何仁鋒,陳 喆,姜夢(mèng)瑩,周淑婷,應(yīng)奇才,馮尚國,王慧中
(杭州師范大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院,浙江省藥用植物種質(zhì)改良和質(zhì)量監(jiān)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江 杭州310036)
隨著國際合作與交流的擴(kuò)大及植物種質(zhì)資源的不斷收集,收藏的種質(zhì)數(shù)量迅猛增長,大量的種質(zhì)資源為種質(zhì)選育提供豐富遺傳基礎(chǔ)的同時(shí),在一定程度上導(dǎo)致了植物種質(zhì)的保存、評(píng)價(jià)、研究和利用困難.1984年,F(xiàn)rankel 等[1-2]提出了一條高效管理、利用種質(zhì)資源的有效途徑——構(gòu)建植物核心種質(zhì).研究證明[3-4],核心種質(zhì)的構(gòu)建是一種能夠快捷有效地從遺傳資源中提取所需特性資源材料的有效途徑,大大提高育種成效.因此,該研究正逐步成為國際遺傳資源研究的熱點(diǎn),引起了世界各國的廣泛重視.
蘭屬是蘭科(Orchidaceae)蘭族萼足蘭涯族(Subtrib.Cyrtopodiinae Benth)的一個(gè)屬,俗稱蘭花,在《金漳蘭譜》、《蘭易》、《蘭史》等古籍中均有記載,我國有硬葉蘭、虎頭蘭、墨蘭等29 種蘭屬植物和一些變種[5](表1),具有重要的經(jīng)濟(jì)、觀賞價(jià)值和廣泛的利用前景.而龐大的蘭屬種質(zhì)資源收集導(dǎo)致其保存成本增加,嚴(yán)重影響利用效果,也增加特異種質(zhì)材料篩選、挖掘的難度.此外,受到人為因素肆意采掘,許多名貴蘭屬物種生境遭到嚴(yán)重破壞,分布范圍急劇縮小,資源日益減少,處于瀕危滅絕的境地,加之盲目引種、過度選擇及對(duì)蘭屬種質(zhì)資源的開發(fā)利用缺乏技術(shù)支撐等原因,蘭屬植物種質(zhì)資源保護(hù)與研究現(xiàn)狀令人擔(dān)憂[6-7].核心種質(zhì)作為種質(zhì)資源群體研究和利用的切入點(diǎn),能有效提高整個(gè)種質(zhì)資源的管理和利用水平.目前,國內(nèi)外許多觀賞花卉如菊花[8]、牡丹[9]、梅花[10]及郁金香[11]等均開展了遺傳資源核心種質(zhì)構(gòu)建研究,而蘭屬植物遺傳資源核心種質(zhì)構(gòu)建的研究尚未見報(bào)道.因此,開展蘭屬植物核心種質(zhì)構(gòu)建研究是對(duì)名貴植物種質(zhì)資源保存研究的必然趨勢(shì),將為蘭屬植物種質(zhì)資源的有效管理及開發(fā)利用提供新的思路和方法.
本文借鑒農(nóng)作物成功的經(jīng)驗(yàn),圍繞核心種質(zhì)的基本概念闡述蘭屬核心種質(zhì)的特性、研究?jī)?nèi)容與步驟、應(yīng)用與管理及遺傳多樣性和實(shí)用性評(píng)價(jià)等方面內(nèi)容,以期為蘭屬植物核心種質(zhì)的構(gòu)建和種質(zhì)創(chuàng)新與利用提供理論參考,促進(jìn)蘭屬植物種質(zhì)資源研究理論和實(shí)踐共同發(fā)展.
據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),截止2011年,全世界非原生境保存的植物收集品已達(dá)740 萬份,我國長期庫保存39.2萬份,這給特異材料挖掘和利用等均帶來困難[12].核心種質(zhì)(Core collection)是指用最少的資源數(shù)量和最小的遺傳冗余最大限度地代表該物種最豐富的遺傳多樣性、結(jié)構(gòu)及整個(gè)群體的地理分布[1-2].同時(shí),其作為優(yōu)異基因發(fā)掘、新技術(shù)應(yīng)用和遺傳資源深入研究的優(yōu)先樣品集,提高了種質(zhì)資源的利用效率[13].植物核心種質(zhì)一般具備以下特征[14-15]:1)在遺傳組成和生態(tài)類型等方面具有良好的多樣性和代表性;2)最大限度地避免遺傳冗余,同時(shí)保證核心種質(zhì)的異質(zhì)性;3)具有實(shí)用性,有利于重要基因資源挖掘與利用.隨著育種目標(biāo)及實(shí)際需求的多元化,核心種質(zhì)的內(nèi)涵也正在進(jìn)一步深化.
根據(jù)蘭屬植物的特點(diǎn),認(rèn)為其核心種質(zhì)應(yīng)具備以下特征[16-19]:1)蘭屬核心種質(zhì)應(yīng)具有動(dòng)態(tài)的層次結(jié)構(gòu),保證初級(jí)核心種質(zhì)、核心種質(zhì)和核心應(yīng)用種質(zhì)等各層次結(jié)構(gòu)在內(nèi)容與信息上相互補(bǔ)充和動(dòng)態(tài)變換;2)蘭屬植物地理分布不均勻,部分物種孤點(diǎn)分布,核心種質(zhì)具有區(qū)域遺傳結(jié)構(gòu)差異的特性;3)雜交和變異現(xiàn)象普遍存在于蘭屬植物,應(yīng)包含當(dāng)前主要變異類型:長/短苞、花序分枝等;4)包含生產(chǎn)實(shí)踐所需要的優(yōu)異農(nóng)藝性狀或基因,同時(shí)囊括各地野生蘭屬物種道地性:如獨(dú)具特色的粵北銀邊、金邊春蘭等.
建立核心種質(zhì)的數(shù)據(jù)主要包括3 種類型:基本數(shù)據(jù)、性狀評(píng)價(jià)鑒定數(shù)據(jù)和特征數(shù)據(jù).基本數(shù)據(jù)是核心種質(zhì)構(gòu)建中應(yīng)用最廣泛的一類數(shù)據(jù),主要包括種質(zhì)選育地、選育地的生態(tài)地理狀況、育種體系、分類體系等;性狀評(píng)價(jià)鑒定數(shù)據(jù)包括質(zhì)量、產(chǎn)量及抗性等農(nóng)藝性狀;特征數(shù)據(jù)是形態(tài)、生化、分子標(biāo)記等表特征的一類數(shù)據(jù).在蘭屬研究中,以上數(shù)據(jù)的獲取主要從中國植物標(biāo)本館的標(biāo)本記錄,國家重要植物博物館的數(shù)字化標(biāo)本信息分享平臺(tái),中國蘭科植物數(shù)據(jù)庫等.其次,參考全國各地方已公開出版的地方植物志及描述地方特色的蘭屬植物文獻(xiàn)資料,全國和省級(jí)各類蘭屬植物及蘭科專題論文及描述中國蘭屬植物內(nèi)在特征與遺傳分析的科學(xué)文獻(xiàn)[19-20].
2.1.1 蘭屬基本數(shù)據(jù) 全屬約48 種,主要分布于亞熱帶和亞洲熱帶以及澳洲北部,在我國以西南分布最多,其次是東南地區(qū),臺(tái)灣也有分布[21].如春蘭、蕙蘭較耐寒,分布較靠北;硬葉蘭、紋瓣蘭、多花蘭等則多在海南,我國各蘭屬植物種質(zhì)分類及分布詳見表1.蘭屬植物主要通過引種馴化、雜交、誘變、基因工程等方法育種,其中雜交育種是當(dāng)今蘭花新品種選育的主要手段,其雜交屬和集體雜種在《Sander′sList of New Orchid Hybrids》(http://www.Rhs.Org.uk/plants/registerpages/orchid_parentage.Asp.)均有描述.
2.1.2 蘭屬特征數(shù)據(jù) 主要包括葉、花、萼片、唇瓣等多個(gè)形態(tài)學(xué)指標(biāo)的描述[22]及部分生理生化指標(biāo)[23].隨著RAPD、SSR、SRAP 等DNA 分子標(biāo)記技術(shù)研究的深入,為蘭屬提供了豐富的特征數(shù)據(jù)信息.如利用SRAP 和SSR 分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)蘭屬植物進(jìn)行遺傳多樣性研究[24-25];李小白[26]等完成建蘭花轉(zhuǎn)錄組高通量測(cè)序研究.蘭屬植物遺傳多樣性等方面的研究均為構(gòu)建高質(zhì)量核心種質(zhì)提供了重要特征數(shù)據(jù).其中有學(xué)者認(rèn)為SSR 標(biāo)記技術(shù)具有多態(tài)性豐富,穩(wěn)定性好,以孟德爾方式遺傳,呈共顯性遺傳,染色體特異性及操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn).如卜海東[27]等采用SSR 分子標(biāo)記手段,對(duì)201 份砂梨、白梨、秋子梨和西洋梨資源進(jìn)行分子標(biāo)記核心種質(zhì)構(gòu)建研究,最終確定36 份核心種質(zhì). 由此可見,在蘭屬植物核心種質(zhì)構(gòu)建過程中利用SSR 分子標(biāo)記技術(shù)將可能成為一種最佳的選擇[14].同時(shí),有助于在短時(shí)間內(nèi)獲得群體的結(jié)構(gòu)和部分分類信息,推動(dòng)和優(yōu)化構(gòu)建核心種質(zhì)庫的抽樣策略.
2.1.3 蘭屬性狀評(píng)價(jià)鑒定數(shù)據(jù) 形態(tài)農(nóng)藝性狀作為檢測(cè)其它類型數(shù)據(jù)真實(shí)性的重要參照之一,能直觀地反映材料的環(huán)境適應(yīng)性和育種潛力,如李保印[9]構(gòu)建中原牡丹的初級(jí)核心種質(zhì)采用了牡丹大量形態(tài)農(nóng)藝表型性狀.目前,蘭屬種質(zhì)性狀評(píng)價(jià)鑒定數(shù)據(jù)主要包括株幅、萼片長/寬、花徑、花序長、葉片數(shù)、葉長/寬和苞片長等植物數(shù)量性狀和香味、花朵外觀、花主色、和斑色紋等質(zhì)量性狀,但數(shù)據(jù)不夠全面,有關(guān)抗逆性材料數(shù)據(jù)缺乏,科學(xué)性有待提高[28-29].為了更有效對(duì)核心種質(zhì)構(gòu)建發(fā)揮作用,在觀賞植物核心種質(zhì)構(gòu)建中研究者多采用觀賞形態(tài)、農(nóng)藝性狀表型數(shù)據(jù)和分子標(biāo)記信息數(shù)據(jù)相結(jié)合的方法[30].借鑒國內(nèi)外構(gòu)建核心種質(zhì)的成功經(jīng)驗(yàn),我們建議在構(gòu)建蘭屬植物遺傳資源核心種質(zhì)中嘗試整合形態(tài)、農(nóng)藝等性狀數(shù)據(jù)結(jié)合SSR等分子標(biāo)記數(shù)據(jù),即開展蘭屬EST-SSR 引物開發(fā),有效利用EST-SSR 等分子標(biāo)記信息和形態(tài)、農(nóng)藝性狀數(shù)據(jù),系統(tǒng)評(píng)價(jià)蘭屬個(gè)體間的遺傳差異,提高核心種質(zhì)遺傳代表性.
表1 我國主要的蘭屬植物及變種一覽表Tab. 1 A list of the main species and varieties of Cymbidium plants in China
續(xù)表
2.2.1 蘭屬種質(zhì)資源收集數(shù)據(jù)分組
數(shù)據(jù)分組是植物核心種質(zhì)構(gòu)建的首要環(huán)節(jié)之一,種質(zhì)資源分組是根據(jù)現(xiàn)有的數(shù)據(jù),把具有相似特點(diǎn)的種質(zhì)材料劃分為一組,常見的分組標(biāo)準(zhǔn)有分類體系、地理起源、農(nóng)業(yè)生態(tài)分布、育種體系、遺傳標(biāo)記、農(nóng)藝性狀及多數(shù)據(jù)結(jié)合等.蘭屬種質(zhì)資源分布不均勻,可根據(jù)其特點(diǎn)及研究現(xiàn)狀進(jìn)行分組,依據(jù)蘭屬植物生長環(huán)境的母巖和土壤pH 值劃分:春蘭、寒蘭等是典型的喜酸種類,而多花蘭、蕙蘭等對(duì)土壤要求不嚴(yán)格[31];根據(jù)形態(tài)特征將品種分為兜瓣型、竹葉瓣型、奇瓣型和多花型等[32];根據(jù)種的行政區(qū)域分布劃為云南、貴州、廣西等17 個(gè)分布型[20]. 因此,在蘭屬植物研究中,首先統(tǒng)計(jì)蘭屬種質(zhì)資源的特征和所收集的數(shù)據(jù)差異,其次,利用蘭屬種質(zhì)的相似特點(diǎn):種質(zhì)地理來源、農(nóng)藝及觀賞性狀、生境、抗性等多數(shù)據(jù)組合進(jìn)行多層次逐步分組,通過材料間的遺傳距離進(jìn)行逐級(jí)聚類[33],使各類分組相互補(bǔ)充和驗(yàn)證,最后進(jìn)行比較優(yōu)化,確定最佳的分組方案.
2.2.2 蘭屬植物種質(zhì)資源組內(nèi)取樣及規(guī)模確定
確定合理的取樣方法及取樣比例是植物核心種質(zhì)構(gòu)建的關(guān)鍵步驟,取樣方法主要有完全隨機(jī)和系統(tǒng)取樣.系統(tǒng)取樣法不僅考慮了材料的遺傳結(jié)構(gòu),給不同材料以不同權(quán)重,還可以有效防止生物遺傳類型漏掉,保證核心種質(zhì)的遺傳代表性,因此實(shí)際研究中多采用該方式.組內(nèi)取樣比例應(yīng)根據(jù)各組的遺傳特點(diǎn)采取合適的取樣策略來確定,李自超[34]等在云南地方稻種資源核心種質(zhì)取樣方案研究中表明,以平方根或?qū)?shù)法確定組內(nèi)取樣比例,采用聚類法在組內(nèi)進(jìn)行取樣是最佳取樣方案.由于物種遺傳結(jié)構(gòu)、遺傳多樣性狀況和樣品收集程度等情況的差異,至今前人的研究尚未提供一個(gè)合理的取樣比例和合適的核心種質(zhì)規(guī)模[35].因此,在研究蘭屬核心種質(zhì)構(gòu)建中,建議在考慮現(xiàn)有蘭屬種質(zhì)資源的生物多樣性遺傳結(jié)構(gòu)層次及外因影響基礎(chǔ)上,按地理分布、分類體系、育種體系或多體系組合分組,分層次,依次聚類系統(tǒng)取樣,確立適當(dāng)?shù)娜右?guī)模,比較得出最佳的取樣策略[30].對(duì)于建蘭、墨蘭、大花蕙蘭等某些曾經(jīng)大面積推廣過的品種(品系)、骨干親本以及有較大研究利用價(jià)值的蘭屬種質(zhì)可以適當(dāng)優(yōu)先入選核心樣品,同時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加樣本入選量.蘭屬種質(zhì)群體相對(duì)較小,所構(gòu)建的核心種質(zhì)份數(shù)也應(yīng)相對(duì)較少,而具體的取樣比例的大小還需要進(jìn)一步研究和探討,此外,為滿足不同層次和不同研究方向的研究者對(duì)其核心種質(zhì)的需求,有待整合構(gòu)建不同規(guī)模、不同研究方向的蘭屬植物微型核心種質(zhì)庫:如切合蘭屬植物育種與市場(chǎng)需求的微型核心種質(zhì)庫,發(fā)掘包括控制花期、花色及抗凍性強(qiáng)等方面新的有利基因[36-38].
蘭屬植物遺傳資源核心種質(zhì)構(gòu)建后,要建立和完善繁種、供種及管理體制并及時(shí)補(bǔ)充和完善核心種質(zhì)有關(guān)數(shù)據(jù),使其結(jié)構(gòu)和樣本數(shù)目進(jìn)一步更新、補(bǔ)充或篩減[39],以保證核心種質(zhì)高效的利用率.育種工作者則可以根據(jù)蘭屬植物改良株型、增加花香和提高抗逆性的育種與遺傳研究目標(biāo),從核心種質(zhì)庫中有目的、有方向、有重點(diǎn)地提取材料,加快新品種的研究. 此外,葉姿葉型、花型和花色等也是重要的育種目標(biāo). 因此,有必要加強(qiáng)含控制某些特殊性狀基因的遺傳材料的選育[37]及特定抗性基因挖掘與克?。?8]等方面的研究,以此強(qiáng)化核心種質(zhì)的完整性和實(shí)用性.
從核心種質(zhì)的概念出發(fā),其要求以最少的資源數(shù)量和最小的遺傳冗余來最大限度地代表物種遺傳資源的多樣性,并滿足當(dāng)前與未來的生產(chǎn)實(shí)踐需求.因此,需對(duì)核心種質(zhì)進(jìn)行遺傳多樣性和實(shí)用性檢測(cè)與評(píng)價(jià).檢驗(yàn)評(píng)價(jià)的方式主要有核心種質(zhì)遺傳多樣性的符合性檢驗(yàn)和核心種質(zhì)實(shí)用性檢驗(yàn)[13].
由于蘭屬材料原始數(shù)據(jù)形式的不同,其核心種質(zhì)多樣性的符合性檢驗(yàn)評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)指標(biāo)可分為離散性數(shù)據(jù)和連續(xù)性數(shù)據(jù).蘭屬遺傳資源連續(xù)性數(shù)據(jù)主要包括株幅、根長等各種數(shù)量性狀的方差、變異系數(shù)、變異幅度、平均值及標(biāo)準(zhǔn)差等,具體可參考段艷皊[28]等的方法進(jìn)行遺傳多樣性評(píng)價(jià).評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)參考Hu[33]等人的研究,即少于20%的性狀均值及變異幅度與原種質(zhì)資源的均值與變異幅度存在顯著性差異,且核心種質(zhì)各性狀的變異幅度不低于原群體80%,則認(rèn)為該核心種質(zhì)代表了原種質(zhì)資源的遺傳變異及結(jié)構(gòu).前人多將均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)等連續(xù)性數(shù)據(jù)參數(shù)作為植物核心種質(zhì)的檢驗(yàn)指標(biāo)[40].近年來,質(zhì)量性狀和SSR分子標(biāo)記數(shù)據(jù)等離散性數(shù)據(jù)也被廣泛應(yīng)用于核心種質(zhì)遺傳多樣性的檢測(cè),主要指標(biāo)有多態(tài)性位點(diǎn)數(shù)、多態(tài)性百分率、Nei′s 基因多樣性指數(shù),具體可參考黃焱等[41]的方法.總之,蘭屬核心種質(zhì)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是可變的,應(yīng)根據(jù)新狀況而嘗試采用靈活多變的遺傳多樣性評(píng)價(jià)方法.
實(shí)用性的檢測(cè)主要是對(duì)蘭屬核心種質(zhì)中是否保留已知農(nóng)藝性狀及其他性狀(基因)進(jìn)行檢驗(yàn),評(píng)價(jià)其能否在實(shí)際應(yīng)用中為特定性狀基因材料的挖掘和育種研究提供服務(wù).對(duì)此,進(jìn)行蘭屬植物遺傳資源核心種質(zhì)實(shí)用性評(píng)價(jià)時(shí)有必要邀請(qǐng)具有一定蘭屬植物育種經(jīng)驗(yàn)的專家參與評(píng)價(jià).
開展植物種質(zhì)資源遺傳多樣性分布特點(diǎn)及規(guī)律研究,對(duì)充分發(fā)掘現(xiàn)有種質(zhì),理選配親本和拓寬育成品種遺傳基礎(chǔ)等具有重要意義.首先,優(yōu)先利用核心種質(zhì)可以為研究者探究種質(zhì)資源的遺傳特性提供捷徑,如欒維江等[42]利用SSR 標(biāo)記分析東北春大豆中的核心種質(zhì)的遺傳多樣性,總結(jié)出了東北春大豆種質(zhì)資源的遺傳多樣性分布特點(diǎn),為有目的選擇雜交親本培育新品種提供了依據(jù).鑒于東北春大豆的成功經(jīng)驗(yàn),可構(gòu)建蘭屬植物遺傳資源核心種質(zhì)來了解和評(píng)價(jià)蘭屬植物種質(zhì)資源群體遺傳特性.
其次,核心種質(zhì)的建立為加強(qiáng)和實(shí)現(xiàn)種質(zhì)資源的有效管理和開發(fā)利用提供了便利,在作物的生產(chǎn)和育種方面也發(fā)揮了巨大作用,特別在發(fā)掘特殊優(yōu)異基因資源方面.近年來,國內(nèi)、外利用核心種質(zhì)對(duì)小麥高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)[43]、西瓜枯萎病抗性[44]及優(yōu)質(zhì)稻種的抗稻瘟病、白葉枯病[45]等優(yōu)良性狀進(jìn)行鑒定,已有成功的報(bào)道.由上述作物的成功經(jīng)驗(yàn)可知,核心種質(zhì)的應(yīng)用對(duì)于種間親緣關(guān)系的鑒定、特定抗性基因材料的挖掘和具有特殊性狀的遺傳材料的選育等方面具有效果,因此,隨著蘭屬植物核心種質(zhì)庫的不斷完善,蘭屬植物核心種質(zhì)也將在蘭屬植物遺傳和育種實(shí)踐中發(fā)揮作用,融合特異的高產(chǎn)源、優(yōu)質(zhì)源和抗源.遺傳資源研究者可以通過全面、詳細(xì)的考查、分析和鑒定核心種質(zhì),快速從核心種質(zhì)中篩選得到所需要的資源或基因,減少在育種過程中選配親本的盲目性,減少和降低勞動(dòng)投入與成本,擺脫蘭屬植物優(yōu)良親本缺乏和選育品種遺傳背景狹窄的局面[13].
蘭屬種質(zhì)資源數(shù)量大、遺傳背景模糊、考種程序繁雜以及生境地域的復(fù)雜性,這些問題都增加了蘭屬植物種質(zhì)資源研究的難度.目前,蘭屬植物種質(zhì)資源遺傳多樣性的研究還不夠全面和深入,蘭屬植物遺傳資源核心種質(zhì)的研究尚處于探討研究階段,理論及方法還不完善,其中取樣策略和檢驗(yàn)體系是建立高質(zhì)量蘭屬核心種質(zhì)中關(guān)鍵問題和技術(shù)難點(diǎn),有必要對(duì)其進(jìn)一步探究.
可以從以下幾方面展開:首先,將蘭屬植物種質(zhì)資源普查作為一項(xiàng)長期工作,充實(shí)和完善基本數(shù)據(jù);其次,加強(qiáng)對(duì)重點(diǎn)材料的重點(diǎn)保護(hù)與探索,特別是優(yōu)異種質(zhì)和基因資源的收集.加強(qiáng)國際合作,積極引進(jìn)新育成的特種蘭屬種質(zhì)資源,彌補(bǔ)國內(nèi)某些緊缺和空白,適當(dāng)繁殖以供利用.同時(shí)借鑒成功構(gòu)建核心種質(zhì)物種的研究經(jīng)驗(yàn),有重點(diǎn)地進(jìn)行花色、花香等重要性狀[36-37]挖掘與相關(guān)基因定位與克隆工作,根據(jù)育種方向深入研究其親緣關(guān)系與遺傳多樣性,尤其提高SSR、SNP 等分子標(biāo)記的開發(fā).然后,積極開展地方特種蘭屬植物的特殊基因轉(zhuǎn)育研究.最后,加強(qiáng)蘭屬種質(zhì)資源的檢測(cè)與評(píng)價(jià)工作,開發(fā)創(chuàng)新性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù),尤其要加強(qiáng)蘭屬的優(yōu)質(zhì)源、抗源以及分子水平鑒定評(píng)價(jià)工作,實(shí)現(xiàn)核心種質(zhì)動(dòng)態(tài)性管理,健全資源開發(fā)、利用和共享機(jī)制.
種質(zhì)遺傳資源的收集和保存是培育新品種的基礎(chǔ),因此,蘭屬植物遺傳資源核心種質(zhì)的保存也是當(dāng)前研究的重點(diǎn).目前,植物保存主要集中在田間基因圃、原位實(shí)地保存、DNA 保存、花粉貯藏、離體保存基因、超低溫保存等[46].蘭屬植物應(yīng)根據(jù)自身的特點(diǎn),在深入研究其遺傳物質(zhì)與特性基礎(chǔ)上,靈活采用超低溫保存中的干燥法、快凍法和玻璃化法等保存蘭屬種質(zhì)資源[47],并建立相應(yīng)的資源圃.同時(shí)參考國蘭鑒賞標(biāo)準(zhǔn)[48]及《植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測(cè)試指南·蘭屬》[49]的規(guī)定,規(guī)范記錄描述種質(zhì)數(shù)據(jù),實(shí)現(xiàn)最大限度的保存蘭屬種質(zhì)資源遺傳完整性,為核心種質(zhì)的篩選提供重要的參考價(jià)值.
目前,針對(duì)蘭屬植物遺傳資源核心種質(zhì)構(gòu)建的研究雖然尚未見報(bào)道,但其應(yīng)用前景喜人.同時(shí),隨著國家對(duì)蘭屬植物種質(zhì)資源的保護(hù)和保存工作的重視以及蘭屬植物種質(zhì)資源研究的深入,核心種質(zhì)將解決我國蘭屬植物育種種質(zhì)基礎(chǔ)狹窄的一個(gè)有效途徑.有關(guān)的研究工作必將發(fā)現(xiàn)新的特有基因和起源、演化、分類方面的新規(guī)律,為蘭屬植物種質(zhì)資源保護(hù)、優(yōu)異基因創(chuàng)新和優(yōu)良品種選育等提供科學(xué)依據(jù),同時(shí)提高其育種效率和種質(zhì)資源利用率,提升共享服務(wù)水平.
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