(cè)翅下垂；侵害迷走神經(jīng)者，則出現(xiàn)失聲、嗉囊擴(kuò)張和呼吸困難；侵害頸神經(jīng)者，則出現(xiàn)頭下垂或歪斜；侵害腹神經(jīng)者，則出現(xiàn)腹瀉。受害神經(jīng)增粗，呈黃白色或灰白色，橫紋消失，有時(shí)呈水腫樣外觀。組織學(xué)變化特點(diǎn)是腫瘤性質(zhì)的淋巴樣細(xì)胞（主要為T(mén)淋巴細(xì)胞）侵潤(rùn)。

內(nèi)臟型：多呈爆發(fā)式發(fā)生，常見(jiàn)于幼齡雞群，尤其是40～60日齡的雞群。病初大批雞精神委頓、食欲下降、體態(tài)消瘦，幾天后部分雞出現(xiàn)肢體麻痹、共濟(jì)失調(diào)，多數(shù)病例表現(xiàn)為脫水。產(chǎn)蛋雞有腹瀉及腹部膨脹現(xiàn)象，病程可達(dá)1月左右。法氏囊萎縮，這一病變通常具有診斷意義。內(nèi)臟器官中以卵巢的受害最為常見(jiàn)，其次是脾、腎、肝、心、肺、腸、腸系膜、腺胃和肌胃，在這些器官組織中長(zhǎng)出大小不等的腫瘤塊，呈灰白色，質(zhì)地堅(jiān)硬而致密，與原有組織的色彩相間存在，表現(xiàn)為大理石樣的花紋。

眼型：由于眼神經(jīng)受損，表現(xiàn)為視力障礙，虹膜呈灰白色，瞳孔邊緣不整齊，常稱(chēng)“灰眼病”。

皮膚型：受害部位多在大腿，形成小結(jié)節(jié)或瘤狀物，多不被察覺(jué)。

2 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

（1）病料的采集和處理：①病雞的血液：一般用血液來(lái)分離病毒。血液中的病毒是與白細(xì)胞結(jié)合的，在采血時(shí)應(yīng)加肝素抗凝。在實(shí)際工作中，可用全血或白細(xì)胞分離病毒。②腫瘤結(jié)節(jié)：無(wú)菌采取腫瘤結(jié)節(jié)，剪碎，用磷酸鹽緩沖液沖洗，去紅細(xì)胞，然后消化制成單細(xì)胞懸液，離心沉淀細(xì)胞，再以磷酸鹽緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)液懸浮，調(diào)整細(xì)胞濃度為106個(gè)/0.2ml，立即進(jìn)行病毒的檢測(cè)。③羽囊和皮膚：感染雞的羽囊和皮膚用于游離病毒的分離。其處理方法是用乙二胺四乙酸鈉緩沖液（蔗糖7.462g，磷酸二氫鉀0.052g，磷酸氫二鉀0.125g，L-谷氨酰胺0.083g，牛血清白蛋白1.00g，乙二胺四乙酸鈉0.200g，用蒸餾水配制成100ml）沖洗、溶解并稀釋成1：5（質(zhì)量體積比），超聲波裂解2～3min，然后經(jīng)650g離心至懸液清亮，再用經(jīng)小牛血清處理的濾膜（0.45μm）過(guò)濾。

（2）病原分離鑒定：①雛雞接種：將細(xì)胞結(jié)合性或游離性病毒材料經(jīng)腹腔接種易感的1日齡雛雞，2～10周后檢查雞的神經(jīng)、臟器，如肉眼或鏡檢時(shí)見(jiàn)有馬立克氏病毒引起的特異性病變，即可證實(shí)有馬立克氏病毒的存在。②細(xì)胞培養(yǎng)：細(xì)胞結(jié)合性病毒常用雞腎細(xì)胞（CK）和雞胚成纖維細(xì)胞（CEF）分離。待細(xì)胞長(zhǎng)成單層后，接種病料，24h后更換培養(yǎng)液，以后隔日更換一次，6～8d后計(jì)算空斑數(shù)。游離性病毒可用雞腎細(xì)胞增殖。其方法是將培養(yǎng)24～48h的原代雞腎細(xì)胞的培養(yǎng)液棄去，接種病料處理液，每瓶0.2ml，37℃培養(yǎng)30min，然后再加培養(yǎng)液，以后每隔48h更換一次液體。接種6～8d后計(jì)算病毒的蝕斑形成單位/ml。③雞胚接種：將經(jīng)處理的被檢材料接種4日齡雞胚卵黃囊或11～12日齡雞胚的絨毛尿囊膜。接種后分別于12～14d或4～6d，在雞胚的絨毛尿囊膜上產(chǎn)生痘斑。

（3）免疫瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)：A.試驗(yàn)準(zhǔn)備?？乖?；標(biāo)準(zhǔn)陰、陽(yáng)性血清。瓊脂板的制備：用含8%氯化鈉的0.01mol/LpH7.4磷酸鹽緩沖液配制1%的瓊脂溶液，置于水浴中加熱，使其充分溶化后制板備用。B.操作方法。用打孔器在瓊脂平板上打7個(gè)孔，其中中央1個(gè)孔（孔徑4mm），外周6孔（孔徑3mm），孔間距為3mm。用已知抗原檢查未知抗體時(shí)，中央孔加入已知抗原，周?chē)追謩e加入待檢血清和標(biāo)準(zhǔn)陰、陽(yáng)性血清。用已知抗體檢查未知抗原時(shí)，中央孔加入標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清，周?chē)追謩e加入待檢病料的處理液及標(biāo)準(zhǔn)抗原。C.結(jié)果判斷。被檢材料與標(biāo)準(zhǔn)抗原或抗體孔之間形成清晰的沉淀線，并與周邊已知抗體或抗原孔的沉淀線相互融合者為抗體或抗原陽(yáng)性，不出現(xiàn)沉淀線的則判為陰性。

3 防制對(duì)策

免疫接種是有效預(yù)防該病的重要手段，因此孵化場(chǎng)要及時(shí)對(duì)出殼24h以?xún)?nèi)的雛雞進(jìn)行免疫接種，馬立克氏弱毒疫苗用稀釋液稀釋后每只雛雞0.2ml頸部皮下注射，為確保疫苗價(jià)效稀釋后的疫苗必須在1～2h內(nèi)使用完畢，如稀釋后的疫苗放置時(shí)間過(guò)久，其免疫價(jià)效嚴(yán)重下降。建議7日齡后再免疫一次。

強(qiáng)化日常觀察與檢測(cè)，如發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)及時(shí)進(jìn)行處理或反映；為有效加強(qiáng)對(duì)該病的控制，在飼養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)隨機(jī)采取血清進(jìn)行抽樣檢疫，通過(guò)羽毛囊髓做瓊脂擴(kuò)散沉淀反應(yīng)查看雞群中是否包括陽(yáng)性患者，如發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性雞應(yīng)對(duì)雞群進(jìn)行凈化處理，嚴(yán)防該病傳播與流行。

孵化種蛋用0.1%的新潔爾滅溶液或0.2%的福爾馬林溶液對(duì)雞蛋外殼進(jìn)行消毒；并且對(duì)孵化室和孵化設(shè)備進(jìn)行定期消毒，以熏蒸消毒為最佳，孵化室環(huán)境消毒可采用10%生石灰水或1-2%氫氧化鈉進(jìn)行消毒。對(duì)引入雞苗時(shí)應(yīng)堅(jiān)持全進(jìn)全出的原則，對(duì)不同日齡、不同的來(lái)源的雛雞要進(jìn)行分批分群飼養(yǎng)。

動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督部門(mén)要加大相關(guān)知識(shí)的宣傳，提高養(yǎng)殖戶(hù)對(duì)雛雞免疫接種重要性的認(rèn)識(shí)，增強(qiáng)防范意識(shí)，不購(gòu)買(mǎi)無(wú)免疫證明的雛雞。還要加強(qiáng)育雛點(diǎn)和銷(xiāo)售環(huán)節(jié)監(jiān)管，要求育雛點(diǎn)辦證經(jīng)營(yíng)、持證銷(xiāo)售，對(duì)達(dá)不到防疫要求的無(wú)證育雛點(diǎn)和未經(jīng)免疫銷(xiāo)售雛雞的行為要果斷取締、嚴(yán)厲打擊，確保養(yǎng)殖戶(hù)的根本利益。同時(shí)，要定期不定期的對(duì)雞場(chǎng)、散養(yǎng)戶(hù)綜合性防疫制度及防疫措施落實(shí)情況進(jìn)行檢查，有效預(yù)防雞馬立克氏病的發(fā)生。

[1]馮元璋，周碧君，古飛霞.雞馬立克氏病的流行特點(diǎn)與防制對(duì)策[J].中國(guó)家禽，2006，28（23）：43-45.