吳祥　陳宏州　+楊敬輝　李薩利　于海燕　朱成剛　王健　吉沐祥

摘要：為篩選出對(duì)水稻紋枯?。≧hizoctonia solani）高效的新配方藥劑，延緩噻呋酰胺抗藥性的產(chǎn)生，以噻呋酰胺與氟環(huán)唑兩者混配進(jìn)行室內(nèi)抑菌活性測(cè)定，結(jié)果表明，氟環(huán)唑?qū)λ炯y枯病病菌的室內(nèi)生物活性高于噻呋酰胺。供試的8種混配組合對(duì)水稻紋枯病病菌的聯(lián)合作用均表現(xiàn)為增效或相加作用，其中噻呋酰胺與氟環(huán)唑按3 ∶[KG-3]、2 ∶[KG-3]的比例混配表現(xiàn)為明顯增效作用，增效系數(shù)分別為77、202。二者混配防治水稻紋枯病可行，其中噻呋酰胺與氟環(huán)唑以2 ∶[KG-3]混配效果較好。

關(guān)鍵詞：水稻紋枯?。秽邕货０?；氟環(huán)唑；抑菌活性

中圖分類(lèi)號(hào)： S43542文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A[HK]

文章編號(hào)：002-302（204）2-052-03[HS）][HT9SS]

[H4mm]

收稿日期：204-06-26

基金項(xiàng)目：江蘇省科技基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)計(jì)劃（編號(hào)：BM203462）。

作者簡(jiǎn)介：吳祥（983—），男，江蘇泗洪人，碩士，助理研究員，從事植保農(nóng)藥研究與開(kāi)發(fā)。Tel：（05）8726539；E-mail：wuxianghl@26com。

通信作者：吉沐祥，研究員，從事農(nóng)作物病害研究與植保農(nóng)藥開(kāi)發(fā)工作。Tel：（05）87276940；E-mail：jilvdun2800@63com。[H]

[ZK）]

水稻紋枯?。≧hizoctonia solani）已成為當(dāng)前水稻生產(chǎn)中發(fā)生最普遍、危害最嚴(yán)重、損失最大的病害之一，在世界稻產(chǎn)區(qū)均有分布。水稻紋枯病主要在水稻分蘗期至抽穗期發(fā)生。抽穗期前后為發(fā)病盛期，主要危害葉鞘、葉片，嚴(yán)重時(shí)可侵入莖稈并蔓延至穗部，造成秕谷增加，粒質(zhì)量下降，并可造成水稻倒伏或整株枯死。近年來(lái)由于水稻栽培模式多樣化，以及栽培管理水平、施肥量的提高，水稻紋枯病發(fā)生日趨嚴(yán)重。目前生產(chǎn)上常用的防治水稻紋枯病藥劑包括井岡霉素、三唑酮、苯甲·丙環(huán)唑、己唑醇等[2]。噻呋酰胺是孟山都公司研制開(kāi)發(fā)的噻唑酰胺類(lèi)殺菌劑，具有強(qiáng)內(nèi)吸傳導(dǎo)性、長(zhǎng)持效性。該藥劑對(duì)絲核菌屬、柄銹菌屬、黑粉菌屬、腥黑粉菌屬、伏革菌屬、核腔菌屬等致病真菌均有活性，尤其對(duì)擔(dān)子菌綱真菌引起的病害如紋枯病、立枯病等有特效[3]。氟環(huán)唑是由巴斯夫公司于985年開(kāi)發(fā)的新型、廣譜、持效期長(zhǎng)的三唑類(lèi)含氟殺菌劑，與多數(shù)三唑類(lèi)殺菌劑一樣，其作用機(jī)制主要是抑制病原菌甾醇生物合成，兼具保護(hù)、治療作用，對(duì)絲核菌屬的病原真菌具有很高的生物活性[4-6]。為了延緩噻呋酰胺、氟環(huán)唑單獨(dú)使用時(shí)抗藥性的產(chǎn)生，江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所（以下簡(jiǎn)稱(chēng)本所）科研人員以噻呋酰胺與氟環(huán)唑兩者混配進(jìn)行室內(nèi)抑菌活性測(cè)定，并研制開(kāi)發(fā)出30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑，在田間進(jìn)行了藥效試驗(yàn)。

材料與方法

試驗(yàn)藥劑

95%噻呋酰胺（trifluzamide）原藥（北京華戎凱威植保生物科技有限公司）、97%氟環(huán)唑（epoxiconazole）原藥（江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司）、30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑（江蘇省綠盾植保農(nóng)藥實(shí)驗(yàn)有限公司）、240 g/L噻呋酰胺懸浮劑（日本化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社）、24%井岡霉素A水劑（武漢科諾生物科技股份有限公司）、25g/L氟環(huán)唑懸浮劑（江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司）、24%嘧菌·己唑醇懸浮劑（江蘇省蘇科農(nóng)化有限責(zé)任公司）。

2供試菌株

[3]水稻紋枯病菌采自江蘇省句容市水稻田，由本所植保研究室分離鑒定，菌株4 ℃保存于馬鈴薯蔗糖瓊脂（SA）斜面上。

3室內(nèi)抑菌活性試驗(yàn)

3藥液配制與濃度設(shè)計(jì)用適量丙酮溶解噻呋酰胺、氟環(huán)唑原藥配制成0 000 μg/mL母液，置于4 ℃冰箱中備用。母液再用適量無(wú)菌水溶解，在單劑毒力測(cè)定的基礎(chǔ)上，按噻呋酰胺 ∶[KG-3]氟環(huán)唑?yàn)? ∶[KG-3]、4 ∶[KG-3]、3 ∶[KG-3]、2 ∶[KG-3]、 ∶[KG-3]、 ∶[KG-3]2、 ∶[KG-3]3、 ∶[KG-3]4等不同質(zhì)量配比測(cè)定混劑的抑制率。在初篩的基礎(chǔ)上，將2種單劑及8種混配組合均設(shè)置0007 82 5、005 625 0、003 250 0、0062 500 0、025 000 0、0250 000 0、0500 000 0 μg/mL 等7個(gè)系列質(zhì)量濃度。以藥劑有效成分在培養(yǎng)基中的濃度為測(cè)試濃度，采用無(wú)菌水作為空白對(duì)照（CK）。

32測(cè)試方法將水稻紋枯病菌轉(zhuǎn)接到SA平皿中，25 ℃ 下活化48 h，在近菌落邊緣用打孔器制取直徑為5 mm的菌餅，并轉(zhuǎn)接到“3”中配比稀釋配制的含藥SA系列平皿中及空白對(duì)照中，各處理重復(fù)4次。25 ℃培養(yǎng)48 h，待對(duì)照中菌落直徑長(zhǎng)至約平皿直徑的4/5時(shí)，采用十字交叉法量取菌落直徑。菌絲生長(zhǎng)平均抑制率計(jì)算公式如下：

菌絲生長(zhǎng)抑制率=[（對(duì)照菌落直徑均值-處理菌落直徑均值）/（對(duì)照菌落直徑均值-接種菌餅直徑）]×00%。[Y]（）

33混劑聯(lián)合抑菌活性評(píng)價(jià)以藥劑濃度對(duì)數(shù)值為自變量x，以菌絲生長(zhǎng)抑制率的概率值為因變量y，計(jì)算毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)r，根據(jù)回歸方程求出各藥劑的EC50值及95%置信區(qū)間。采用增效系數(shù)（SR）評(píng)價(jià)藥劑混用的聯(lián)合作用類(lèi)型，SR<05為拮抗作用，05≤SR≤5為相加作用，SR>5為增效作用。

[HS][Z（]SR=EC50（th）/EC50（ob）[Z）]；[Y]（2）

[HS3][Z（]EC50（th）=[SX（]ab[SX（]aEC（A）50[SX）][SX（]bEC（B）50[SX）][SX）]。[Z）][Y]（3）

式中：A、B分別為噻呋酰胺、氟環(huán)唑單劑，a、b為相應(yīng)單劑在混劑中的比例，EC50（th）為混劑EC50理論值，EC50（ob）為混劑EC50實(shí)測(cè)值。

4田間藥效試驗(yàn)

4試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑225、300、375 mL/hm2，240 g/L噻呋酰胺懸浮劑300 mL/hm2，25 g/L 氟環(huán)唑懸浮劑600 mL/hm2，24%嘧菌·己唑醇懸浮劑300 mL/hm2，24%井岡霉素A 水劑450 mL/hm2以及清水對(duì)照共8個(gè)處理，每個(gè)處理3次重復(fù)，各處理小區(qū)面積 667 m2，隨機(jī)區(qū)組排列。

42試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)在句容市杜家村進(jìn)行，供試品種為鎮(zhèn)稻0號(hào)，栽培管理?xiàng)l件較好，于203年6月8日移栽。試驗(yàn)田前茬為小麥，土質(zhì)為壤質(zhì)土，肥力中等，常年水稻紋枯病發(fā)生較重。

43施藥時(shí)間與方法

于203年7月24日（發(fā)病盛期）第次施藥，7月3日（發(fā)病高峰期）第2次施藥，同一小區(qū)內(nèi)2次用藥的藥劑品種、用藥量均相同。采用黃果樹(shù)6型背負(fù)式電動(dòng)噴霧器兌水均勻噴霧，用水量900 kg/hm2，施藥時(shí)保持田間有水層。

44調(diào)查方法

每處理定5個(gè)點(diǎn)，每點(diǎn)固定調(diào)查5叢水稻。施藥前及第2次施藥后8、4、2 d分別調(diào)查水稻總株數(shù)、紋枯病病情指數(shù)并計(jì)算防治效果，采用鄧肯氏新復(fù)極差法（DMRT）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。水稻紋枯病病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為：0級(jí)：全株無(wú)??；級(jí)：倒4張葉片及其以下葉鞘葉片發(fā)病；3級(jí)：倒3張葉片及其以下葉鞘葉片發(fā)?。?級(jí)：倒2張葉片及其以下葉片葉鞘發(fā)??；7級(jí)：劍葉及其以下葉鞘葉片發(fā)?。?級(jí)：全株發(fā)病。病情指數(shù)、病指防效計(jì)算公式如下：

病情指數(shù)=[∑（各級(jí)病株數(shù)×各級(jí)代表值）/（調(diào)查總株數(shù)×9）]×00%；[Y]（4）

病指防效=[-（對(duì)照區(qū)藥前病指×施藥區(qū)藥后病指）/（對(duì)照區(qū)藥后病指×施藥區(qū)藥前病指）]×00%。[Y]（5）

5數(shù)據(jù)處理

采用DS 30軟件處理數(shù)據(jù)。

2結(jié)果與分析

2噻呋酰胺、氟環(huán)唑及其混配組合對(duì)水稻紋枯病菌菌絲生長(zhǎng)的影響[2]

噻呋酰胺與氟環(huán)唑濃度為0007 8～050 μg/mL時(shí)，對(duì)水稻紋枯病病菌的抑菌率分別為85%～822%、555%～9529%。噻呋酰胺與氟環(huán)唑8種混配組合的濃度為 0007 82 5～0500 000 0 μg/mL 時(shí)，5 ∶[KG-3]、4 ∶[KG-3]、3 ∶[KG-3]、2 ∶[KG-3]、 ∶[KG-3]、 ∶[KG-3]2、 ∶[KG-3]3、 ∶[KG-3]4的配比混配組合對(duì)水稻紋枯病菌菌絲生長(zhǎng)抑菌率分別為85%～8364%、02%～826%、20%～9203%、20%～9387%、6%～7675%、967%～7278%、20%～8752%、6%～8809%。

22噻呋酰胺、氟環(huán)唑及其混配組合對(duì)水稻紋枯病病菌的抑制效果

噻呋酰胺與氟環(huán)唑單劑及混配劑的濃度對(duì)數(shù)與抑菌效果概率值的相關(guān)系數(shù)均≥0973 7，說(shuō)明防治效果概率值的變異有9737%或以上來(lái)自濃度對(duì)數(shù)的變異，表明用所得模型表達(dá)濃度對(duì)數(shù)與防治效果概率值的關(guān)系可行（表）。噻呋酰胺、氟環(huán)唑?qū)λ炯y枯病病菌的EC50值分別為07 4、0046 9 μg/mL，氟環(huán)唑?qū)λ炯y枯病病菌的室內(nèi)生物活性高于噻呋酰胺。當(dāng)噻呋酰胺與氟環(huán)唑分別以5 ∶[KG-3]、4 ∶[KG-3]、 ∶[KG-3]、 ∶[KG-3]2、 ∶[KG-3]3、 ∶[KG-3]4的配比混配時(shí)，增效系數(shù)為05～5，混配劑的聯(lián)合作用類(lèi)型為相加作用。噻呋酰胺與氟環(huán)唑分別以 3 ∶[KG-3]、2 ∶[KG-3]配比混配時(shí)，增效系數(shù)大于5，具有增效作用；噻呋酰胺與氟環(huán)唑2 ∶[KG-3]配比的增效系數(shù)最大，增效作用最佳。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，噻呋酰胺與氟環(huán)唑以2 ∶[KG-3]作為混配制劑的配比最好。

23噻呋·氟環(huán)唑?qū)λ炯y枯病的田間防治效果

劑 300 mL 防效最好；30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑300、375 mL/hm2 以及24%井岡霉素A水劑450 mL hm2三者防效間差異不顯著；30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑225 mL/hm2、240 g/L 噻呋酰胺懸浮劑300 mL兩者間防效無(wú)顯著差異；24%井岡霉素A 水劑450 mL/hm2、24%嘧菌·已唑醇懸浮劑 300 mL/hm2 兩者間防效無(wú)顯著差異。第2次藥后4 d，30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑300、375 mL/hm2防效最好，兩者之間無(wú)顯著差異；30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑225 mL/hm2、24%井岡霉素A 水劑 450 mL/hm2 兩者間防效無(wú)顯著差異；240 g/L噻呋酰胺懸浮劑300 mL/hm2、24%嘧菌·己唑醇懸浮劑 300 mL/hm2 兩者間防效無(wú)顯著差異。第2次藥后2 d，30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑300、375 mL/hm2防效最好，且兩者之間無(wú)差異；30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑225 mL/hm2也明顯優(yōu)于25 g/L氟環(huán)唑懸浮劑600 mL/hm2、24%嘧菌·己唑醇懸浮劑300 mL/hm2、24%井岡霉素A水劑450 mL/hm2、240 g/L噻呋酰胺懸浮劑 300 mL/hm2 的處理防效。第次藥后2、5、7 d以及第2次藥后3、8、5 d，各劑量處理下水稻均未出現(xiàn)明顯藥害。[FL）]

[FK（W2][HT6H][Z]表2供試藥劑對(duì)水稻紋枯病的田間防治效果[HTSS][STBZ]

[H5][BG（！][BHDFG3，WK8，WK6，WK36W]處理藥前病指[ZB（][BHDWG2，WK2。3W]第2次藥后8 d第2次藥后4 d第2次藥后2 d

病指防效（%）病指防效（%）病指防效（%）[ZB）W]

[BHDG2，WK8ZQ，WK6。7W]30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑375 mL/hm208340899ABa23940Aa0839573Aa

[BHDW]30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑300 mL/hm2074228944Aa338957Aa08495Aa

[BH]30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑225 mL/hm205044880CDc58262Bb079095Bb

[BH]25 g/L氟環(huán)唑懸浮劑600 mL/hm204347892Dd2556536De227882De

[BH]24%嘧菌·己唑醇懸浮劑300 mL/hm2037080864Bb497655Cd59859Dd

[BH]24%井岡霉素A 水劑450 mL/hm207048729ABab27826Bb5326785Ef

[BH]240 g/L噻呋酰胺懸浮劑300 mL/hm20300828286Cc27868Cc098478Cc

[BH]CK060937030397[H][BG）F]

注：同列數(shù)據(jù)后不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著（<00）、不同小寫(xiě)字母表示差異顯著（<005）。[FK）]

[FL（2K2]3結(jié)論與討論

在目前抗紋枯病水稻品種缺乏的情況下，選擇適當(dāng)藥劑并采用合適的施藥方法是防治水稻紋枯病的重要措施[7-8]。研究表明，氟環(huán)唑?qū)λ炯y枯病病菌的室內(nèi)生物活性高于噻呋酰胺。供試的8種混配組合對(duì)水稻紋枯病病菌的聯(lián)合作用均表現(xiàn)為增效或相加作用，其中噻呋酰胺與氟環(huán)唑按3 ∶[KG-3]、2 ∶[KG-3] 的比例混配表現(xiàn)為明顯增效作用，增效系數(shù)分別為77、202。因此，二者混配防治水稻紋枯病可行，其中噻呋酰胺與氟環(huán)唑以2 ∶[KG-3]混配較好。田間試驗(yàn)表明，30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑300～375 mL/hm2的防效顯著超過(guò)目前生產(chǎn)中主要推廣品種240 g/L噻呋酰胺懸浮劑300 mL/hm2的防效，30%噻呋·氟環(huán)唑懸浮劑225 mL/hm2高于或相當(dāng)于240 g/L噻呋酰胺懸浮劑300 mL/hm2的防效，且能兼治稻曲病、稻瘟病，適量范圍內(nèi)對(duì)水稻生育安全無(wú)藥害，其適宜用藥量為 225～375 mL/hm2，建議在水稻紋枯病發(fā)病初期施用，可與井岡霉素、咪鮮胺、己唑醇等輪換使用以減緩抗藥性的產(chǎn)生。

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