亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        健脾生血顆粒對(duì)大鼠胚胎-胎仔發(fā)育毒性研究

        2015-03-21 09:06:38黃志軍裴學(xué)軍唐惠丹
        世界中醫(yī)藥 2015年10期
        關(guān)鍵詞:胎鼠生血孕鼠

        趙 剛 夏 瑩 黃志軍 裴學(xué)軍 唐惠丹

        (1 健民集團(tuán)兒童藥物研究院,武漢,430052; 2 湖北省食品藥品安全評(píng)價(jià)中心,武漢,430073)

        健脾生血顆粒對(duì)大鼠胚胎-胎仔發(fā)育毒性研究

        趙 剛1夏 瑩2黃志軍1裴學(xué)軍1唐惠丹1

        (1 健民集團(tuán)兒童藥物研究院,武漢,430052; 2 湖北省食品藥品安全評(píng)價(jià)中心,武漢,430073)

        目的:評(píng)價(jià)灌胃給予健脾生血顆粒對(duì)大鼠胚胎-胎仔發(fā)毒性作用。方法:孕鼠隨機(jī)分為陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照和低、中、高劑量試驗(yàn)組,分別于孕期第6至第15天連續(xù)灌胃給藥。其中,低、中、高劑量試驗(yàn)組分別灌胃健脾生血顆粒浸膏1.16、3.48、10.44 g/kg/d,陽(yáng)性對(duì)照組灌胃維生素A醋酸酯0.08 g/kg/d,陰性對(duì)照組給予同樣體積的純凈水。記錄孕鼠的體重、身長(zhǎng)、攝食量及臨床表現(xiàn)。于妊娠第20天剖檢孕鼠,觀察胎盤(pán)和胎鼠外觀形態(tài),記錄黃體數(shù)、活胎數(shù)、死胎數(shù)、吸收胎、著床數(shù)及胎盤(pán)質(zhì)量,制作骨骼和內(nèi)臟標(biāo)本,以作進(jìn)一步檢查。結(jié)果:陽(yáng)性對(duì)照組出現(xiàn)了明顯的致畸作用,證明本試驗(yàn)系統(tǒng)結(jié)果可靠。試驗(yàn)組大鼠經(jīng)給藥后,均未見(jiàn)明顯異常臨床癥狀,各劑量組對(duì)胚胎的形成均無(wú)明顯影響,且黃體數(shù)、植入數(shù)、死胎、活胎以及吸收胎與陰性對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外,低、中劑量的浸膏對(duì)親代大鼠未見(jiàn)明顯一般毒性,但高劑量浸膏可致親代大鼠體重和攝食量下降,影響部分胎鼠的發(fā)育,主要表現(xiàn)為體重減輕,少數(shù)動(dòng)物關(guān)節(jié)畸形等。結(jié)論:在本試驗(yàn)條件下,健脾生血顆粒浸膏對(duì)大鼠胚胎-胎仔發(fā)育毒性的無(wú)不良反應(yīng)劑量為3.48 g/kg,相當(dāng)于成人臨床最大用量的42倍。

        健脾生血顆粒;大鼠;胚胎-胎仔發(fā)育毒性

        安全性研究是新藥開(kāi)發(fā)和老產(chǎn)品二次開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)內(nèi)容。由于歷史等原因,國(guó)內(nèi)較多上市產(chǎn)品并未嚴(yán)格按照GLP的規(guī)范對(duì)藥物安全性進(jìn)行全面研究,尤其是10年前批準(zhǔn)生產(chǎn)的藥品,即使進(jìn)行了相關(guān)安全性評(píng)價(jià)研究,當(dāng)時(shí)的評(píng)價(jià)基礎(chǔ)和研究技術(shù)也難以滿(mǎn)足當(dāng)今的技術(shù)要求[1]。隨著藥品進(jìn)入市場(chǎng)后大規(guī)模的應(yīng)用檢驗(yàn),上市產(chǎn)品的安全性問(wèn)題逐漸暴露[2]。因此,國(guó)家鼓勵(lì)藥企對(duì)已批準(zhǔn)生產(chǎn)的藥品進(jìn)行上市后再評(píng)價(jià)研究,尤其是安全性評(píng)價(jià)研究[3]。同時(shí),可靠的安全性再評(píng)價(jià)研究數(shù)據(jù)也能為上市產(chǎn)品提供學(xué)術(shù)推廣資料。讓醫(yī)療工作者對(duì)產(chǎn)品的認(rèn)識(shí)更加深入,更加放心地去選擇產(chǎn)品。

        健脾生血顆粒和健脾生血片是健民藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司獨(dú)家生產(chǎn)的中西復(fù)方制劑,二者僅有劑型差別,處方一致,主要成分為黨參、茯苓、黃芪、山藥、雞內(nèi)金、龜甲、大棗等中藥成分及硫酸亞鐵,功能主治為健脾和胃,養(yǎng)血安神,用于小兒脾胃虛弱及心脾兩虛型缺鐵性貧血,以及成人氣血兩虛型缺鐵性貧血。該產(chǎn)品以中醫(yī)經(jīng)典方“參苓白術(shù)散”“生脈飲”及“龍骨牡蠣湯”為基礎(chǔ)化裁而得,可顯著改善缺鐵性貧血患者脾胃運(yùn)化功能,并具益氣養(yǎng)血之功[4-5]。目前,該產(chǎn)品在臨床上主要用于妊娠期婦女和小兒缺鐵性貧血的治療與預(yù)防,以及改善體弱成人的氣虛、脾虛等癥狀。由于該產(chǎn)品在妊娠期婦女患者中應(yīng)用較為廣泛[6-8],所以為了更進(jìn)一步明確該產(chǎn)品的不良反應(yīng),保證孕婦和胎兒安全,本研究擬采用SPF級(jí)SD大鼠,探討健脾生血顆粒浸膏對(duì)胚胎-胎仔發(fā)育的毒性作用。

        1 材料與方法

        1.1 藥品 健脾生血顆粒浸膏,由健民藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司提供(批號(hào):140111-18),每克浸膏相當(dāng)于生藥材3.3 g,含七水硫酸亞鐵0.154 g。維生素A醋酸酯,購(gòu)于國(guó)藥控股星鯊制藥(廈門(mén))有限公司(批號(hào):10132001)。溶劑對(duì)照為飲用純凈水,由武漢神陽(yáng)飲品有限公司提供。

        1.2 動(dòng)物及分組 SD大鼠,SPF級(jí),購(gòu)于湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心,生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(鄂)2008-0005,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào):42000600002944。交配開(kāi)始前,所有動(dòng)物均適應(yīng)性飼養(yǎng)10 d,動(dòng)物年齡為10~11周齡,雌鼠體重200~270 g,雄鼠體重310~400 g。動(dòng)物飼養(yǎng)于屏障系統(tǒng)的IVC籠具中,動(dòng)物房實(shí)行壓差及溫濕度監(jiān)控和自動(dòng)控制。相對(duì)濕度控制范圍為39%至55%,溫度控制范圍為20.1 ℃至23.7 ℃。IVC籠內(nèi)每小時(shí)換氣次數(shù)40次以上,光照明10 h/暗14 h,循環(huán)交替至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。動(dòng)物飼料由武漢市萬(wàn)千佳興生物科技有限公司提供。動(dòng)物飲用水為經(jīng)高壓滅菌消毒的瓶裝水。將雌鼠、雄鼠1∶1合籠,次日檢查陰栓及陰道涂片,精子與陰栓同存者即被判斷為交配成立,當(dāng)日記為妊娠0日。將交配成功的孕鼠隨機(jī)分為5組,即溶劑對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組和低、中、高劑量試驗(yàn)組,每組20~22只。其中,溶劑對(duì)照組灌胃純凈水,陽(yáng)性對(duì)照組灌胃0.08 g/kg/d維生素A醋酸酯,低、中、高劑量試驗(yàn)組分別灌胃健脾生血顆粒浸膏1.16、3.48、10.44 g/kg/d。給藥體積均為10 mL/kg。每組均從妊娠第6天給藥至妊娠第15天,給藥1次/d。

        1.3 觀察指標(biāo)

        1.3.1 存活期檢查從動(dòng)物到達(dá)至動(dòng)物解剖當(dāng)日,每天進(jìn)行2次存活性觀察及籠邊觀察,觀察動(dòng)物存活情況、體征變化、行為等。體重稱(chēng)量從試驗(yàn)前即開(kāi)始,稱(chēng)重1次/3 d。孕鼠分別在妊娠第0、7、14、20天測(cè)定攝食量。

        1.3.2 終點(diǎn)檢查剖檢前,采用2%戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂(lè)死,所有動(dòng)物均對(duì)體表、天然孔道和腦外表面進(jìn)行檢查。孕鼠于妊娠第20天處死。觀察胎盤(pán),稱(chēng)取卵巢、子宮及所有附著的胎仔總重,計(jì)數(shù)黃體數(shù),活胎、死胎、吸收胎并計(jì)算著床數(shù)。胎仔剖檢前,以戊巴比妥鈉(5~20 mg/胎仔)腹腔注射安樂(lè)死。測(cè)量活胎胎仔體重、頂臀長(zhǎng),并通過(guò)內(nèi)外生殖器辨別胎仔性別。部分胎仔經(jīng)Bouin氏液固定[9],以作內(nèi)臟檢查,部分胎仔經(jīng)剝皮后用茜素紅染色[10],以作骨骼檢查。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有定量數(shù)據(jù)均采用均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差表示,應(yīng)用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)分析,計(jì)數(shù)資料采用秩和檢驗(yàn)。

        2 結(jié)果

        2.1 不良反應(yīng) 動(dòng)物死亡及臨床情況本實(shí)驗(yàn)中未觀察到因供試品引起的臨床癥狀或死亡。

        圖1 健脾生血顆粒浸膏對(duì)孕鼠攝食量的影響

        注:與同類(lèi)陰性對(duì)照組相比,**P<0.01。

        圖2 健脾生血顆粒浸膏對(duì)孕鼠體量的影響

        注:與同孕天數(shù)的陰性對(duì)照組相比,**P<0.01。

        2.2 孕鼠攝食量和體重健脾生血顆粒浸膏對(duì)孕鼠攝食量的影響 見(jiàn)圖1。由圖可見(jiàn),健脾生血顆粒浸膏低、中劑量組攝食量相對(duì)于陰性對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),高劑量組攝食量顯著低于陰性對(duì)照組,陽(yáng)性對(duì)照組給藥后孕7 d至孕20 d的攝食量顯著低于陰性對(duì)照組。

        大鼠隨孕天數(shù)增加的體重情況見(jiàn)圖2。由圖可見(jiàn),低、中劑量的健脾生血顆粒浸膏對(duì)孕鼠體重?zé)o明顯影響。健脾生血顆粒浸膏高劑量組給藥后于孕9 d至孕20 d孕鼠體重顯著低于陰性對(duì)照組。

        2.3 胚胎毒性 通過(guò)對(duì)孕鼠黃體數(shù)、植入數(shù)、著床率、死胎率等指標(biāo)觀察可見(jiàn),健脾生血顆粒浸膏各劑量組對(duì)胚胎形成無(wú)明顯影響,各組黃體數(shù)、植入數(shù)、死胎、活胎、吸收胎等差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。健脾生血顆粒浸膏對(duì)胎鼠外觀的影響見(jiàn)表1。由表可見(jiàn),健脾生血顆粒浸膏各給藥組胎鼠身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)及低、中劑量組胎鼠平均體重、身長(zhǎng)與陰性對(duì)照組相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),高劑量組胎鼠平均體重顯著低于陰性對(duì)照組。包括陰性對(duì)照組在內(nèi)各組可見(jiàn)1~3例皮下出血,健脾生血顆粒浸膏各給藥組胎鼠外觀均無(wú)畸形。

        通過(guò)對(duì)胎鼠骨骼的檢查發(fā)現(xiàn),高劑量的健脾生血顆粒浸膏可導(dǎo)致胎鼠骨骼發(fā)育延遲,主要表現(xiàn)為囟門(mén)閉合不全,枕骨、胸骨、四肢骨骨化不全、脊椎骨彎曲等。結(jié)果見(jiàn)表2。經(jīng)頭部徒手切片及其他新鮮內(nèi)臟檢查,評(píng)價(jià)健脾生血顆粒浸膏對(duì)胎鼠內(nèi)臟的影響,結(jié)果表明,各試驗(yàn)組均可見(jiàn)少數(shù)胎鼠內(nèi)臟異常。與陰性對(duì)照組相比,低、中、高劑量的健脾生血顆粒浸膏組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而陽(yáng)性對(duì)照組明顯影響胎鼠內(nèi)臟發(fā)育,主要表現(xiàn)為眼缺失、腎積水、腦室萎縮等。

        3 討論

        本研究為健脾生血顆粒(片)二次開(kāi)發(fā)研究?jī)?nèi)容的一部分,嚴(yán)格按照GLP操作規(guī)范對(duì)產(chǎn)品的生殖毒性進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示,陽(yáng)性對(duì)照品維生素A醋酸酯0.08 g/kg經(jīng)口灌胃給藥后出現(xiàn)明顯致畸作用,表現(xiàn)為骨化不全、骨缺失、內(nèi)臟積水、眼缺失等,說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)結(jié)果可靠。綜合評(píng)價(jià)各試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn),低、中劑量的健脾生血顆粒浸膏對(duì)親代大鼠和子代胎鼠均無(wú)明顯毒性;高劑量的健脾生血顆粒浸膏可導(dǎo)致親代大鼠體重和攝食量下降,影響部分胎鼠的發(fā)育,主要表現(xiàn)為體重減輕,少數(shù)動(dòng)物關(guān)節(jié)畸形等。因此,在本實(shí)驗(yàn)條件下,健脾生血顆粒浸膏未見(jiàn)毒性作用劑量為3.48 g/kg。以人體質(zhì)量60 kg計(jì)算,約相當(dāng)于人臨床最大用量的42倍、12歲以下兒童臨床最大用量的30倍。

        健脾生血顆粒是由13味中藥和西藥硫酸亞鐵組成的復(fù)方制劑,通過(guò)文獻(xiàn)查閱,中藥部分并無(wú)毒性藥材[11-15]。分析處方,硫酸亞鐵成分可能在高劑量組產(chǎn)生毒性作用中占主導(dǎo)角色。但健脾生血顆粒浸膏劑量在3.48 g/kg以下時(shí),對(duì)孕鼠親、子代均無(wú)不良反應(yīng)。提示患者按正常劑量服用本品時(shí),對(duì)妊娠期婦女和胎兒是安全的,尤其是對(duì)于鐵缺乏的缺鐵性貧血患者,吸收的鐵經(jīng)血紅蛋白利用后,循環(huán)鐵和結(jié)合鐵相對(duì)更少。但為保證安全,不應(yīng)額外再服用其他鐵制劑。本研究結(jié)果作為生殖毒性試驗(yàn)研究的一部分,結(jié)合生育力與早期胚胎發(fā)育毒性試驗(yàn)和圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)研究,將對(duì)產(chǎn)品在妊娠期婦女缺鐵性貧血治療中的安全性提供重要參考。同時(shí),本研究模式也可為其他品種的上市后再評(píng)價(jià)提供借鑒。

        表1 健脾生血顆粒浸膏對(duì)胎鼠外觀的影響(Mean±SD)

        注:與同類(lèi)陰性對(duì)照組相比,**P<0.01。

        表2 健脾生血顆粒浸膏對(duì)胎鼠骨骼的影響

        注:與同類(lèi)陰性對(duì)照組相比,**P<0.01。

        [1]艾青華,黎元元,謝雁鳴.參芪扶正注射液上市后安全性再評(píng)價(jià)研究[J].中國(guó)中藥雜志,2014,39(18):3633-3636.

        [2]葉祖光,張廣平.中藥安全性評(píng)價(jià)的發(fā)展、現(xiàn)狀及其對(duì)策[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2014,10(16):1-6.

        [3]王志飛,謝雁鳴.中藥上市后再評(píng)價(jià)發(fā)展概述[J].世界中醫(yī)藥,2014,9(9):1113-1116.

        [4]孫艷.健脾生血顆粒治療嬰幼兒缺鐵性貧血50例臨床觀察[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生,2015,53(3):127-129.

        [5]賴(lài)鵬程,沈朝霞.健脾生血顆粒治療小兒缺鐵性貧血臨床研究[J].兒科藥學(xué)雜志,2014,20(4):36-38.

        [6]白婧.妊娠合并貧血64例臨床診治分析[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2014,9(2):137-138.

        [7]何群雙.健脾生血顆粒治療孕婦缺鐵性貧血的療效觀察[J].湖北中醫(yī)雜志,2006,28(8):14-15.

        [8]黃逸玲.健脾生血顆粒治療妊娠合并貧血48例觀察[J].實(shí)用中醫(yī)藥雜志,2006,22(2):103.

        [9]Liang A,Li C,Liu T,et al.Study on embryo toxicity of Cinnabaris[J].China Journal of Chinese Materia Medica,2009,34(21):2794-2798.

        [10]Chen XD,Deng M,Zhou JS,et al.Bone Morphogenetic Protein-2 regulates in vitro osteogenic differentiation of mouse adipose derived stem cells[J].European Review for Medical and Pharmacological Sciences,2015,19(11):2048-2053.

        [11]成金樂(lè),鄧雯,黃萍,等.黨參破壁粉粒的抗?jié)冏饔门c急性毒性實(shí)驗(yàn)研究[J].西北藥學(xué)雜志,2011,26(2):120-122.

        [12]凌宗全.白術(shù)化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2013,32(35):105-106.

        [13]王東升,李錦宇,羅超應(yīng),等.白術(shù)提取液急性毒性試驗(yàn)[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2011,20(5):40-43.

        [14]李林燕,柳燕,曹小帥,等.南五味子軟膠囊對(duì)大鼠長(zhǎng)期毒性的實(shí)驗(yàn)研究[J].安徽醫(yī)藥,2012,16(5):586-588.

        [15]張永娜.五味子影響黃藥子肝腎毒性的試驗(yàn)觀察[J].泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2014,35(8):794-796.

        (2015-08-26收稿 責(zé)任編輯:王明)

        Effect of Invigorating Spleen-Generating Blood Granule on Embryo-fetal Development of Rats

        Zhao Gang1, Xia Ying2, Huang Zhijun1, Pei Xuejun1, Tang Huidan1

        (1AcademyofPediatricDrugs,JianminPharmaceuticalGroup,Wuhan430052,China; 2CenterofFoodandDrugSafetyEvaluationinHubei,Wuhan430073,China)

        Objective: To investigate the effects of Invigorating Spleen-Generating Blood Granule on embryo-fetal development of rats after intragastric administration. Methods: Pregnant rats were randomly divided into five groups: negative control, positive control, treatment groups with low, medium, or high dosage. The control groups were given oral administration with extract of the granule at 1.16、3.48、10.44 g/kg/d respectively for 10 days after six days' pregnancy. The positive control group were given Vitamin A acetate at 0.08 g/kg/d;the negative group were given pure water with same volume. Then the weight, body length, food consumption, and clinical features of pregnant rats were recorded. Pregnant rats were dissected at their 20 days' pregnancy. Then placentas, fetal rat appearances, skeleton, viscera, and numbers of corpus luteum, live fetus, dying fetus, absorbed fetus, implantation and other factors were recorded. Results: Obvious teratogenesis appeared in positive control rats, showed the reliability of the experiment. No abnormal clinical symptoms were observed in the rats of all treatment groups. There were no statistical differences of numbers of corpus luteum, live fetus, dying fetus, absorbed fetus, and implantation among the rats of all treatment groups and negative control. No general toxicity was found from rats with low or medium dosage. But high dosage of extract may result in a decline of weight, and food consumption. Furthermore, the development of fetal rats was also affected. Conclusion: The safe dosage of Invigorating Spleen-Generating Blood Granule on embryo-fetal development of rats was under 3.48 g/kg, 42 times of clinical dosage on human.

        Invigorating Spleen-Generating Blood Granule; Rat; Toxicity on embryo-fetal development

        武漢市科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):2013070204020053)

        趙剛(1983.10—),男,博士,高級(jí)工程師,從事兒童藥物新藥開(kāi)發(fā)與藥理毒理研究,E-mail:zhaogangsna@126.com

        R285.5

        A

        10.3969/j.issn.1673-7202.2015.10.034

        猜你喜歡
        胎鼠生血孕鼠
        胚胎干細(xì)胞對(duì)孕鼠缺血受損心肌的修復(fù)作用
        胚胎大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元原代培養(yǎng)及神經(jīng)元鑒定
        不同胎齡胎鼠脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞特性比較
        益髓生血顆粒對(duì)血紅蛋白H病患者抗氧化損傷和細(xì)胞因子水平的影響
        胰島胰島素信號(hào)通路障礙在AT1-AA陽(yáng)性孕鼠后代胰島素抵抗中作用*
        健脾生血顆粒對(duì)腎性貧血模型大鼠的治療作用
        中成藥(2015年10期)2015-01-13 09:18:54
        維甲酸誘導(dǎo)BALB/c近交系小鼠腭裂動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究
        補(bǔ)腎生血解毒方對(duì)再生障礙性貧血小鼠白細(xì)胞生成的影響
        小兒生血糖漿不良反應(yīng)調(diào)查
        孕鼠強(qiáng)迫游泳時(shí)絕望狀態(tài)與腦海馬區(qū)ERα表達(dá)水平的相關(guān)性研究
        男女视频在线观看一区| 久久国产精品老人性| 中文字幕一区二区三区精品在线 | 亚洲毛片αv无线播放一区| 中文字幕乱码人妻无码久久麻豆| 日本午夜理伦三级好看| 风骚人妻一区二区三区| 国产精品无码无片在线观看3d | 麻豆视频黄片在线免费观看| 成人无码一区二区三区| 又爽又黄又无遮挡的激情视频| 2022国内精品免费福利视频| 久久精品久久精品中文字幕| 午夜精品久久久久久久| 亚洲国产精品特色大片观看完整版| 美女视频很黄很a免费国产| av成人综合在线资源站| 午夜亚洲av日韩av无码大全| 好大好硬好爽免费视频| 日本最新一区二区三区免费看| 日本免费一二三区在线| 色吊丝中文字幕| 亚洲AV无码国产成人久久强迫| 丰满人妻一区二区三区精品高清| 蜜桃视频在线看一区二区三区| 午夜成人精品福利网站在线观看| 久久一日本道色综合久久大香| 青青青爽在线视频免费播放 | 亚洲综合有码中文字幕| 久久久久亚洲av无码专区首| 少妇特黄a一区二区三区| 国产剧情无码中文字幕在线观看不卡视频 | 国产亚洲精品久久久ai换| 天天草夜夜草| 日本大片一区二区三区| 国产精品久久久久免费观看| 无码少妇一级AV便在线观看| 蜜桃av噜噜一区二区三区免费 | 尤物蜜桃视频一区二区三区| 国产一区二区三区在线电影| 香蕉成人啪国产精品视频综合网|