田兆華，苗鳳臺，李曉麗，張喜紅（河南省鄭州人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南鄭州450000）

細胞減滅術(shù)聯(lián)合腹腔熱灌注化療對卵巢癌患者血管新生和免疫功能指標(biāo)影響的臨床研究

田兆華，苗鳳臺，李曉麗，張喜紅
（河南省鄭州人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南鄭州450000）

摘要：目的分析細胞減滅術(shù)（CRS）聯(lián)合腹腔熱灌注化療（IPHC）對卵巢癌患者血管新生和免疫功能指標(biāo)的影響。方法選擇在該院住院治療的卵巢癌患者作為研究對象，隨機分為CRS治療的對照組和CRS+IPHC治療的觀察組，比較兩組患者的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）水平、細胞免疫功能和成纖維細胞因子水平等。結(jié)果觀察組患者接受CRS+IPHC治療后，血清VEGFA、VEGFB和VEGFC水平明顯低于對照組患者（P<0.05）。觀察組患者接受治療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平明顯高于對照組，CD8+水平低于對照組（P<0.05）。觀察組患者接受治療后的腹腔灌洗液酸性成纖維細胞生長因子（aFGF）、堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）水平明顯低于對照組患者（P<0.05）。結(jié)論CRS+IPHC治療有助于抑制卵巢癌患者的腫瘤血管新生，提升患者細胞免疫功能，抑制腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移。

關(guān)鍵詞：卵巢癌；細胞減滅術(shù)；腹腔熱灌注化療

卵巢癌為女性多見惡性腫瘤性疾病，死亡率較高，早期不易發(fā)覺。臨床較多卵巢癌患者確診時已發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，無法實施根治性手術(shù)，故采用細胞減滅術(shù)（cytoreductive surgery,CRS）以減少全身重量組織體積、緩解臨床癥狀是較為理想的方式[1]。但是晚期卵巢癌易發(fā)生腹腔種植轉(zhuǎn)移，細胞減滅術(shù)無法完全去除腹腔內(nèi)的轉(zhuǎn)移病灶，使腫瘤復(fù)發(fā)成為必然，直接降低手術(shù)效果。腹腔熱灌注化療（intraperitoneal perfusion chemotherapy，IPHC）通過在腹腔局部加溫基礎(chǔ)上置入化療藥物，提升局部化療藥物濃度的同時增加腫瘤細胞膜通透性，擴大化療藥物對腫瘤細胞的殺傷力。本次研究主要分析細胞減滅術(shù)聯(lián)合腹腔熱灌注化療對卵巢癌患者血管新生和免疫功能指標(biāo)的影響，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇于2011年7月-2014年1月在本院住院治療的晚期卵巢癌患者92例作為研究對象，納入標(biāo)準(zhǔn)：①晚期腫瘤無法行根治性手術(shù)或者手術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)；②腹腔內(nèi)無粘連；③預(yù)計生存期≥6個月；④無骨髓抑制或者造血功能障礙；⑤所有患者及家屬在了解研究過程后均簽署知情同意書。按照隨機數(shù)表法將所有入組患者分為：接受細胞減滅術(shù)治療的對照組和接受細胞減滅術(shù)聯(lián)合腹腔熱灌注化療治療的觀察組，每組各46例。觀察組患者年齡36~72歲，平均（57.82±11.05）歲，病程0.5~3.0年，平均（1.17± 0.38）年，其中漿液腺腺癌25例，黏液腺腺癌12例，混合性漿液黏液性囊腺癌6例，透明細胞癌3例；對照組患者中年齡34~71歲，平均（56.79±10.53）歲，病程0.5~4.0年，平均（1.23±0.46）年，其中漿液腺腺癌26例，黏液腺腺癌11例，混合性漿液黏液性囊腺癌7例，透明細胞癌2例。兩組患者的基線資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2治療方法

對照組患者單純接受縮瘤術(shù)治療，具體如下：從劍突至恥骨聯(lián)合切開腹部，充分暴露術(shù)野后切除卵巢原位腫瘤，同時對壁層腹膜行區(qū)域性整片剝脫術(shù)，對腹部及腸道器官行病變腸管切除術(shù)。對與重要臟器粘連而無法切除的腫瘤組織，采用超聲吸引法處理。對照組患者在接受細胞減滅術(shù)基礎(chǔ)上，加入腹腔熱灌注化療，方法如下：將灌注導(dǎo)管置入腹腔，入管口位于膈肌下方，出口管位于盆腔，兩處均連接溫度探頭以實時監(jiān)測溫度變化。先用42℃生理鹽水沖洗腹腔，恒溫后加入化療藥物，持續(xù)時間為90~120 min，隨后用2~3 L平衡鹽溶液清洗腹腔。檢查腹腔吻合情況，必要時造瘺。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）水平兩組患者接受不同治療方式前及治療后30 d，分別抽取患者外周靜脈血5 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測其中血管內(nèi)皮生長因子VEGFA、VEGFB和VEGFC水平，測定步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

1.3.2細胞免疫功能兩組患者接受不同治療前后，抽取外周靜脈血測定T細胞亞群水平，包括CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+指標(biāo)。

1.3.3成纖維細胞生長因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）水平兩組患者接受不同治療前后留取腹腔灌洗液，采用ELISA法測定其中FGF含量，包括酸性成纖維細胞生長因子（acidic fibroblast growth factor，aFGF）、堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 18.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用t檢驗，P< 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

表1　兩組患者接受不同治療前后的細胞免疫功能比較（±s）

表1　兩組患者接受不同治療前后的細胞免疫功能比較（±s）

組別　治療前治療后CD3+/%　CD4+/%　CD8+/%　CD3+/%　CD4+/%　CD8+/%　CD4+/CD8+觀察組　0.51±0.06　0.41±0.07　0.33±0.06　1.23±0.08　0.62±0.08　0.50±0.06　0.20±0.04　1.68±0.20對照組　0.49±0.05　0.39±0.06　0.32±0.04　1.25±0.09　0.53±0.06　0.40±0.05　0.29±0.05　1.42±0.12 t值　0.34　0.41　0.25　0.30　4.74　4.68　5.10　6.29 P值　0.623　0.582　0.824　0.689　0.021　0.023　0.019　0.014 CD4+/CD8+

2.1VEGF水平

治療前兩組患者的血清VEGF水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），觀察組患者接受細胞減滅術(shù)聯(lián)合腹腔熱灌注化療后的血清VEGFA、VEGFB和VEGFC水平明顯低于對照組患者（P<0.05）。見附圖。

附圖　兩組患者治療前后血清VEGF含量比較

2.2細胞免疫功能

治療前兩組患者的細胞免疫功能水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），觀察組患者接受治療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平明顯高于對照組，CD8+水平低于對照組（P<0.05）。見表1。

2.3成纖維細胞因子水平

治療前兩組患者的腹腔灌洗液成纖維細胞因子水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），觀察組患者接受治療后的腹腔灌洗液aFGF和bFGF水平明顯低于對照組患者（P<0.05）。見表2。

表2　兩組患者接受不同治療前后的FGF水平比較（pg/L±s）

表2　兩組患者接受不同治療前后的FGF水平比較（pg/L±s）

組別　治療前　治療后aFGF　bFGF　aFGF　bFGF觀察組　13.02±1.92　16.28±1.21　6.28±0.83　7.23±0.89對照組　13.27±2.17　17.03±1.56　11.51±1.62　13.18±1.72 t值　0.38　0.49　5.84　7.15 P值　0.418　0.382　0.017　0.013

3　討論

卵巢癌居婦科惡性腫瘤死亡率之首，由于早期癥狀不明顯，大多數(shù)患者在感覺明顯不適就診時已經(jīng)處于晚期，錯失接受根治性手術(shù)治療的機會，故CRS是此類患者的主要治療方法[2]。CRS可以切除大部分肉眼可見病灶，迅速縮小腫瘤體積，但是晚期卵巢癌患者極易發(fā)生腹腔種植轉(zhuǎn)移，CRS后患者體內(nèi)仍殘留較多的腫瘤細胞，常規(guī)全身化療在腹腔局部的藥物濃度較低不足以殺滅腫瘤，可導(dǎo)致CRS后腫瘤復(fù)發(fā)。

IPHC是目前臨床興起的局部化療技術(shù)，尤其針對卵巢癌這類容易發(fā)生腹腔種植轉(zhuǎn)移的惡性腫瘤，已經(jīng)獲得較多臨床醫(yī)師的關(guān)注。腹腔化療是通過將化療藥物直接灌注到腹膜腔，提升局部化療藥物濃度，增強對腫瘤細胞的殺傷力[3]。接受細胞減滅術(shù)后殘留腫瘤細胞的患者，適合術(shù)后腹腔化療。IPHC通過對腫瘤局部加溫來增加腫瘤細胞膜通透性，促進化療藥物滲透入內(nèi)，增強腫瘤細胞對化療藥物的反應(yīng)，最終起到不可逆性損害腫瘤細胞并抑制其修復(fù)的作用。

腫瘤細胞減滅術(shù)聯(lián)合腹腔熱灌注化療這一聯(lián)合治療方式已經(jīng)逐步受到臨床醫(yī)師認可，但是相關(guān)惡性腫瘤患者中的應(yīng)用仍開展的較少，關(guān)于具體治療效果及機制的研究報道也寥寥。本次研究著眼于晚期卵巢癌患者，重點分析腫瘤細胞減滅術(shù)聯(lián)合腹腔熱灌注化療對其產(chǎn)生的臨床獲益改變。VEGF是目前已知的促血管新生能力最明確的細胞因子，腫瘤細胞的存活及增殖都有賴于腫瘤血管的營養(yǎng)供應(yīng)，故患者血清VEGF水平與抗癌治療效果有良好的相關(guān)性[4]。治療前兩組患者的血清VEGF水平處于高值，但是組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義；在接受治療后，兩組患者VEGF水平降低，但是觀察組患者的各亞型水平顯著低于對照組對應(yīng)指標(biāo)水平?？梢娂毎麥p滅術(shù)聯(lián)合腹腔熱灌注化療可以降低VEGF水平并減少其與相關(guān)受體結(jié)合，直接抑制腫瘤血管新生能力，是遏制其增殖及轉(zhuǎn)移的實質(zhì)所在[5]。

晚期卵巢癌患者長時間受到腫瘤細胞的全方面侵蝕，基礎(chǔ)免疫功能已經(jīng)降低，其中對抗腫瘤細胞的主要免疫體系細胞免疫功能明顯降低[6]。在卵巢癌患者的轉(zhuǎn)歸中，細胞免疫功能的狀態(tài)與患者的治療效果直接相關(guān)，良好的自身免疫功能可以促進腫瘤細胞的抑制，擴大治療效果。治療前兩組患者細胞免疫功能指標(biāo)水平處于抑制狀態(tài)，組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義；接受治療后兩組細胞免疫水平有所好轉(zhuǎn)，但是觀察組各指標(biāo)值恢復(fù)更好。這可能與熱應(yīng)激狀態(tài)下機體血管擴張、血流加快，使得各組織系統(tǒng)特別是免疫系統(tǒng)獲得良好的血液循環(huán)，最終提升自身免疫功能以抵御腫瘤侵襲。

FGF為有廣泛生物活性的多肽生長因子，aFGF 與bFGF是其兩個分類。近年來較多研究發(fā)現(xiàn)在各類惡性腫瘤組織中，存在FGF及其受體的高表達，提示FGF可能參與腫瘤細胞的增殖活動[7]。FGF水平與腫瘤組織的增殖活動有一定關(guān)聯(lián)，本研究結(jié)果顯示，治療前兩組患者的腹腔沖洗液FGF水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義；觀察組患者的治療后腹腔沖洗液FGF水平顯著低于對照組。由此可見，在細胞減滅術(shù)后加入腹腔熱灌注化療，可以有效抑制腹腔FGF表達，進而抑制腫瘤細胞DNA合成，抑制腫瘤細胞分裂增殖[8]。

綜上所述，細胞減滅術(shù)聯(lián)合腹腔熱灌注化療有助于抑制卵巢癌患者的腫瘤血管新生，提升患者細胞免疫功能，抑制腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移。

參考文獻：

[1] BELIAEVA OA, KIREEVA GS, GORODNOVA TV, et al. Hyperthermic intraperitoneal chemotherapy in the treatment for recurrent ovarian cancer[J]. Vopr Onkol, 2014, 60(3): 343-347.

[2] PERRONE AM, ZAMAGNI C, DE IACO P. Hyperthermic Intraperitoneal Chemotherapy in Ephitelial Ovarian Cancer should be proposed in eight time points[J]. Eur J Surg Oncol, 2014, 40(8): 1028-1029.

[3] GLEHEN O, BAKRIN N. Response to: hyperthermic intraperitoneal chemotherapy in epithelial ovarian cancer should be proposed in eight time point[J]. Eur J Surg Oncol, 2014, 40(8): 1030-1031.

[4]梁秀菊,楚慧麗,王俊.多西他賽聯(lián)合腹腔熱灌注化療加熱療治療晚期卵巢癌[J].中國腫瘤臨床, 2013, 40(17): 1051-1053.

[5] BAKRIN N, BEREDER JM, DECULLIER E, et al. Peritoneal carcinomatosis treated with cytoreductive surgery and Hyperthermic Intraperitoneal Chemotherapy (HIPEC) for advanced ovarian carcinoma: a French multicentre retrospective cohort study of 566 patients[J]. Eur J Surg Oncol, 2013, 39(12): 1435-1443.

[6]蘇靜.靜脈聯(lián)合腹腔熱灌注化療對晚期卵巢癌療效及免疫功能的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2014, 24(10): 107-109.

[7] CASCALES CAMPOS P, GIL J, PARRILLA P. Morbidity and mortality outcomes of cytoreductive surgery and hyperthermic intraperitonealchemotherapy in patients with primary and recurrent advanced ovarian cancer[J]. Eur J Surg Oncol, 2014, 40(8): 970-975.

[8] GOUY S, UZAN C, PAUTIER P, et al. Results of oxaliplatin-based hyperthermic intraperitoneal chemotherapy in recurrent ovariangranulosa cell tumors[J]. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol, 2013, 170(2): 464-467.

（童穎丹編輯）

Effect of cytoreductive surgery combined with hyperthermic intraperitoneal perfusion chemotherapy on angiogenesis and immune function of ovarian cancer patient

Zhao-hua TIAN, Feng-tai MIAO, Xiao-li LI, Xi-hong ZHANG (Department of Gynecology and Obstetrics, the People's Hospital of
Zhengzhou City, Zhengzhou, Henan 450000, P.R. China)

Abstract:【Objective】To analyze the effect of cytoreductive surgery combined with hyperthermic intraperitoneal perfusion chemotherapy on the angiogenesis and immune function of ovarian cancer patients. 【Methods】Ovarian cancer patients in our hospital were enrolled as research subjects and randomly divided into control group who received cytoreductive surgery and observation group who received cytoreductive surgery combined with hyperthermic intraperitoneal perfusion chemotherapy. Then VEGF, cellular immune function and fibroblast growth factor (FGF) levels were compared between both groups.【Results】Serum VEGFA, VEGFB and VEGFC levels of the observation group were significantly lower than those of the control group (P< 0.05). CD3+, CD4+and CD4+/CD8+levels of the observation group were higher than those of the control group, CD8+level was lower than that of the control group (P < 0.05). aFGF and bFGF levels in the abdominal cavity lavage of the observation group were significantly lower than those of the control group (P< 0.05).【Conclusions】Cytoreductive surgery combined with hyperthermic intraperitoneal perfusion chemotherapy can inhibit angiogenesis, enhance cellular immune function and inhibit tumor proliferation of ovarian cancer.

Key words:ovarian cancer; cytoreductive surgery; hyperthermic intraperitoneal perfusion chemotherapy

收稿日期：2014-12-16

文章編號：1005-8982（2015）23-0091-04

中圖分類號：R737.31

文獻標(biāo)識碼：B