朱旭明，陳國千，孫偉峰

（南京醫(yī)科大學附屬無錫人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科，江蘇無錫214023）

卵巢癌是指生長在卵巢上的惡性腫瘤，由于卵巢癌早期缺少癥狀，即使有癥狀也不特異，篩查的作用又有限，因此早期診斷比較困難。就診時60%～70%已為晚期，而晚期病例又療效不佳，5年生存率只有25%[1]?；|金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）是降解細胞外基質成分的一類重要水解酶。MMP與腫瘤發(fā)生、發(fā)展有關，能參與調節(jié)細胞增殖、凋亡、血管生成、免疫監(jiān)視[2]。目前MMP家族已分離鑒別出26個成員，編號分別為MMP1～26。當MMP-1啟動子區(qū)域-1 607bp位點缺失1個鳥嘌呤核苷酸（G）或插入1個G，會出現3種基因型：1G／1G、1G／2G和2G／2G。當MMP-3啟動子1 171bp位點重復出現5個腺嘌呤核苷酸（A）或6個A，會出現5A／5A、5A／6A和6A／6A3種基因型。關于MMP-1-1 607 bp 1G／2G、MMP-3-1 171bp 5A／6A多態(tài)性和卵巢癌易感性的關系已有一些報道，但缺乏研究結果的一致性。本文應用Meta分析研究兩者的關系。

1 資料與方法

1.1 文獻檢索 以“polymorphism，matrix metalloproteinase，ovarian cancer”等作為主題詞并列搜索Pubmed、Cochrane、EMbase等外文數據庫，以“多態(tài)性、基質金屬蛋白酶、卵巢癌”等為關鍵詞并列搜索中國知網（CNKI）、萬方等中文數據庫。系統(tǒng)檢索發(fā)表時間為1994年1月至2013年5月的文獻，末次檢索時間為2013年6月10日。

1.2 納入標準 （1）原始文獻類型為設計良好的病例對照研究；（2）必須有卵巢癌組和對照組；（3）基因研究對象為位于啟動子區(qū)域的MMP-1-1 607bp 1G／2G或MMP-3-1 171bp 5A／6A；（4）檢測多態(tài)性位點的分子生物學方法科學嚴謹；（5）各文獻必須直接或間接提供不同基因型分布資料；（6）文獻內容用中文或英文表達。相同研究重復發(fā)表的僅納入最近文獻。

1.3 文獻質量評價 對各獨立研究從以下5個方面進行質量評估：（1）實驗設計是否科學；（2）卵巢癌組及對照組人員的納入標準及其基本構成特征是否明確；（3）分子生物學方法是否可信合理；（4）統(tǒng)計方法是否恰當準確；（5）文獻類型是否為論著。以上5項，滿足1項為1分，總分大于或等于3分者為質量合格[3]。

1.4 資料提取 采用統(tǒng)一的資料提取表，資料包括：第一作者姓名，文獻發(fā)表年份，研究對象國籍、膚色、基因多態(tài)性、卵巢癌類型，病例組和對照組樣本量、基因型數量及等位基因頻率。

1.5 統(tǒng)計學處理 用RevMan5.0對MMP-1的基因型1G／1G∶1G／2G＋2G／2G、1G／1G∶2G／2G以及等位基因1G∶2G 3種基因模型，MMP-3的5A／5A＋5A／6A∶6A／6A、5A／5A∶6A／6A、5A∶6A模型進行統(tǒng)計分析。先進行異質性檢驗，P＞0.10且I2＜50%，為無異質性，采用固定效應模型；P≤0.10且I2＞50%，存在異質性，采用隨機效應模型?；蚨鄳B(tài)性與易感性的關系用比值比（OR）及95%可信區(qū)間（CI）表示，并繪制森林圖，整合結果以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 文獻納入情況 按照PRISMA標準流程[4]，本研究按檢索策略和納入標準共檢索到相關文獻8篇[5-12]，因重復發(fā)表剔除2篇[7，10]，最終共納入包含在6篇文獻中的8項研究，其中涉及MMP-1有5項，MMP-3有3項。納入MMP-1卵巢癌組的人群754例，對照組1 184例；納入MMP-3卵巢癌組的人群265例，對照組425例。

表1 MMP-1--1 607bp 1G／2G基因型及等位基因分布情況（n）

表2 MMP-1不同對照模型Meta分析結果

圖1 按膚色分類MMP-1-1 607bp 1G／2G基因多態(tài)性與卵巢癌關系的森林圖（1G／1G∶2G／2G）

表3 MMP-3-1 171bp 5A／6A基因型及等位基因分布情況

2.2 Meta分析結果

2.2.1 MMP-1 MMP-1-1 607bp 1G／2G基因多態(tài)性各研究基因型分布見表1。除總體人群外，還對不同膚色人群（黃種人及其他人種）進行分層分析，同時還對癌癥種類為上皮性卵巢癌進行分析，結果見表2。1G／1G∶2G／2G對照模型在按膚色分層時森林圖見圖1。對于總體人群，1G／1G∶1G／2G＋2G／2G模型下OR為0.95（95%CI＝0.74～1.21，P＝0.67），1G／1G∶2G／2G模型下OR為0.93（95%CI＝0.70～1.23，P＝0.60），1G∶2G模型下OR為0.99（95%CI＝0.87～1.14，P＝0.91），差異無統(tǒng)計學意義。按膚色進行亞組分析及對癌癥種類為上皮性卵巢癌的人群進行分析后，也不能認為差異有統(tǒng)計學意義。因此尚不能證實MMP-1-1 607bp 1G／2G基因多態(tài)性與卵巢癌發(fā)病風險關聯(lián)。

2.2.2 MMP-3 MMP-3-1 171bp 5A／6A基因多態(tài)性各研究基因型分布見表3。5A／5A＋5A／6A∶6A／6A模型OR為0.97[（95%CI＝0.68～1.38，P1（P2）＝0.85（0.12）]，5A／5A∶6A／6A模型OR為1.25[95%CI＝0.70～2.24，P1（P2）＝0.46（0.98）]，5A∶6A模型OR為1.01[95%CI＝0.79～1.31，P1（P2）＝0.91（0.49）]，差異無統(tǒng)計學意義，也不能證實MMP-3-5A／6A多態(tài)性與卵巢癌發(fā)生有關。

3 討論

MMP-1又稱膠原酶-1，能降解膠原纖維，由各種基質細胞、內皮細胞、上皮細胞產生，通過改變細胞的微環(huán)境影響腫瘤初始階段，有利于腫瘤形成，并且與腫瘤侵襲轉移有關。正常情況下大多數細胞產生微量MMP-1，但腫瘤時呈現高表達。在MMP-1啟動子-1 607bp位點5′-GA-3′基礎上插入1個額外的鳥嘌呤核苷酸會出現5′-GGA-3′，這個新序列是Ets轉錄因子結合位點的核心序列[13]，意味MMP-1轉錄水平增高，癌癥風險加大。Liu等[14]發(fā)現基因型2G／2G的中國人肺癌發(fā)病風險是1G／1G的1.71倍。Zhou等[15]發(fā)現美國乳腺癌患者等位基因2G的存在與MMP-1的表達及預后緊密相關。

雖然本文尚不能證實MMP-1-1 607bp 1G／2G多態(tài)性與卵巢癌易感性有關，但也不能肯定兩者不存在關系，因為本文還存在局限性：（1）語言上的限制，減少了研究人群的納入；（2）未考慮影響因素，包括年齡、疾病嚴重程度等。另外，國內外對于MMP家族基因多態(tài)性與卵巢癌易感性關系的研究開展并不多，相關文獻較少。本文發(fā)現，MMP-1-1 607bp 2G等位基因在黃種人群頻率40%～50%，在其他人種達60%～70%，不同種族2G等位基因頻率存在差異，提示增加種族來源進行精確分組是今后研究的切入點。

MMP-3又稱基質溶解素1，作用于細胞外基質和基底膜中的Ⅳ型膠原，并可激活MMP-1前體成為MMP-1，在腫瘤浸潤、轉移起重要作用。MMP-3轉錄活性可能也和Ets轉錄因子有關，啟動子區(qū)域腺嘌呤的重復和Ets轉錄因子結合能力的變化有關。腫瘤患者5A等位基因的頻率高于正常人群，比如Srivastava等[16]發(fā)現北方印度人5A／5A基因型患膀胱癌風險增加。但和MMP-1一樣，本文也不能證實MMP-3-1 171bp 5A／6A基因多態(tài)性和卵巢癌有關，需增加種族數量加以證實。

除此之外，研究MMP基因家族單倍體與卵巢癌易感性關系，也是將來重點關注領域。

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