栗秀芳

(云南省昆明市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 650011)

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·臨床探討·

2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)結(jié)果可比性分析

栗秀芳

(云南省昆明市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 650011)

目的 對(duì)昆明市第一人民醫(yī)院2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀部分常規(guī)化學(xué)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行可比性分析。方法 參照WS/T 407-2012《同一醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢測(cè)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南》建立可比性驗(yàn)證方案，用適合濃度的患者新鮮血清對(duì)2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀Beckman Olympus AU-5421、Siemens Dimension RXL上檢測(cè)常規(guī)化血糖(GLU)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、清蛋白(ALB)等7個(gè)項(xiàng)目，計(jì)算其極差值，依據(jù)臨界差值可接受標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果一致性分析。結(jié)果 2臺(tái)全自動(dòng)生化分析上述7個(gè)項(xiàng)目的兩種濃度(正常和異常)合并CV范圍分別為2.05%～2.35%、2.20%～2.10%、2.07%～1.45%、2.68%～1.61%、3.57%～2.19%、2.47%～2.03%、1.11%～1.02%，選取的比對(duì)樣本濃度值分別為GLU 5.90、17.90 mmol/L，BUN 17.10、21.30 mmol/L，Cr 157、602 μmol/L，UA 330、625 mmol/L，ALT 75、165 U/L，AST 89、250 U/L，ALB 40.5、52.3 g/L。重復(fù)檢測(cè)比對(duì)樣本后，得出2臺(tái)全自動(dòng)生化儀上述7個(gè)項(xiàng)目的兩種濃度極差范圍分別為10.52%～12.78%、1.77%～2.27%、3.96%～2.67%、9.73%～5.72%、23.08%～11.85%、24.63%～1.98%、5.78%～5.61%。其中BUN、Cr、ALB 3個(gè)項(xiàng)目(兩種濃度)、UA和ALT 2個(gè)項(xiàng)目(異常濃度)在2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀的檢測(cè)結(jié)果極差均小于臨界差值，驗(yàn)證通過。GLU、AST(兩種濃度)、UA和ALT(正常濃度)在2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀上的檢測(cè)結(jié)果極差均有大于臨界差值的情況，驗(yàn)證未通過。結(jié)論 2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀對(duì)BUN、Cr、ALB 3個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果具有可比性，對(duì) GLU、UA、ALT、AST結(jié)果無可比性，對(duì)可比性驗(yàn)證不通過的項(xiàng)目，應(yīng)采取相應(yīng)的針對(duì)措施。

全自動(dòng)生化分析儀；極差；可比性驗(yàn)證

隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，臨床檢驗(yàn)技術(shù)及質(zhì)量在不斷提高，全自動(dòng)生化分析儀以其操作簡(jiǎn)便、快捷，結(jié)果準(zhǔn)確、精密度好等優(yōu)點(diǎn)得以廣泛應(yīng)用，但同一醫(yī)療機(jī)構(gòu)或同一臨床實(shí)驗(yàn)室常常擁有不同品牌的多臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀較為普遍，不同廠家或相同廠家不同品牌的全自動(dòng)生化分析儀因其分析原理、制作技術(shù)工藝不同，對(duì)同一標(biāo)本同一項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果間存在一定系統(tǒng)誤差，以致對(duì)臨床的診療工作造成誤解帶來困惑，不同檢測(cè)儀器檢驗(yàn)結(jié)果的可比性和一致性是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)ISO 15189 重要的要求[1]。目前，針對(duì)同一醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)部同一項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和不同儀器間結(jié)果間的一致性，不同醫(yī)院有不同做法，有參考CLSI的EP9-A進(jìn)行比對(duì)分析，也有參考EP15-A2進(jìn)行比對(duì)分析。相比較，這些方案比對(duì)過程較復(fù)雜，所需樣本量較大，導(dǎo)致成本較高，不易常態(tài)化，以致部分醫(yī)院并未常態(tài)化評(píng)估同一項(xiàng)目在不同檢測(cè)儀器上檢測(cè)結(jié)果的一致性。2012年12月國家衛(wèi)生部發(fā)布了《醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢測(cè)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南》(WS/T 407-2012)，該指南簡(jiǎn)化了同一醫(yī)院同一項(xiàng)目在不同檢測(cè)儀器上檢測(cè)結(jié)果的比對(duì)程序，有利于常態(tài)化實(shí)施該項(xiàng)比對(duì)工作[2]。據(jù)此，作者依照《醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢測(cè)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南》，對(duì)本院2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀部分常規(guī)化血糖(GLU)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、清蛋白(ALB)等7項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果一致性進(jìn)行驗(yàn)證，為臨床工作提供一致性結(jié)果提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器 Beckman Olympus AU-5421(以下簡(jiǎn)稱AU-5421)，Siemens Dimension RXL(以下簡(jiǎn)稱Dimension)。

1.2 試劑 日本和光純藥株式會(huì)社生產(chǎn)WAKO試劑及配套校準(zhǔn)品，校準(zhǔn)品批號(hào)：WAKO復(fù)合校準(zhǔn)品(GLU、BUN、UA)AF492，(ALT、AST)AR380，Cr TN414，ALB TN401；Siemens Demision RXL配套試劑及校準(zhǔn)品，復(fù)合校準(zhǔn)品批號(hào)(GLU、BUN、Cr、UA)3DD026，ALT 3JD267，AST 3EJ037，ALB 3BD016；2臺(tái)儀器均使用相同批號(hào)BIO-RAD質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制。

1.3 比對(duì)樣本來源 本院門診及住院患者新鮮血(排除溶血、黃疸、脂血)樣本作為本次比對(duì)樣本。

1.4 方法

1.4.1 確定檢測(cè)儀器檢測(cè)結(jié)果的不精密度 統(tǒng)計(jì)2014年1～6月2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀室內(nèi)質(zhì)控中、高值質(zhì)控品每一檢測(cè)項(xiàng)目的累積均值和不精密度(CV)，計(jì)算累積CV最大值和最小值之比值，若比值小于2則進(jìn)入本驗(yàn)證方案，并計(jì)算各質(zhì)控物水平的合并CV=[(CV12+CV22+CV32+CV42)/4]1/2，若比值大于2則不進(jìn)入本驗(yàn)證方案。

1.4.2 各項(xiàng)目質(zhì)控品在不同檢測(cè)儀器上檢測(cè)均值和累積CV、總均值、合并CV采用Excel2010完成。

1.4.3 確定比對(duì)樣本各項(xiàng)目檢測(cè)濃度值、濃度范圍及樣本數(shù) 計(jì)算各項(xiàng)目質(zhì)控品濃度水平檢測(cè)結(jié)果總均值，比對(duì)樣本的濃度選取在總均值的±20%以內(nèi)。各項(xiàng)目濃度范圍分別是：GLU 5.18～7.78、15.61～23.42 mmol/L；BUN 11.35～17.02、19.27～28.90 mmol/L；Cr 140～175、472～708 μmol/L；UA 271～407、467～701 μmol/L；ALT 74～111、164～247 U/L；AST 81～121、203～304 U/L；ALB 28.0～42.0、34.8～52.2 g/L。各項(xiàng)目分別選取2個(gè)檢測(cè)樣本，其濃度值分別是：樣本1為GLU 5.90 mmol/L；樣本2為GLU 17.90 mmol/L；樣本3為BUN 17.10 mmol/L；樣本4為BUN 21.30 mmol/L；樣本5為Cr 157 μmol/L；樣本6為Cr 602 μmol/L；樣本7為UA 330 μmol/L；樣本8為UA 625 μmol/L；樣本9為ALT 75 U/L；樣本10為ALT 165 U/L；樣本11為AST 89 U/L；樣本12為AST 250 U/L；樣本13為ALB 40.5 g/L；樣本14為ALB 52.3 g/L。

1.4.4 確定重復(fù)檢測(cè)次數(shù) 根據(jù)合并CV及設(shè)定的臨界差值，查臨界值表，確定重復(fù)測(cè)定次數(shù)。

1.4.5 確定比對(duì)結(jié)果的可接受標(biāo)準(zhǔn) 確認(rèn)2臺(tái)全自動(dòng)分析儀的不CV均符合要求的前提下，按《醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢測(cè)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南》中提出的優(yōu)選順序確定各檢測(cè)項(xiàng)目比對(duì)結(jié)果的可接受標(biāo)準(zhǔn)，并設(shè)定臨界差值。依據(jù)表1的不精密度現(xiàn)狀，依據(jù)“室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)設(shè)定的分析質(zhì)量要求”為可接受標(biāo)準(zhǔn),參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案′88(CLIA′88)能力驗(yàn)證(室間質(zhì)量評(píng)價(jià))分析質(zhì)量要求，確定以1/2 CLIA′88的允許誤差范圍為可接受標(biāo)準(zhǔn)，判斷各項(xiàng)目的臨界差值分別為5.0%、4.5%、7.5%、8.5%、10.0%、10.0%、5.0%[3]。

1.4.6 樣本檢測(cè)及其一致性判定 在確認(rèn)全自動(dòng)分析儀狀態(tài)良好的情況下，用比對(duì)樣本在各檢測(cè)儀上重復(fù)檢測(cè)各項(xiàng)目，計(jì)算極差(%)。最后將極差(%)和臨界差值進(jìn)行比較，如果極差(%)小于或等于臨界差值，則判定2臺(tái)檢測(cè)儀比對(duì)物濃度水平的檢測(cè)結(jié)果具有一致性，否則各檢測(cè)儀器間檢測(cè)結(jié)果不具可比性。

2 結(jié) 果

2.1 比對(duì)檢測(cè)儀器的不精密度 2臺(tái)全自動(dòng)分析儀中GLU、BUN、Cr、UA、ALT、AST、ALB各項(xiàng)目?jī)煞N質(zhì)控物濃度的各自均值和累積CV、總均值、合并CV見表1。結(jié)果顯示各項(xiàng)目同一質(zhì)控物濃度的累積CV最大值和最小值比值均小于2。

2.2 2臺(tái)全自動(dòng)分析儀各濃度重復(fù)檢測(cè)次數(shù) 依據(jù)2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀的不精密度及其臨界差值，查表確定各檢測(cè)儀器的重復(fù)檢測(cè)次數(shù)。對(duì)按要求選擇的比對(duì)樣本進(jìn)行相應(yīng)次數(shù)的重復(fù)檢測(cè)，每臺(tái)分析儀中各項(xiàng)目所得均值及它們的比對(duì)結(jié)果見表2。

表1 2臺(tái)全自動(dòng)分析儀質(zhì)控物測(cè)定均值及其不精密度

表2 2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀的比對(duì)結(jié)果

3 討 論

《醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢驗(yàn)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南》(即極差檢驗(yàn)可比性驗(yàn)證方案)與EP9-A或EP15方案相比，實(shí)用性較大。EP9-A方案要求每臺(tái)檢測(cè)儀每個(gè)項(xiàng)目在至少5個(gè)工作日內(nèi)最少要完成40份患者樣本分析，且需雙份測(cè)定。EP15-A2方案要求每臺(tái)檢測(cè)儀每個(gè)項(xiàng)目在3～4個(gè)工作日內(nèi)最少要完成20份患者樣本分析。依據(jù)極差檢驗(yàn)可比性驗(yàn)證方案所需樣本數(shù)量和檢測(cè)次數(shù)均較少。本研究中每臺(tái)分析儀每個(gè)項(xiàng)目只需2份樣本，每個(gè)樣本最多3次重復(fù)，在1個(gè)工作日(2 h內(nèi))立即完成。由此比較出極差檢驗(yàn)可比性驗(yàn)證方案具有需要標(biāo)本數(shù)量較少，從而統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)也較少，統(tǒng)計(jì)過程簡(jiǎn)易、結(jié)果直觀，在短時(shí)間內(nèi)就能完成比對(duì)試驗(yàn)等優(yōu)點(diǎn)，特別是對(duì)于試劑成本較高的項(xiàng)目，可以大大降低比對(duì)成本[4-5]。但是，此方案必須滿足一定條件：各檢測(cè)儀器要進(jìn)行了長(zhǎng)期(至少6個(gè)月)室內(nèi)質(zhì)量控制，并且同一檢測(cè)項(xiàng)目同一控制物水平累積CV間的最大值和最小值比值必須小于2。否則，應(yīng)考慮使用CLSI文件如EP9等。另外，新投入使用的全自動(dòng)分析儀，必須通過至少是精密度和正確度的性能驗(yàn)證或評(píng)價(jià)后才使用此方案。本研究的2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀均進(jìn)行過正確度、精密度等主要性能驗(yàn)證且驗(yàn)證通過。統(tǒng)計(jì)了2臺(tái)儀器6個(gè)月室內(nèi)質(zhì)控的中、高值質(zhì)控品的累積CV，結(jié)果均滿足此方案的使用條件。

按方案的可接受標(biāo)準(zhǔn)，本研究中各檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)于依據(jù)臨床研究結(jié)果得出的推薦指標(biāo)和依據(jù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)提出的建議指標(biāo)2條目前尚無可接受標(biāo)準(zhǔn)；若采用依據(jù)生物學(xué)變異確定的分析質(zhì)量要求為可接受標(biāo)準(zhǔn)，允許差值小于1/3個(gè)體內(nèi)生物學(xué)變異，各項(xiàng)目臨界差值為GLU 2.17%、BUN 4.10%、Cr 1.43%、UA 2.87%、ALT 8.10%、AST 3.97%、ALB 1.03%，依據(jù)各檢測(cè)儀器的長(zhǎng)期不精密度，難以達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)。如果選擇依據(jù)室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)設(shè)定的分析質(zhì)量要求，使用CLIA′88的允許誤差范圍為臨床可接受性能的判斷標(biāo)準(zhǔn)，則標(biāo)準(zhǔn)顯得過寬，臨床工作難以接受。因此，本試驗(yàn)各檢測(cè)項(xiàng)目均選擇1/2 CLIA′88的允許誤差范圍為可接受標(biāo)準(zhǔn)。

用上述所選標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估，本研究中2臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀對(duì)BNU、Cr、ALB的檢測(cè)結(jié)果顯示有可比性；GLU、ALT、AST、UA不具有可比性。究其原因，可能與2臺(tái)分析儀不同、采用的試劑、校準(zhǔn)品、檢測(cè)方法等不同有關(guān)。再者，Dimension分析儀為封閉式分析儀，其試劑、校準(zhǔn)品均為配套品，而AU-5421分析儀為開放式分析儀，試劑、校準(zhǔn)品均不配套，特別是GLU項(xiàng)目因 Dimension分析儀所用的檢測(cè)方法是葡萄糖氧化酶法，此方法雖特異性高，但易受維生素C等物質(zhì)的干擾，引起測(cè)定結(jié)果負(fù)偏差,AU-5421所用的己糖激酶法，此方法為血糖測(cè)定的參考方法，特異性高和靈敏度都高，且所受干擾因素較少[6]。因此，本研究將進(jìn)一步分析其原因，并采取相應(yīng)的糾正措施，必要時(shí)重新校準(zhǔn)，然后使用新鮮血樣本進(jìn)行比對(duì)，從人、機(jī)、料、環(huán)、法幾個(gè)要素環(huán)節(jié)來不斷改進(jìn)和提高檢測(cè)質(zhì)量，以保證檢測(cè)結(jié)果的一致性，滿足臨床需求[7-10]。

極差檢驗(yàn)可比性驗(yàn)證方案簡(jiǎn)易、實(shí)用、成本低、易實(shí)施、結(jié)果直觀明了，在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)優(yōu)質(zhì)、高效、創(chuàng)新的服務(wù)宗旨下，值得普及和推廣。

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.23.047

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1672-9455(2015)23-3560-03

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