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        不同脂肪源餌料對日本沼蝦抗氧化機能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影響

        2015-04-02 21:55:36趙衛(wèi)紅於葉兵王資生呂富呂林蘭
        江蘇農業(yè)科學 2014年12期

        趙衛(wèi)紅 於葉兵 王資生 呂富 呂林蘭

        摘要:為研究幾種植物油(大豆磷酯、豆油、花生油、菜籽油和魚油對日本沼蝦抗氧化機能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影響,在基礎配合飼料中分別添加6%魚油、大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油,飼養(yǎng)雌性日本沼蝦(063~075 g40 d。結果表明,肌肉中超氧化物歧化酶(SOD活力除魚油組顯著低于菜籽油組外,其余各組之間差異不顯著;大豆磷脂組肝胰腺SOD活力顯著低于其他各組。大豆磷脂組和菜籽油組肌肉過氧化氫酶(CAT活力顯著高于魚油組、豆油組和花生油組,大豆磷脂組、豆油組和菜油組肝胰腺CAT活力顯著高于魚油組和花生油組。肝胰腺和卵巢均檢測到了飼料中未檢測到的 C20 ∶[G-3]2n-6,魚油組顯著低于其他各組。魚油組肝胰腺和卵巢EPA(C20 ∶[G-3]5n-3含量和n-3/n-6的值均顯著高于其他各組,n-6高不飽和脂肪酸(PUFA含量顯著低于其他各組;大豆磷脂組卵巢亞油酸(C18 ∶[G-3]2n-6含量顯著高于魚油組、花生油組和菜籽油組;豆油組肝胰腺n-6 PUFA含量顯著高于魚油組、花生油組和菜籽油組;花生油組卵巢DHA(C22 ∶[G-3]6n-3含量和n-3/n-6的值僅次于魚油組,且均高于其他各組;菜籽油組肝胰腺單不飽和脂肪酸含量顯著高于其他各組。綜上所述,豆油和菜籽油可以一定程度上代替魚油應用于日本沼蝦飼料中。

        關鍵詞:日本沼蝦;植物油;超氧化物歧化酶;過氧化氫酶;脂肪酸

        中圖分類號: S96612+2文獻標志碼: A

        文章編號:1002-1302(201412-0266-06[HS][HT9SS]

        收稿日期:2014-09-25

        基金項目:國家自然科學基金(編號:31101887;江蘇省自然科學基金(編號:B2011419、B2012675;江蘇省企業(yè)博士聚集項目。

        作者簡介:趙衛(wèi)紅(1973—,女,江蘇東臺人,博士,副教授,碩士生導師,從事水產動物繁殖、營養(yǎng)與免疫方面的教學與科研工作。Tel:(051588298190;E-mail:misszwh@163com。

        日本沼蝦(Macrobrachium nipponense別稱青蝦、河蝦,隸屬于節(jié)肢動物門甲殼綱十足目游泳亞目長臂蝦科沼蝦屬,廣泛分布于我國和東南亞地區(qū),其肉味鮮嫩,營養(yǎng)豐富,深受消費者的青睞[1],是我國重要的傳統淡水養(yǎng)殖經濟蝦類之一。其養(yǎng)殖需要大量配合飼料,其中魚油作為優(yōu)質脂肪源是必須添加的成分。魚油由于加工資源所限,全球魚油產量近10年來一直徘徊不前,而水產養(yǎng)殖業(yè)對魚油的需求逐年提升,另一方面人們越來越關注魚油所帶來的益處,使得對于直接供人類消費的魚油需求增加,因此,魚油一直處于供不應求的狀態(tài),價格居高不下,成為制約水產養(yǎng)殖效益的瓶頸。尋找一種物美價廉、來源廣泛的脂肪源全部或部分代替魚油將是水產養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的必然趨勢。植物油原料廣泛,產量逐年升高,菜籽油的年產量在近10年來增加了18倍[5]。而且植物油由于價格低廉,富含不飽和脂肪酸,成為水產養(yǎng)殖的重要脂肪源[5]。植物油代替魚油已成功廣泛運用于對脂類利用能力較高的鮭鱒魚類[6]。在蝦蟹類養(yǎng)殖過程中也出現了采用亞麻籽油、豆油、菜籽油和花生油等植物油不同程度地取代魚油且在生長和繁殖方面具有較好表現的報道。如亞麻籽油、加拿大菜籽油和豆油對斑節(jié)對蝦(Penaeus monodon的促生長作用顯著高于鱈魚肝油[7]。豆油對提高中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis產卵力的效果優(yōu)于魚油[8]。更多報道顯示魚油和植物油的混合作用更佳[9]。脂肪源的營養(yǎng)價值在很大程度上取決于脂肪酸的不飽和程度及各種脂肪酸的比例。一般認為,富含n-6和n-3系列的高度不飽和脂肪酸(HUFA的海水魚油及其與植物油的混合油對蝦蟹類的營養(yǎng)價值要高于HUFA含量較低的動物油和植物油[10]。有研究表明,植物油對蝦蟹類促生長作用與植物油中亞麻酸(LNA和亞油酸(C18 ∶[G-3]2n-6,LOA的含量有關,冷水性的日本對蝦(Marsupenaeus japonicus Bate[11]和中國對蝦(Penaeus chinensis[12]LNA的作用優(yōu)于LOA,而溫水性的斑節(jié)對蝦[13]和印度對蝦(Penaeus indicus[14]LOA的作用優(yōu)于LNA。

        有關植物油在日本沼蝦中的作用還未見報道。肝胰腺是甲殼動物脂肪吸收和儲存的重要器官,在甲殼動物免疫、繁殖等生理過程中發(fā)揮著重要作用[15-16]。本試驗通過檢測飼喂不同植物脂肪源一段時間后的日本沼蝦肝胰腺和卵巢中脂肪酸的含量,并結合其肌肉和肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD和過氧化氫酶(CAT活力,從免疫機能的角度篩選出適合日本沼蝦的替選脂肪源,為優(yōu)化飼料配方、降低飼料成本提供理論基礎。

        1材料與方法

        11試驗蝦及其飼養(yǎng)

        日本沼蝦購江蘇省鹽城市海純路菜市場。試驗前于水族箱中暫養(yǎng)7 d,暫養(yǎng)期間每天投喂2次(分別為08:00和14:00剪碎的蜆肉。選取附肢完整、活潑健康、大小一致(063~075 g的雌蝦540尾,隨機分成6組,每組分3個小組,每小組30尾,每個小組3個重復,分別放入15個玻璃水族箱(長32 cm 、寬60 cm、高40 cm,水深20 cm內,每天 08:00 和 14:00 投喂自制飼料,每次投飼率為蝦濕質量的 2%~3%,根據攝食情況適當調整投喂量。每天投餌2 h后吸取殘餌和糞便,養(yǎng)殖期間每天換水1/4。24 h充氧,溶氧量≥55 mg/L,加熱棒控溫,水溫(25±2 ℃。

        12試驗飼料

        參照 SC/T 1066—2003《羅氏沼蝦配合飼料》水產行業(yè)標準及日本沼蝦營養(yǎng)需求相關文獻[17-21]設計基礎飼料配方,以優(yōu)質進口魚粉、豆粕和菜粕為主要蛋白源,分別以魚油、大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油為脂肪源,油脂添加水平為質量的6%,配制5組試驗飼料。飼料原料經粉碎過 60目篩,混合均勻后加工成顆粒飼料,晾干并保存于冰箱中備用?;A飼料配方為30%魚粉、20%豆粕、10%菜粕、143%啤酒酵母、10%淀粉、02%膽固醇、1%明膠、13%磷酸二氫鈣料、2%食鹽、1%甜菜堿、4%復合維生素和礦物質預混(預混料為1 kg飼糧提供維生素E 60 mg、維生素B1 15 mg、維生素B2 30 mg、維生素B6 15 mg、維生素B12 05 mg、維生素D3 3 000 IU、維生素 5 mg、維生素A 15 000 IU、生物素 25 mg、葉酸50 mg、泛酸鈣50 mg、煙酸75 mg、Cu 3 mg、Fe 25 mg、肌醇1 000 mg、Mn 15 mg、n 700 mg、I 06 mg。各試驗組飼料脂肪酸組成見表1。endprint

        [F(W26][HT6H][J]表1日本沼蝦飼料脂肪酸組成[HTSS][STB]

        [HJ5][BG(!][BHDFG3,W72,W212W]脂肪酸種類[B(][BHDWG12,W212W]脂肪酸含量(%

        [BHDWG12,W42。3,W4。2W]魚油大豆磷脂豆油花生油菜籽油[BW]

        [BHDG4mm,W72,W42DW,W42YQ1,W42DW,W4。2DWW]C12 ∶[G-3]0099035019031026

        [BHDW]C14 ∶[G-3]0417543472534585

        C15 ∶[G-3]0014054033054047

        C16 ∶[G-3]0 14222784229426982241

        C17 ∶[G-3]0痕量034028029023

        C18 ∶[G-3]0249734795827748

        C20 ∶[G-3]01089075059271156

        C22 ∶[G-3]0痕量062051353105

        C24 ∶[G-3]0痕量031017159041

        總飽和脂肪酸3294352376849563972

        C14 ∶[G-3]n-3030008009005003

        C16 ∶[G-3]n-9621861576859683

        C18 ∶[G-3]n-914071668191012961155

        C20 ∶[G-3]n-9367368389402778

        C22 ∶[G-3]n-92677723863831282

        C24 ∶[G-3]n-90200030041075

        總單不飽和脂肪酸27123677330029863976

        C16 ∶[G-3]3n-3071040064063063

        C20 ∶[G-3]5n-31155740653548722

        C22 ∶[G-3]6n-3518363251283322

        ∑n-3174411439688941107

        C18 ∶[G-3]2n-63083701229356409

        C20 ∶[G-3]4n-6167141142149138

        ∑n-64755111371505547

        總多不飽和脂肪酸22191654233913991654

        未知脂肪酸1779319593659398[HJ][BG)F][F)]

        13取樣

        飼養(yǎng)40 d,取樣前停食24 h,每組隨機挑選10尾蝦解剖,取其肌肉、肝胰腺和卵巢,置于-70 ℃超低溫冰箱中保存待測。

        14SOD、CAT活力和總蛋白含量的測定

        SOD、CAT的活力和總蛋白含量均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定。SOD活力單位定義:1 mg組織蛋白在1 mL反應液中SOD抑制率達50%時所對應的SOD量為1個SOD活力單位;CAT活力單位定義:1 mg組織蛋白1 s分解 1 mmol 的H2O2的量為1個活力單位。

        按質量體積比加生理鹽水制成10%的組織勻漿,3 000 r/min 離心10 min,然后取上清用生理鹽水稀釋,肌肉組織按照1 ∶[G-3]9稀釋成1%組織勻漿液,肝胰腺組織按照 1 ∶[G-3]19 稀釋成05%組織勻漿液,用于測定SOD、CAT活力和總蛋白含量。

        15脂肪酸含量的測定

        脂肪酸含量的測定方法:參照文獻[22]提取各組樣品中的脂肪,[JP2]參照文獻[23]對其油脂進行皂化及甲酯化;分別吸取1 μL脂肪酸甲酯樣品進行氣相色譜-質譜分析,氣相色譜-質譜儀為Thermo Quest Trace GC/MS,色譜柱采用30 m×025 mm×025 μm SUPELCO GC/MS毛細管柱,氣化室溫度與傳輸線溫度分別為250、280 ℃;程序升溫步驟為初溫 50 ℃,10 ℃/min升高至280 ℃,保持10 min。分流比為 10 ∶[G-3]1,進樣量為1 μL;質譜條件為EI電離源,信增器電壓為1 200 V,離子源溫度為230 ℃,四極桿溫度為150 ℃。全掃描(SCAN質量為45~500 mau;將樣品質譜圖與NIST標準圖庫質譜圖進行匹配,確認樣品中的脂肪酸類別,采用歸一化法計算組分的相對含量。

        16數據處理和分析

        試驗數據均以“平均值±標準差”表示,用SPSS 180對數據進行單因素方差分析,用Duncans法進行多重比較。

        2結果與分析

        21不同脂肪源對日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD活力的影響

        不同脂肪源對日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD活力的影響結果見表2。菜籽油組肌肉和肝胰腺SOD活力均顯著強于魚油組,花生油組肝胰腺SOD活力顯著強于魚油組和豆油組,大豆磷脂組肝胰腺SOD活力顯著低于其他各組。

        [F(W9][HT6H][J][WTH]表2不同脂肪源對日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD活力的影響[WTB][HTSS][STB]

        [HJ5][BG(!][BHDFG3,W9,W20W]脂肪源[B(][BHDWG12,W20W]SOD活力(U/mg

        [BHDWG12,W10。2W][XXSX2-SX192]肌肉肝胰腺[BW]

        [BHDG12,W9Q2,W10。2DWW]魚油7369±385b7845±274b

        [BHDW]大豆磷脂7727±220ab5778±038c

        豆油7889±716ab7974±305bendprint

        花生油8097±1048ab9728±791a

        菜籽油9154±524a10060±075a[HJ][BGF]

        [JP2]注:同列數據后不同小寫字母表示差異顯著(P<005。表3同。[F]

        22不同脂肪源對日本沼蝦肌肉和肝胰腺CAT活力的影響

        不同脂肪源對日本沼蝦肌肉和肝胰腺CAT活力的影響結果見表3。除魚油組外,日本沼蝦肝胰腺CAT活力均高于肌肉。大豆磷脂組和菜籽油組肌肉中CAT活力顯著高于魚油組、豆油組和花生油組,大豆磷脂組、豆油組和菜籽油組肝胰腺CAT活力顯著高于魚油組和花生油組。

        [F(W8][HT6H][J][WTH]表3不同脂肪源對日本沼蝦肌肉和肝胰腺CAT活力的影響[WTB][HTSS][STB]

        [HJ5][BG(!][BHDFG3,W9,W20W]脂肪源[B(][BHDWG12,W20W]CAT活力(U/mg

        [BHDWG12,W10。2W][XXSX2-SX192]肌肉肝胰腺[BW]

        [BHDG12,W9Q2,W10。2DWW]魚油253±010de183±098b

        [BHDW]大豆磷脂869±036a1578±080a

        豆油239±024e2032±273a

        花生油330±056cd665±065b

        菜籽油451±022b1416±224a[HJ][BG)F][F)]

        23不同脂肪源對日本沼蝦肝胰腺脂肪酸含量的影響

        不同脂肪源對日本沼蝦肝胰腺脂肪酸含量的影響結果見表4。飼喂不同脂肪源的日本沼蝦肝胰腺脂肪酸種類的組成較一致,飽和脂肪酸如C12 ∶[G-3]0、C13 ∶[G-3]0、C19 ∶[G-3]0和C20 ∶[G-3]0的含量差異不顯著,但不飽和脂肪酸的含量差異較大。魚油組EPA(C20 ∶[G-3]5n-3和n-3多不飽和脂肪酸含量均顯著高于其他各組;魚油組n-6 PUFA含量顯著低于其他各組;n-3/n-6 的值顯著高于于其他各組。豆油組和大豆磷脂組 C18 ∶[G-3]2n-6、C20 ∶[G-3]2n-6和多不飽和脂肪酸含量較高。菜籽油組飽和脂肪酸(SFA含量最低,而C18 ∶[G-3]n-9、C22 ∶[G-3]n-9和單不飽和脂肪酸總量顯著高于其他各組。[FL]

        [F(W30][HT6H][J]表4不同脂肪源對日本沼蝦肝胰腺脂肪酸組成的影響[HTSS][STB]

        [HJ5][BG(!][BHDFG3,W72,W522W]脂肪酸種類 [B(][BHDWG12,W522W]肝胰腺脂肪酸含量(%

        [BHDWG12,W102。5W]魚油組大豆磷脂組豆油組花生油組菜籽油組[BW]

        [BHDG12,W72,W102。5W]C12 ∶[G-3]0019±010a014±002a015±005a015±008a013±012a

        [BHDW]C13 ∶[G-3]0003±003a003±001a004±001a003±003a痕量

        C14 ∶[G-3]0869±064a418±074b424±013b420±092b321±084b

        C15 ∶[G-3]0074±008a054±020ab035±033b043±017ab032±006b

        C16 ∶[G-3]01769±134ab1844±197a1572±072bc1628±022abc1455±086c

        C17 ∶[G-3]0039±009a027±010a027±006a010±015b006±002b

        C18 ∶[G-3]0495±012b612±079a520±014ab473±069b338±025c

        C19 ∶[G-3]0002±002a002±002a001±001a002±002a003±001a

        C20 ∶[G-3]0027±005a050±031a051±035a044±039a055±047a

        C22 ∶[G-3]0009±006b014±011b015±001b057±033a009±004b

        C24 ∶[G-3]0003±003ab003±004ab002±003ab016±014a001±001b

        總飽和脂肪酸3310±022a3043±269ab2665±101b2711±293b2230±182c

        C16 ∶[G-3]n-9920±084a508±091b438±019b514±054b450±090b

        C18 ∶[G-3]n-92698±194c3059±478c2927±212c3697±308b4630±155a

        C20 ∶[G-3]n-9333±028a198±018b222±014ab231±092ab320±050a

        C22 ∶[G-3]n-9178±019ab124±007b109±015b125±095b256±041a

        C24 ∶[G-3]n-9015±006a005±004a005±006a009±010a005±003a

        總單不飽和脂肪酸4146±106bcd3894±577cd3700±185d4576±198b5662±081a

        C20 ∶[G-3]5n-31092±017a636±165b620±000b493±114bc349±032c

        C22 ∶[G-3]6n-3360±039a271±070a283±045a270±052a109±025b

        ∑n-31452±052a906±233b903±045b762±165b459±047cendprint

        C18 ∶[G-3]2n-6477±077c1641±113ab2068±204a1399±164b1276±063b

        C20 ∶[G-3]2n-6055±007c232±081ab292±057a215±048ab149±028bc

        C20 ∶[G-3]4n-6104±055a056±023ab045±006b038±012b024±003b

        ∑n-6637±046c1929±198ab2403±141a1653±128b1449±082b

        總多不飽和脂肪酸2089±082bc2835±805ab3305±096a2415±327bc1908±129c

        n-3/n-6228±015a075±017b038±004b050±025b032±002b

        未知脂肪酸455±032228±021330±017298±015200±006[HJ][BG)F]

        注:同行數據后不同小寫字母表示差異顯著(P<005。表5同。[F)]

        [FL(22]24不同脂肪源對日本沼蝦卵巢脂肪酸的影響

        不同脂肪源對日本沼蝦卵巢脂肪酸含量的影響結果見表5。不同脂肪源對日本沼蝦卵巢C12 ∶[G-3]0、C13 ∶[G-3]0、C19 ∶[G-3]0和C22 ∶[G-3]n-9脂肪酸的含量影響不顯著(P>005)。魚油組的亞油酸、C20 ∶[G-3]2n-6含量及n-6/n-3比值均顯著低于其他各組(P<005),EPA含量顯著高于其他各組(P<005)。大豆磷脂組亞油酸含量最高,顯著高于魚油組、花生油組和菜籽油組(P<005)?;ㄉ徒MC16 ∶[G-3]0和C22 ∶[G-3]0均顯著高于其他各組(P<005)。魚油組和花生油DHA(C22 ∶[G-3]6n-3)含量組差異不顯著(P>005),且顯著高于豆油組和菜籽油組(P<005)。

        3結論與討論

        31不同脂肪源對日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD和CAT活力的影響

        SOD是清除氧自由基的重要酶類,也是機體內唯一以O2-[G-3]·[JP2]為底物的酶,它的作用是催化O2-[G-3]·歧化為過氧化氫和O2,維持細胞內的氧自由基處于低量無害狀態(tài)[24]。本試驗發(fā)現菜籽油肌肉和肝胰腺中SOD活力均顯著高于魚油組,與斑馬魚(Danio rerio的研究結果[25]一致。相關文獻報道菜粕和花生粕代替魚粉也能提高血清、肌肉或肝胰腺SOD活力,且這種增加效益與添加量有關,添加量越高,SOD活力越強[26-28]。[FL]

        [F(W29][HT6H][J]表5不同脂肪源對日本沼蝦卵巢脂肪酸組成的影響[HTSS][STB]

        [HJ5][BG(!][BHDFG3,W72,W522W]脂肪酸種類[B(][BHDWG12,W522W]卵巢脂肪酸含量(%

        [BHDWG12,W102。5W]魚油組大豆磷脂組豆油組花生油組菜籽油組[BW]

        [BHDG12,W72,W102。5W]C12 ∶[G-3]0016±001a017±004a016±008a023±007a024±006a

        [BHDW]C13 ∶[G-3]0003±001a003±001a002±002a003±002a002±001a

        C14 ∶[G-3]0548±004a295±066b277±091b367±073b366±082b

        C15 ∶[G-3]0072±004ab074±017a044±014bc058±019ab024±008c

        C16 ∶[G-3]02130±028b1960±082b2030±278b2449±073a2077±142b

        C17 ∶[G-3]0080±001a076±021a056±011ab078±019a035±016b

        C18 ∶[G-3]0698±001c698±084c738±018bc797±045ab734±022bc

        C19 ∶[G-3]0005±001a006±004a003±001a005±002a003±002a

        C20 ∶[G-3]0023±002c029±004bc023±007c042±013ab043±006a

        C22 ∶[G-3]0002±001c006±001b002±001c012±003a004±002bc

        C24 ∶[G-3]0痕量002±001a痕量002±001a痕量

        總飽和脂肪酸3575±035a3164±284b3189±432b3836±352a3312±127b

        C16 ∶[G-3]n-9831±004a633±195ab488±087bc573±275abc335±139c

        C18 ∶[G-3]n-92389±081bc2234±287c2597±090abc2437±096bc2742±142ab

        C20 ∶[G-3]n-9252±004a157±049b170±029b208±475ab250±031a

        C22 ∶[G-3]n-9183±152a056±023a054±001a067±013a040±009a

        C24 ∶[G-3]n-9005±003a003±001a痕量004±000a痕量

        總單不飽和脂肪酸3659±064ab3081±016c3309±025bc3289±032c3367±046bc

        C20 ∶[G-3]5n-31475±029a859±156bc882±177b938±183b638±159c

        C22 ∶[G-3]6n-3557±039a348±008b232±072c488±079ab206±064cendprint

        ∑n-32032±009a1207±148bc1114±249cd1426±107b844±179d

        C18 ∶[G-3]2n-6212±059c1848±013a1455±080ab932±068b1036±053b

        C20 ∶[G-3]2n-6062±011d178±027bc241±031a228±033ac210±063abc

        C20 ∶[G-3]4n-6010±006a054±072a050±012a039±017a痕量

        ∑n-6283±076c2081±058a1747±035ab1199±087b1246±103b

        總多不飽和脂肪酸2315±086bc3288±207a2860±286ab2625±179bc2090±193c

        n-3/n-6745±197a059±005b076±051b117±018b068±033b

        未知脂肪酸451±011467±029642±019250±0201231±073[HJ][BG)F][F)]

        [FL(22]也有文獻報道,菜籽油與魚油相比雖然可以提高異育銀鯽(Carassius auratus gibelio血清SOD活力,但是與魚油組差異不顯著[29]。上述報道的差異可能與菜籽油的添加量不同有關。

        CAT是一種含鐵的氧化酶,與產生H2O2的酶類相偶聯,使H2O2分解為水和分子氧。本試驗發(fā)現,與魚油組比較,大豆磷脂、豆油花生油和菜籽油均可以提高日本沼蝦肝胰腺CAT活力,且大豆磷脂、豆油、和菜籽油的作用顯著,與斑點叉尾鮰(Lctalurus punctatus Rafinesque中的研究結果[30]一致。不同脂肪源的差異實質上就是脂肪酸組成及比例的差異,本試驗中幾種植物油飼料中亞油酸含量均高于魚油組,而魚油組飼料中(EPA+DHA含量最高。楊鳶劼等發(fā)現,在飼料中添加亞油酸組的黃鱔(Monopterus albus血清中CAT活力顯著高于在飼料中添加(EPA+DHA組的活力[31]。這可能是本試驗中植物油能提高肝胰腺CAT活力的原因。

        32肝胰腺中SOD、CAT活力與脂肪酸含量的關系

        SOD酶活力的增強,會減少體內氧自由基的積累,減少不飽和脂肪酸的氧化,提高不飽和脂肪酸的含量。本試驗中發(fā)現菜籽油組肝胰腺中SOD力最高,其次為花生油組,肝胰腺中不飽和脂肪酸也是在菜籽油組含量最高,其次為花生油組。本試驗肝胰腺中SOD和CAT活力出現了不對稱性,也就是說各脂肪源組肝胰腺中SOD和CAT活力沒有出現同時增強或減弱的現象。有學者認為,這種不對稱性會引起體內氧自由基的積累,從而使不飽和脂肪酸的氧化,降低不飽和脂肪酸的含量[32-33]。本試驗中除了發(fā)現肝胰腺中SOD活力和肝胰腺中單不飽和脂肪酸含量之間的正相關性,并沒有發(fā)現SOD和CAT的不平衡性和單不飽和脂肪酸含量之間具有相關性。此假說是基于CAT作用于SOD產物H2O2理論基礎上產生的,即SOD活力越高,分解的O2-[G-3]·越多,產生的H2O2也越多,因此機體會產生越多的CAT來清除H2O2,但是體內參與清除H2O2的酶不僅僅只有CAT,谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px也具有清除H2O2的功能[34],所以本試驗現象可能是由于不同試驗組產生不同活力的GSH - Px所致。

        33不同脂肪源對日本沼蝦肝胰腺和卵巢脂肪酸組成的影響

        本試驗中豆油組的飼料與肝胰腺PUFA含量均最高,魚油組飼料與肝胰腺的EPA含量最高,上述結果表明,日本沼蝦肝胰腺中PUFA的組成與其飼料密切相關。與Deering等研究結果[7,35]一致。飼料中所含脂肪酸是蝦類體組織脂肪酸特別是必需脂肪酸的重要來源,飼料脂肪含量及質量將影響體組織脂肪酸組成[36]。

        飼料中未檢測到C20 ∶[G-3]2n-6,但是在每組試驗蝦肝胰腺和卵中均檢測到數量不等的C20 ∶[G-3]2n-6。郭志峰等在對日本沼蝦不同發(fā)育階段卵巢中脂肪酸進行了測定和比較的時候,發(fā)現日本沼蝦卵巢進入生長期開始出現C20 ∶[G-3]2n-6[37],本試驗蝦卵巢發(fā)育處于Ⅲ期,即為郭志峰等所指生長期。另外有研究表明,日本沼蝦肝胰腺是卵巢發(fā)育的重要營養(yǎng)源[15-16],本試驗研究發(fā)現卵巢(y和肝胰腺(x中C20 ∶[G-3]2n-6含量有著較強的相關性:y=-0257x2+1562x-0083(r2=078,這種相關性為上述結論提供了新的證據。本試驗發(fā)現魚油組C20 ∶[G-3]2n-6含量最低,卵巢和肝胰腺中含量分別為(055%±007%和(062%±011%,其他各組卵巢和肝胰腺中含量均較高(149%~292%,造成這種差異及該脂肪酸在卵巢發(fā)育過程中的作用有待進一步研究。

        試驗蝦肝胰腺和卵巢中的含量最高的脂肪酸均為 C18 ∶[G-3]n-9,肝胰腺中為2698%~4630%,卵巢中為2234%~2988%。與郭志峰等對日本沼蝦卵巢中脂肪酸的測定結果[37]一致。斑節(jié)對蝦中也有類似的報道,且斑節(jié)對蝦卵巢發(fā)育過程中C18 ∶[G-3]1n在肝胰腺中不斷積累[38]。表明 C18 ∶[G-3]n-9 是日本沼蝦卵巢發(fā)育的重要能源物質。

        EPA和DHA是水產動物性腺發(fā)育所需的重要營養(yǎng)因子,影響著生物體的卵巢發(fā)育、卵子孵化和幼體成活力[39-41]。本試驗結果顯示,魚油組肝胰腺EPA含量和卵巢DHA含量顯著高于其他各組。結果表明,蝦體肝胰腺和卵巢中的EPA和DHA與飼料中的含量差異不完全一致,比如豆油飼料組DHA含量最少,肝胰腺和卵巢中DHA含量均分別為菜籽油組含量最低。表明EPA與DHA的吸收不僅和其在飼料中的含量有關,而且與飼料中各脂肪酸的配比有關,蝦體具有合成少量DHA和EPA的能力[42-43],可能也是造成這種差異的原因之一。endprint

        本試驗中植物油組(大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油肝胰腺和卵巢亞油酸顯著高于魚油組,與虹鱒的研究結果[44]一致。有學者認為,植物油可以將魚體內亞油酸延長并去飽和為n-3 PUFA(EPA和DHA[45-46]。本研究發(fā)現植物油組(大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油肝胰腺和卵巢中EPA顯著低于魚油,DHA與魚油組差異不顯著,本研究結果與虹鱒(Oncorhynchus mykiss和大西洋鮭魚(Salmo salar中的研究結果[47-48]一致。表明蝦體內可能不具有將亞油酸延長并去飽和為EPA和DHA的作用,也有可能因為日本沼蝦卵巢發(fā)育需要較多的亞油酸。據相關文獻報道,在卵巢發(fā)育過程中,日本沼蝦卵巢和肝胰腺中EPA的含量逐漸下降,而亞油酸含量逐漸上升[38]。

        綜上所述,大豆磷脂可以提高卵巢亞油酸的含量,豆油可以提高肝胰腺n-6 PUFA和卵巢亞油酸的含量,花生油可以提高卵巢DHA和n-3/n-6的值,菜籽油可以提高肝胰腺MUFA和卵巢n-3 MUFA含量。其中亞油酸、n-6 PUFA、DHA和n-3 PUFA對甲殼動物免疫機能和繁殖性能均具有一定的促進作用[49-50]。因此,大豆磷脂、豆油、花生油與菜籽油作為日本沼蝦備選脂肪源均具有一定的積極作用,其中大豆磷脂和豆油的作用相似,但大豆磷脂會降低肝胰腺SOD活力,花生油會降低肝胰腺CAT活力,與此相反,豆油可以提高肝胰腺CAT活力,菜籽油可以提高肌肉和肝胰腺中SOD和CAT活力。因此,豆油和菜籽油在日本沼蝦飼料中可以一定程度上代替魚油,具體替代方案還需要結合日本沼蝦生長等指標進一步研究闡明。

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