宋光勝，廉淑偉

(1.濟(jì)南市市中區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局，山東濟(jì)南250001;2.平陰縣人民醫(yī)院，山東平陰250400)

HPLC法測(cè)定銀黃解毒膠囊中蒙花苷的含量

宋光勝1，廉淑偉2

(1.濟(jì)南市市中區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局，山東濟(jì)南250001;2.平陰縣人民醫(yī)院，山東平陰250400)

摘要:目的建立高效液相色譜法測(cè)定銀黃解毒膠囊中蒙花苷的含量。方法采用高效液相色譜法，十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱;流動(dòng)相:甲醇－水－冰醋酸(26∶23∶1) ;紫外檢測(cè)器檢測(cè)。結(jié)果在8.08～56.56 μg范圍內(nèi)蒙花苷峰面積與進(jìn)樣量線性關(guān)系良好，r=0.999 8;樣品加樣回收率為99.40% (n=6)，RSD為0.92%。結(jié)論所建立的方法準(zhǔn)確可行，重復(fù)性好，可有效控制銀黃解毒膠囊的質(zhì)量。

銀黃解毒膠囊是一醫(yī)院制劑，是由野菊花、茯苓、金銀花、甘草、板藍(lán)根、山豆根、射干、連翹、黃芩、梔子、黃柏、蒼術(shù)、山慈姑等13味中藥組方而制成的膠囊劑。該制劑具有滋陰清熱，解毒利濕功能。用于病毒引起的帶狀皰疹、單純性皰疹等癥。為提高醫(yī)院制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以蒙花苷為指標(biāo)，采用高效液相色譜(HPLC)法，測(cè)定本制劑中野菊花的含量。

1　儀器與試藥

1.1儀器LC－15C高效液相色譜儀(日本島津) ; SPD－15C紫外檢測(cè)器(日本島津) ; SL－250超聲波清洗器(220 V/50 Hz) ; Shimadzu電子分析天平。

1.2試劑與樣品化學(xué)試劑均為色譜純;蒙花苷對(duì)照品(批號(hào): 111528－201308，中國食品藥品檢定研究院) ;銀黃解毒膠囊(自制，批號(hào): 20150121、20150123、20150125)。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，色譜柱為Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm，5 μm)柱;以甲醇－水－冰醋酸(26∶23∶1)為流動(dòng)相［1］;檢測(cè)波長(zhǎng)為334 nm［2］。按蒙花苷峰計(jì)算理論板數(shù)應(yīng)不低于3 000。

2.2對(duì)照品溶液的制備取適量蒙花苷對(duì)照品，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含30 μg的溶液，搖勻，即得。

2.3樣品供試液的制備［3］取本品內(nèi)容物1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇100 mL，稱定重量，加熱回流3 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液5 mL，加甲醇至10 mL，搖勻，即得。

2.4陰性對(duì)照溶液的制備取處方中藥材，除去野菊花，其余藥材按處方量和制備工藝，制成陰性對(duì)照樣品，按“2.3”項(xiàng)下方法，制備成陰性對(duì)照溶液。

2.5測(cè)定法精密量取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，測(cè)定色譜圖，見圖1。從色譜圖可見，其他成分對(duì)蒙花苷的測(cè)定無干擾，符合測(cè)定要求。

圖1　HPLC色譜圖A.蒙花苷對(duì)照品; B.陰性對(duì)照樣品; C.樣品

2.6線性關(guān)系考察對(duì)照品儲(chǔ)備液制備:精密稱取蒙花苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.202 mg的對(duì)照品貯備液。精密量取上述對(duì)照品貯備液1、2、3、4、5、6、7 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，各精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，以蒙花苷進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X)，進(jìn)行線性回歸，其回歸方程為: Y=34 480X－2 081.7，r=0.999 8。結(jié)果顯示，在8.08～56.56 μg范圍內(nèi)，蒙花苷進(jìn)樣量與峰面積的線性關(guān)系良好。

2.7精密度試驗(yàn)取濃度為28.28 μg·mL－1蒙花苷對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，每次10 μL，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，RSD=0.57%，證明所用儀器精密度良好。

2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)［4，5］精密稱取本品內(nèi)容物1 g，按“2.3”方法操作。置常溫下，分別于0、2、4、8、12、24 h，各精密量取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積，計(jì)算RSD。RSD為0.35%，表明在24 h內(nèi)供試品穩(wěn)定性良好。

2.9重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取本品內(nèi)容物6份(同一批號(hào))，按“2.3”項(xiàng)下方法操作。進(jìn)樣，記錄峰面積，計(jì)算含量。蒙花苷RSD=0.96% (n=6)，證明具有良好重復(fù)性。

2.10加樣回收率試驗(yàn)［6］取已知含量的樣品6份(同一批號(hào))，精密稱定，精密加入一定量對(duì)照品，按“2.3”項(xiàng)下方法操作。進(jìn)樣10 μL，測(cè)定峰面積，進(jìn)行回收率計(jì)算，結(jié)果見表1。

表1　樣品加樣回收率

由以上試驗(yàn)結(jié)果可知，該方法回收率良好?？捎糜诒局苿┲忻苫ㄜ盏暮繙y(cè)定。

2.11樣品的測(cè)定取3批樣品，按“2.3”項(xiàng)下方法操作，制成供試品溶液，樣品與供試品溶液分別進(jìn)樣10 μL，記錄峰面積(n=5)，并對(duì)樣品中蒙花苷含量進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果見表2。

表2　蒙花苷含量測(cè)定

3　討論

3.1供試品溶液的制備曾采用超聲處理和加熱回流提取兩種方法進(jìn)行試驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)果顯示，加熱回流提取法雜峰少，因此采用加熱回流提取的方法來制備供試品溶液。

3.2檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇，采用紫外檢測(cè)器，對(duì)蒙花苷對(duì)照品溶液和供試品溶液在200～400 nm波長(zhǎng)范圍進(jìn)行掃描，結(jié)果在334 nm有最大吸收，因此，檢測(cè)波長(zhǎng)定為334 nm。

供試品色譜中待測(cè)組分分離度良好。在確立的色譜條件下，方法重復(fù)性良好。

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·綜述·

關(guān)鍵詞:銀黃解毒膠囊;蒙花苷;高效液相色譜法

Determination of linarin in Yinhuangjiedu Capsules by HPLC

SONG Guang-sheng1，LIAN Shu-wei2
(1.Jinan City Central District Food and Drug Administration，Jinan 250001，China;2.Pingyin People's Hospital，Pingyin 250400，China)

Abstract:Objective To establish an HPLC method for the determination of linarin in Yinhuangjiedu Capsules.Methods HPLC method was adopted with eighteen alkyl silane bonded silica gel column.Mobile phase was methanol－waterglacial acetic acid(26∶23∶1)，and ultraviolet detector were used.Results There was a good linear relationship between the peak area of linarin and sample in the range of 8.08～56.56，r=0.999 8，and the recovery of sample was 99.40% (n=6)，RSD=0.92%.ConclusionThe method was feasible，reproducible，and can effectively control the quality of Yinhuangjiedu Capsules.

Key words:Yinhuangjiedu Capsules; Linarin; HPLC

作者簡(jiǎn)介:宋光勝，男，主管中藥師，研究方向:藥品監(jiān)管、藥品檢驗(yàn)，E－mail: 624827532@ qq.com

中圖分類號(hào):R927.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào):2095－5375(2015) 10－0577－003