佘亞輝，韓媛媛，周光庭，賈芳巖(安徽省亳州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 236800)

?

抗環(huán)瓜氨酸肽抗體聯(lián)合類風(fēng)濕因子診斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的臨床意義

佘亞輝，韓媛媛，周光庭，賈芳巖(安徽省亳州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 236800)

目的 探討類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)血清標(biāo)志物抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體的臨床價(jià)值，并分析其與類風(fēng)濕因子(RF)的關(guān)聯(lián)性。方法 采用化學(xué)發(fā)光法檢測CCP抗體，使用免疫散射比濁法檢測RF，并對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 113例RA患者抗CCP 抗體對RA 診斷的敏感性73.5%，陽性83例；84例非RA患者抗CCP 抗體特異性97.6%，陽性2例。82例抗CCP 抗體與RF 檢測結(jié)果相同(72.6%)。兩者無相關(guān)性(P>0.05)。抗CCP 抗體與RF 聯(lián)合檢測的敏感性84.1%，特異性98.8%。結(jié)論 抗CCP 抗體與RF抗體聯(lián)合檢測可提高RA的特異性。

抗環(huán)瓜氨酸肽抗體； 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎； 類風(fēng)濕因子

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種常見的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，患者占人口總數(shù)的0.5%～1%[1]。近年來的研究數(shù)據(jù)顯示，RA越早治療越能獲得最好的療效[2]。RA患者血清中會(huì)產(chǎn)生多種自身抗體，其中類風(fēng)濕因子(RF)抗體是最常用于檢測的血清標(biāo)志物。RF因子是美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ACR)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷分類標(biāo)準(zhǔn)之一[3]。但是RF對于RA特異性不高，在其他風(fēng)濕性或炎性疾病的患者甚至大部分的健康老年者也可以檢出，因此不利于RA的早期診斷。抗環(huán)瓜氨酸肽(抗CCP)抗體是新發(fā)現(xiàn)的一種對RA特異性和敏感性都較高的抗體[4]。2007年歐洲風(fēng)濕病防治聯(lián)合會(huì)(EULAR)將抗CCP抗體作為早期RA診斷指南中的一個(gè)血清學(xué)指標(biāo)[5]。現(xiàn)檢測血清抗CCP抗體和RF抗體含量，探討兩者的相關(guān)性及聯(lián)合檢測RA患者的臨床價(jià)值。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2014年1～6月該院免疫風(fēng)濕科就診的患者197例，其中符合1987年美國風(fēng)濕病協(xié)會(huì)修訂的RA診斷分類標(biāo)準(zhǔn)113 例，男32例，女81 例，年齡18～72歲，平均50.7歲。其他風(fēng)濕類疾病84例，男19例，女65例，年齡19～68歲，平均48.9歲。其中系統(tǒng)性紅斑狼瘡16例，多發(fā)性肌炎8例，干燥綜合征24例，強(qiáng)制性脊柱炎23例，混合性結(jié)締組織病6例，硬皮病7例。以上疾病均與相應(yīng)的國內(nèi)或國際診斷標(biāo)準(zhǔn)符合。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 抗CCP抗體檢測 采用雅培I2000化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行檢測，儀器和試劑均為雅培公司提供。使用兩步免疫檢測法，首先將樣本用清洗緩沖液進(jìn)行預(yù)稀釋，充分混合預(yù)稀釋后的樣本、包被CCP微粒子和樣本稀釋液，標(biāo)本中抗CCP抗體與包被CCP微粒子相結(jié)合。然后將沖洗后加入吖啶酯標(biāo)記的小鼠抗人IgG抗體結(jié)合物，再次沖洗后將預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液注入反應(yīng)結(jié)合體系中。測定化學(xué)發(fā)光反應(yīng)結(jié)果，樣本中CCP抗體含量與發(fā)光值呈正比。抗CCP抗體大于5.0 U/mL為陽性。

1.2.2 RF抗體檢測 采用德靈BNPII特種蛋白儀檢測，使用免疫速率散射比濁法,儀器和試劑均由美國德靈公司提供，RF大于20.0 U/mL為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，使用四格表計(jì)算抗CCP抗體和RF抗體的敏感性和特異性，應(yīng)用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行陽性率比對。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組患者抗CCP抗體和RF抗體分別檢測結(jié)果比較 113例血清標(biāo)本抗CCP抗體陽性83例，對RA診斷敏感性為73.5%；RF陽性為86例，對RA診斷敏感性為76.1%，特異性為97.6%；RF陽性為29例，對RA診斷特異性為65.5%；抗CCP抗體的陽性預(yù)測值為97.6%，陰性預(yù)測值為73.2%；RF的陽性預(yù)測值為74.8%，陰性預(yù)測值為67.1%，兩者敏感性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；但抗CCP抗體特異性明顯高于RF，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2 抗CCP抗體聯(lián)合RF檢測RA結(jié)果比較 RA組患者抗CCP抗體或RF某1項(xiàng)陽性92例，敏感性84.1%；抗CCP抗體和RF同時(shí)陽性64例，敏感性56.6%。非RA組患者抗CCP抗體或RF某1項(xiàng)陽性30例，特異性64.3%；抗CCP抗體和RF同時(shí)陽性1例，敏感性98.8%?？笴CP抗體和RF之一為陽性的敏感性(84.1%)高于抗CCP抗體(73.5%)和RF(76.1%)單項(xiàng)測定?？笴CP抗體和RF同時(shí)為陽性的特異性(98.8%)高于RF(74.8%)測定的特異性，但與抗CCP抗體單獨(dú)測定的特異性(97.6%)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表1 2組患者抗CCP抗體和RF抗體分別檢測結(jié)果比較

注：與抗CCP抗體比較,#P>0.05;與抗CCP抗體比較，*P<0.05。

表2 抗CCP抗體聯(lián)合RF檢測RA結(jié)果比較

3 討 論

RA是一種自身免疫性疾病，女性患者居多，表現(xiàn)為外周關(guān)節(jié)的非特異性炎性，而且后期發(fā)展迅速，患病關(guān)節(jié)及其周圍組織呈現(xiàn)進(jìn)行性破壞，并致使受損關(guān)節(jié)發(fā)生功能障礙，預(yù)后很差，因此RA的早期診斷、早期干預(yù)已經(jīng)成為目前臨床RA的治療策略。但是RA的早期癥狀并不明顯，早期發(fā)展緩慢，而且與骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、銀屑病性關(guān)節(jié)炎等疾病癥狀相似，極易引起誤診從而耽誤RA早期治療。但目前RA的診斷標(biāo)準(zhǔn)仍然是1987年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ARA)制定的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎分類標(biāo)準(zhǔn)，而且主要為臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)只有RF一項(xiàng)，RF是一種變形IgG自身抗體，可與IgG的Fc片段結(jié)合，但在其他較多自身免疫性疾病和老年健康者中也會(huì)出現(xiàn)陽性，因此特異性不高，不能滿足臨床對RA的早期診斷治療。

本研究對113例RA患者和84例非RA患者同時(shí)進(jìn)行抗CCP抗體和RF檢測，分析其敏感性及特異性并探討兩者之間的相關(guān)性。結(jié)果表明，抗CCP抗體和RF對于RA的診斷敏感性分別為73.5%和76.1%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與其他文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果基本一致[6-7]；抗CCP抗體和RF對于RA的診斷特異性分別為97.6%和65.5%,抗CCP抗體的特異性明顯高于RF，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與相關(guān)報(bào)道相似[8-9]。RA組患者抗CCP抗體與RF同時(shí)陽性64例，敏感性56.6%，低于兩者單獨(dú)檢測的敏感性；兩者之一為陽性95例，敏感性84.1%，高于兩者單獨(dú)檢測的敏感性，但特異性98.8%，與抗CCP抗體單獨(dú)檢測的特異性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。因此對RA疑似患者進(jìn)行抗CCP抗體與RF的聯(lián)合檢測，可以不降低特異性，且提高靈敏度，達(dá)到早期診斷、早期治療的目的?？笴CP抗體與RF結(jié)果有較高的一致性，183例RA患者中兩者同時(shí)陽性64例，同時(shí)陰性18例，兩者一致率72.6%，但經(jīng)χ2檢驗(yàn)，提示無相關(guān)性，表明2種抗體是獨(dú)立個(gè)體，不能互相代替。表1結(jié)果顯示，抗CCP抗體的陽、陰性預(yù)測值(84.1%、73.2%)均高于RF(74.8%、67.1%)，說明抗CCP抗體對RA的診斷價(jià)值高于RF，因此抗CCP抗體是一個(gè)優(yōu)于RF的血清標(biāo)志物。

隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，RA的相關(guān)自身抗體不斷被發(fā)現(xiàn)，其中包括瓜氨酸相關(guān)自身免疫系統(tǒng)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，瓜氨酸是其共同靶抗原決定簇。Schellekens等[10]采用半胱氨酸替換瓜氨酸肽鏈中的2個(gè)絲氨酸，形成轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu)相似的二硫鍵而成為環(huán)瓜氨酸肽，并認(rèn)為RA血清抗中間絲相關(guān)蛋白相關(guān)抗體識(shí)別的主要抗原決定簇是瓜氨酸。所以，血清抗CCP抗體對RA具有較高的特異性和敏感性,是RA新的血清標(biāo)志物，2007年歐洲風(fēng)濕病防治聯(lián)合會(huì)(EULAR)把抗CCP抗體列為早期類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷指南中的一個(gè)血清學(xué)指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)對抗CCP抗體檢測采用微粒子化學(xué)發(fā)光法，儀器為雅培I2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀，其配套抗CCP抗體試劑對于RA檢測特異度及靈敏度都較高，與傳統(tǒng)的ELISA法比較具有穩(wěn)定性好，檢測時(shí)間快，人為干擾因素少的優(yōu)點(diǎn)。

綜上所述，抗CCP抗體對RA的檢測與RF比較，敏感性相當(dāng)，但特異性卻有極大的提高。兩者聯(lián)合檢測，能夠提高診斷敏感性，對于RA的早期診斷提供很大幫助，臨床可及早進(jìn)行治療措施，減少骨關(guān)節(jié)破壞，延緩疾病發(fā)展，具有臨床意義。

[1]唐福林.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診治和預(yù)后[J].臨床內(nèi)科雜志,2004,21(3):148-151.

[2]Landew R.The benefits of early treatment in rheumatoid arthritis:confounding by indication,and the issue of timing[J].Arthritis & Rheumatism,2003,48(1):1-5.

[3]Arnett FC,Edworthy SM,Blocn DA,et al.The American Rheumatism Association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis[J].Arthritis & Rheumatism,2010,31(3),315-324.

[4]Kroot EJ,de Jong BA,van Leeuwen MA,et al.The prognostic value of anticyclic citrullinated peptide antibody in patients with recentonset rheumatoid arthritis[J].Arthritis & Rheumatism,2000,43(8):1831-1835.

[5]Combe B,Landew R,Lukas C,et al.EULAR recommendations for the management of early arthritis:report of a task force of the European Standing Committee for International Clinical Studies Including Therapeutics (ESCISIT)[J].Annals of the Rheumatic Diseases,2007,66(1):34-45.

[6]陳曉玲,潘莎琳,高志芬.CCP抗體和RF在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷中的應(yīng)用[J].四川醫(yī)學(xué),2006,27(7):690-691.

[7]葛艷玲,宋慧,趙育靖.單獨(dú)檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體診斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2014,18(1):94-97.

[8]曾小峰,艾脈興.抗環(huán)瓜氨酸肽抗體檢測在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的意義[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志,2001,5(5):281-284.

[9]胡學(xué)芳,魏華,朱愛萍,等.抗環(huán)瓜氨酸肽抗體檢測在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷中的臨床意義[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2003,26(8):484-487.

[10]Schellekens GA,de Jong BA,Van den Hoogen FH,et al.Citrulline is an essential constituent of antigenic determinants recognized by rheumatoid arthritis-specific autoantibodies[J].Journal of Clinical Investigation,1998,101(10):273-275.

The clinical value of anti-CCP antibodies and rheumatoid factor to rheumatoid arthritis

SHEYa-hui,HANYuan-yuan,ZHOUGuang-ting,JIAFang-yan

(DepartmentofLaboratory,thePeople′sHospitalofBozhou,Bozhou,Anhui236800,China)

Objective To analyze the value of anti-CCP antibodies to RA and relationshipof rheumatoid factor (RF).Methods CCP antibodies were determined by chemiluminescence,rheumatoid factor was determined by immune nephelometry,and the sensitivity,specificity and relationship were analyzed by SPSS20.0.Results Anti-CCP antibodies for RA diagnostic sensitivity was 73.5% (83/113),specificity was 97.6% (81/83).There was no significant correlation between anti-CCP and RF antibodies (P>0.05).Sensitivity of RF combined with anti-CCP was 84.1%,specificity was 98.8%.Conclusion Anti-CCP antibodies for RA diagnosis with high specificity and sensitivity;there was no correlation between anti-CCP and RF.Combined detection can improve the diagnostic sensitivity and specificity of RA.

anti-CCP; rheumatoid arthritis; rheumatoid factor

佘亞輝，男，本科，主管檢驗(yàn)師，主要從事免疫診斷學(xué)研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.11.034

A

1672-9455(2015)11-1580-02

2014-12-16

2015-02-13)