宋清玲，薛　莎

(蘭州軍區(qū)臨潼療養(yǎng)院檢驗病理科，西安 710600)

拉米夫定和干擾素α序貫治療慢性乙型肝炎患者48周前后血清補體C3、C4變化

宋清玲※，薛莎

(蘭州軍區(qū)臨潼療養(yǎng)院檢驗病理科，西安 710600)

摘要：目的研究拉米夫定和干擾素α序貫治療對慢性乙型肝炎患者血清補體C3、C4水平的影響。方法選擇2008年1月至2012年9月蘭州軍區(qū)臨潼療養(yǎng)院收治的180例慢性乙型肝炎患者為研究對象，采用隨機數(shù)字表法分為序貫治療組、拉米夫定組、干擾素組，各60例。檢測三組患者的血清補體C3、C4水平，乙型肝炎病毒(HBV)拷貝數(shù)以及肝纖維化指標(biāo)。結(jié)果治療后，三組患者的血清補體水平均高于治療前，且序貫治療組的血清補體C3、C4水平高于拉米夫定組和干擾素組(均P<0.05)；治療后48周時，序貫治療組患者的HBV-DNA拷貝數(shù)、耐藥率以及透明質(zhì)酸、層黏蛋白、Ⅳ型膠原、Ⅲ型前膠原氨基端肽水平低于拉米夫定組和干擾素組(均P<0.05)，HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率高于拉米夫定組和干擾素組(均P<0.05)。結(jié)論拉米夫定和干擾素α序貫治療的整體效果優(yōu)于拉米夫定和干擾素α單藥治療，能改善補體水平和免疫功能、降低HBV耐藥率、延緩肝纖維化進程。

關(guān)鍵詞：乙型肝炎；序貫治療；拉米夫定；干擾素α；補體

抗病毒藥物是慢性乙型肝炎治療的最重要環(huán)節(jié)，一線藥物包括干擾素以及核苷酸類似物。但是，近年來的流行病學(xué)資料顯示，抗病毒藥物單藥治療的效果并不理想，干擾素給藥不便且乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)-DNA高拷貝數(shù)患者對藥物的應(yīng)答性較低；核苷酸類似物容易引起病毒突變和耐藥。目前，國內(nèi)外學(xué)者采用兩種藥物聯(lián)合序貫治療取得了積極效果，有助于改善機體免疫功能、控制病毒突變的發(fā)生。補體C3、C4是機體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，在機體抗病毒機制中處于一線防御的地位。本研究從血清補體C3、C4變化情況的角度分析了拉米夫定和干擾素α序貫治療的價值，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2008年1月至2012年9月蘭州軍區(qū)臨潼療養(yǎng)院收治的慢性乙型肝炎患者180例，納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者的HBV表面抗原和HBV e抗原陽性，且持續(xù)時間超過6個月；②血清HBV-DNA的拷貝數(shù)超過105/L；③取得患者知情同意，且獲得倫理委員會批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①同時使用其他抗病毒藥物及免疫調(diào)節(jié)劑治療的乙型肝炎患者；②肝功能失代償患者；③合并其他類型肝炎的患者。將上述患者采用隨機數(shù)字表法分為三組：序貫治療組60例，男38例、女22例，年齡51～67歲，平均(58.5±7.4)歲；拉米夫定組60例，男40例、女20例，年齡52～66歲，平均(59.0±6.9)歲；干擾素組60例，男41例、女19例，年齡50～68歲，平均(59.2±7.2)歲。三組患者的性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2治療方法拉米夫定組給予拉米夫定(葛蘭素史克藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：11080051)口服、每次100 mg、每日1次，共48周；干擾素組給予干擾素α2b(深圳海王藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：10020010)皮下注射、每次500萬U、每2日1次，共48周；序貫治療組給予拉米夫定口服，每次100 mg、每日1次，共32周，從第25周開始給予干擾素α2b皮下注射，每次500萬U、每2日1次，共24周，總療程48周。

1.3檢測指標(biāo)及方法

1.3.1血清補體C3、C4水平治療前和治療后48周，采集患者的外周血5 mL，離心后采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測補體C3、C4水平。

1.3.2HBV感染情況治療后48周，采用博日FDQ-33A line-gene熒光定量檢測儀測定血清中HBV DNA的拷貝數(shù)，HBV DNA的拷貝數(shù)<1000 copies/mL判斷為陰性，拷貝數(shù)>×105copies/mL判斷為耐藥。

1.3.3肝纖維化指標(biāo)治療后48周，采集患者的外周血，離心后采用上海西唐公司的人酶聯(lián)免疫吸附試劑盒測定透明質(zhì)酸(hyaluronic acid，HA)、層黏蛋白(laminin，LN)、Ⅳ型膠原(type Ⅳ collagen，ⅣC)、Ⅲ型前膠原氨基端肽(procollagen-Ⅲ-peptide，PⅢP)。

2結(jié)果

2.1三組患者補體C3、C4水平的比較治療前，三組患者血清補體C3、C4水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后，三組患者的血清補體C3、C4水平均高于治療前，且序貫治療組的血清補體C3、C4水平高于拉米夫定組(t=7.186,12.875,P<0.05)和干擾素組(t=7.887,11.337，P<0.05)，見表1。

表1三組慢性乙型肝炎患者的補體

C3、C4水平的比較

組別例數(shù)C3治療前治療后tPC4治療前治療后tP序貫治療組600.54±0.081.21±0.2110.842<0.050.11±0.010.34±0.0413.854<0.05拉米夫定組600.56±0.070.81±0.10a6.874<0.050.10±0.010.17±0.02a9.485<0.05干擾素組 600.53±0.080.77±0.09a6.239<0.050.12±0.010.18±0.03a5.663<0.05F1.0955.8730.9347.093P>0.05<0.05>0.05<0.05

a與序貫治療組比較，P<0.05

2.2三組患者HBV感染情況的比較治療后48周時，三組患者的HBV-DNA拷貝數(shù)、耐藥率、HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)；序貫治療組的HBV-DNA拷貝數(shù)、耐藥率低于拉米夫定組(t=8.984,P<0.05；χ2=5.521,P<0.05)和干擾素組(t=9.138,P<0.05；χ2=6.550,P<0.05)，HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率高于拉米夫定組(χ2=20.833,P<0.05)和干擾素組(χ2=23.764，P<0.05)。見表2。

表2　三組患者HBV感染情況的比較

HBV：乙型肝炎病毒；a與序貫治療組比較，P<0.05；b為F值,余為χ2值

2.3三組患者肝纖維化指標(biāo)的比較治療后48周時，三組患者的肝纖維化指標(biāo)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；序貫治療組患者的HA、LN、ⅣC、PⅢNP水平均低于拉米夫定組(t=13.474,10.775,15.174,15.886,P<0.05)和干擾素組(t=12.986,9.757,17.485,18.457,P<0.05)，見表3。

表3　三組慢性乙型肝炎患者肝纖維化

HA:透明質(zhì)酸；LN:層黏蛋白；ⅣC：Ⅳ型膠原；PⅢP：Ⅲ型前膠原氨基端肽;a與序貫治療組比較，P<0.05

3討論

慢性乙型肝炎是常見的消化系統(tǒng)慢性傳染病，患者在HBV感染的基礎(chǔ)上出現(xiàn)肝細胞變性壞死，并進行性發(fā)展為肝臟彌漫性的纖維化和假小葉形成。若未采取治療措施或治療不當(dāng)，慢性乙型肝炎可發(fā)展為肝炎、肝硬化，甚至肝癌[1]。拉米夫定和干擾素是治療慢性乙型肝炎的常用藥物。拉米夫定的作用靶點是DNA聚合酶，在口服進入體內(nèi)后代謝為拉米夫定三磷酸鹽，進而通過抑制DNA聚合酶的生物活性來阻斷病毒DNA的復(fù)制過程，達到抗病毒的目的[2]。但拉米夫定不能徹底清除肝細胞內(nèi)的HBV，若患者在療程內(nèi)未能達到血清轉(zhuǎn)換，在停藥后HBV會再度大量復(fù)制；而長期服藥又容易引起HBV的酪氨酸-甲硫氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸的位點發(fā)生突變，造成耐藥病毒株的產(chǎn)生[3]。干擾素注射治療可通過誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗病毒抗體、調(diào)節(jié)機體免疫功能來清除HBV，患者體內(nèi)HBeAg的轉(zhuǎn)化率高、耐藥率低，但HBV-DNA拷貝數(shù)較高者對藥物的反應(yīng)性低下，應(yīng)答率偏低[4]。

根據(jù)拉米夫定和干擾素兩種藥物作用的不同機制和各自存在的缺陷，國內(nèi)外學(xué)者采用了拉米夫定聯(lián)合干擾素的序貫療法并取得了積極療效[5-6]。序貫治療的理論基礎(chǔ)在于[7]：先應(yīng)用拉米夫定降低HBV的拷貝數(shù)，以保證機體對干擾素的反應(yīng)性；后給予干擾素注射以促進體內(nèi)乙肝e抗原轉(zhuǎn)化，既提高了整體療效，又減少了病毒變異和耐藥的發(fā)生。參照徐京杭等[8]和Enomoto等[9]研究的治療方案，本研究所設(shè)計的序貫治療總療程為48周，前32周給予拉米夫定口服、后24周給予干擾素注射，期間有8周為兩種藥物聯(lián)合使用。通過比較三組患者HBV感染情況可知：序貫治療組患者的HBV-DNA 拷貝數(shù)、HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率、耐藥率均比單藥治療理想，肝纖維化水平也較低。這與國內(nèi)外學(xué)者的研究結(jié)果一致[4]，反映出序貫治療在改善療效、延緩肝纖維化、減少病毒耐藥和突變方面的積極價值。

近年來的研究發(fā)現(xiàn)，天然免疫系統(tǒng)在殺滅HBV中發(fā)揮了重要作用，HBV復(fù)制高峰期時，超過80%的病毒被天然免疫系統(tǒng)所清除[10]。補體系統(tǒng)是天然免疫系統(tǒng)的重要組成部分，在機體抗病毒機制中處于一線防御的地位[11]。肝臟是補體合成的重要器官，HBV所造成的炎癥反應(yīng)會影響肝臟功能，導(dǎo)致補體合成減少；在病毒復(fù)制過程中，機體免疫反應(yīng)的激活會進一步消耗補體C3、C4[12]。在此條件下，補體水平持續(xù)下降，可使機體免疫功能低下、HBV持續(xù)復(fù)制，加重肝炎程度[13]。但是，在目前國內(nèi)的研究中，序貫治療對乙型肝炎患者血清補體水平影響的報道較少見。為此，在本研究中分析了三組患者治療前后的補體水平，結(jié)果顯示，治療后，三組患者的血清補體水平均高于治療前，且序貫治療組的血清補體C3、C4水平高于拉米夫定組和干擾素組，反映出序貫治療在改善血清補體水平和免疫功能方面的積極作用。

綜上所述，拉米夫定和干擾素α序貫治療的整體效果優(yōu)于拉米夫定和干擾素α-單藥治療，能改善補體水平和免疫功能、降低HBV耐藥率、延緩肝纖維化進程。

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Study on the Changes of Serum Complement C3, C4 48 Weeks before and after Sequential Therapy of Lamivudine and α-Interferon for Patients with Chronic Hepatitis B

SONGQing-ling，XUESha.

(DepartmentofPathologyInspection，LintongSanitoriumofChinesePLALanzhouCommand,Xi′an710600,China)

Abstract:ObjectiveTo study the effect of sequential therapy of lamivudine and α-interferon on serum complement C3,C4 in patients with chronic hepatitis B.MethodsA total of 180 cases of chronic hepatitis B admitted in Lintong Sanitorium of Chinese PLA Lanzhou Command from Jan.2008 to Sep.2012 were selected as research objects,and divided into three groups according to random number table,60 cases in sequential therapy group received sequential therapy of lamivudine and α-interferon,60 cases in lamivudine group received monotherapy of lamivudine and 60 cases in interferon group received monotherapy of α-interferon.Then serum C3,C4 levels,hepatitis B virus(HBV) copy number and liver fibrosis indexes of the three groups were detected.ResultsAfter treatment,serum complement levels of the three groups were higher than those before treatment,and serum C3,C4 levels of sequential therapy group were higher than those of lamivudine group and interferon group(P<0.05).And 48 weeks after treatment,HBV-DNA copy number,resistance cases and hyaluromic acid,laminin,typeⅣcollegan,type-Ⅲ PINP levels of sequential therapy group were lower than lamivudine group and interferon group(P<0.05).HBV-DNA negative cases of sequential therapy group were more than lamivudine group and interferon group(P<0.05).ConclusionThe overall curative effect of sequential therapy of lamivudine and α-interferon is better than monotherapy of lamivudine and α-interferon.It can improve complement levels and immune function,reduce the rate of HBV resistance,and delay the progress of hepatic fibrosis.

Key words:Hepatitis B; Sequential therapy; Lamivudine; α- interferon; Complement

收稿日期：2014-04-08修回日期：2014-07-28編輯：伊姍

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.10.074

中圖分類號：R512.62

文獻標(biāo)識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)10-1914-03